抗-Tja抗体导致孕妇ABO血型正反定型不符1例*

徐路琼，贺坤华，徐银霞，胡映峰，保晶艳，马丽琼

云南省曲靖市第一人民医院输血科，云南曲靖 655000

影响ABO血型正反定型不相符的因素很多，其中不规则抗体是最复杂的影响因素之一[1]。所有p表型人血清中均含有抗-PP1Pk抗体(又称抗-Tja抗体),该抗体能结合补体造成溶血,与非p表型的A、B、O红细胞均表现强烈的溶血反应,使ABO正反定型不一致[2-4]。孕妇做血型鉴定时，发现1例患者ABO血型正反不符，在其血清中检测到抗-Tja抗体，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 患者，女，25岁，彝族，云南曲靖人，无输血史。患者第1次怀孕产检时血型报告为B型，其余各项产检指标均正常，怀孕8周时自然流产，未引起重视。现第2次怀孕,孕12周来本院产检，卡氏法血型鉴定时发现ABO血型正定型为B型，反定为O型。

1.2仪器与试剂 ABO、Rh血型检测卡、抗-A/抗-B血型定型试剂、0.2 mol/L 2-巯基乙醇(2-Me)、不规则抗体检测试剂(批号20170802)、抗球蛋白检测卡均由长春博迅生物技术有限责任公司生产；抗体鉴定谱细胞(批号20171020)由江苏中济万泰生物医药有限公司生产；人源抗-Tja抗体、人p表型红细胞均由云南省昆明市血液中心提供；单克隆抗-P1由上海血液生物医药有限责任公司生产。KA-2200型日本久保田离心机；TD-A型医用离心机、FYQ型免疫微柱孵育器(长春博研科学仪器有限责任公司)；SSW-600-2S型电热恒温水槽(上海博讯实业有限公司医疗设备厂)。

1.3方法

1.3.1患者及亲属血型鉴定 采用试管法复查患者ABO血型,检测患者红细胞上H表面抗原，参照血站技术操作规程(2012版)进行操作[5]。患者亲属血型鉴定采用微柱凝胶法检测,按操作手册及试剂说明书进行操作。

1.3.2不规则抗体筛查与鉴定 患者血清和乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝血浆分别用微柱凝胶法和盐水法进行不规则抗体筛查，选择抗筛结果阳性介质进行谱细胞鉴定，并比较血清用2-Me处理前后的结果来判断抗体的特性。

1.3.3p表型确认 患者红细胞与人源抗-Tja抗体、患者血清与人p表型红细胞在盐水介质中反应，立即离心判断结果P1Pk血型结果。

1.3.4抗体效价测定 用生理盐水倍比稀释患者EDTA-K2抗凝血浆，加入4%O型正常献血员红细胞悬液，测定IgM性质的抗体效价。200 μL血浆与200 μL 2-Me混合，37 ℃水浴箱孵育15 min取出，用生理盐水倍比稀释，取50 μL加入抗人球蛋白卡中，加入同体积0.8%O型正常献血员红细胞悬液,混匀后放入37 ℃免疫微柱孵育器15 min后离心，测定IgG性质的抗体效价。

2 结 果

2.1血型鉴定 患者ABO血型正反定型不符，正定型为B型，反定型为O型，怀疑血浆中存在不规则抗体。见表1。

表1 患者ABO血型鉴定结果

2.2抗体筛查实验 患者血清与抗体筛查细胞在盐水介质中有凝集并溶血，EDTA-K2抗凝血浆与抗筛细胞在盐水及微柱凝胶法有凝集无溶血。见表2。

表2 抗体筛查实验结果

2.3不规则抗体特异性鉴定 患者血清与11人份谱细胞在盐水介质立即离心均呈阳性，2次离心后呈现部分溶血，在37 ℃放置10 min，呈现完全溶血。将血清以2-Me灭活IgM抗体后，盐水介质下均阴性，微柱凝胶法检测和所有谱细胞呈现强度一致的凝集。见表3。

表3 患者不规则抗体鉴定结果

2.4p表型确认试验 患者红细胞与人源抗-Tja抗体反应呈阴性，患者血清与人p表型红细胞反应呈阴性，试剂OC呈阳性。

2.5抗体效价测定 患者血浆中IgM抗-Tja抗体效价为8；IgG抗-Tja抗体效价为16。见表4。

表4 抗-Tja抗体效价测定结果

2.6患者亲属血型鉴定 患者哥哥ABO血型正定为B型，反定为O型，正反定型不符，经血清学鉴定患者哥哥为B型p血型。患者父亲和丈夫为O型，母亲为B型，均为P2型,见表5。

表5 患者亲属血型鉴定结果

2.7交叉配血情况 患者血清和患者哥哥血标本用盐水介质、微柱凝胶卡交叉配血主次侧无凝集无溶血，和其他亲属及库存血交叉配血试验均不相合,全部是主侧阳性,次侧阴性。

3 讨 论

人类红细胞P1Pk血型系统旧称P血型系统，2011年国际输血协会确认该系统有3个抗原，分别是P1、PK、NOR，将该系统编号为003[6-7]。人P1Pk血型系统缺乏所有抗原时成为罕见的p表型[8]。所有p表型的个体血清中均存在抗体，这种抗体可凝集除p表型之外的所有红细胞，并能结合补体造成溶血[9]，当抗体经过胎盘，可导致妊娠早期女性的习惯性流产，因此具有重要的临床意义。

该患者血清与抗体筛选试剂混匀后立即离心有凝集及溶血，而血浆与抗体筛选试剂混匀后立即离心有凝集无溶血，说明患者血清中存在IgM性质的抗体，该抗体具有补体活性；患者血清与谱细胞混匀后立即离心均出现2+凝集，将血清以2-Me灭活IgM抗体后，立即离心谱细胞均阴性，微柱凝胶法检测和所有谱细胞呈现强度一致的凝集，说明该抗体IgM和IgG混合；综合以上实验结果怀疑存在抗-Tja抗体[10]，患者红细胞与人源抗-Tja抗体反应呈阴性，进一步证实该患者为p表型。

含有高频抗原抗体的患者供血困难，目前可通过自体输血、亲戚互助献血和求助稀有血型库等途径解决。p表型为常染色体隐性遗传，在其亲属中可能找到相配合的血液[10]。家系调查发现患者和其哥哥均为B型，p血型，进一步证实p表型可经常在同代中出现[11]。本例拟采用患者自身输血和其哥哥互助献血相结合的方法进行术前备血。

患者于第1次产检建档立卡时医生只要求鉴定ABO和RHD血型，未做抗体筛查，ABO正反定型不符也没有引起检测者的重视，报告为B型，患者怀孕8周时自然流产。因此，为防止漏诊或误诊,不规则抗体筛查有必要列入孕妇产检项目，特别是对不明原因引起的习惯性流产患者,需作红细胞抗体筛查试验,可排除可能由红细胞抗体引起的流产，对预防和治疗ABO血型系统以外的新生儿溶血病具有重要的临床意义。对于该孕妇，产科医师和患者沟通，通过监测抗体效价水平、大脑中动脉血流峰值等指标，指导临床治疗。