1.Tian Li1,Dengfeng Yan1,Xiaohui Wang1,Liang Zhang1and Ping Chen1,2,3(1.College of Biotechnology,Southwest University,Chongqing 400715,China;2.State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology,Southwest University,Chongqing 400715,China;3.Key Laboratory of Sericultural Biology and Genetic Breeding,Ministry of Agriculture and Rural Affairs,Chongqing 400715,China).Hemocyte changes during immune melanization in Bombyx mori infected with Escherichia coli.Insects,2019,10(9):E301.
题目:感染了大肠杆菌的家蚕在免疫黑化过程中的血细胞变化
摘要:血淋巴黑化是昆虫和其他节肢动物的一种保守的免疫反应。然而,血淋巴系统在黑化反应中的生理过程几乎没有被研究。本文观察了家蚕感染大肠杆菌后免疫黑化过程中的血细胞变化。结果显示,刚开始有细胞聚集成团,但它在接下来的强烈免疫攻击期间消失,只有部分聚集的血细胞被黑化;免疫攻击过后血细胞数快速减少,然后缓慢上升至峰值,再减少,最后恢复至正常。粒细胞参与免疫早期和后期的细胞聚集,浆细胞作用于血细胞凝集和黑化的时间最长,在黑化的高峰阶段出现较多的卵母细胞。此外,血细胞的聚集和黑化在低抗病原菌侵染中起着至关重要的作用;与4龄蚕相比,5龄蚕的循环系统保持有更高的血细胞数和更强的抗菌活性;体外免疫黑化在一个独立过程中是最有可能优先实行的。以上些结果反映出了血淋巴免疫黑化生理过程的主要特征,为进一步研究家蚕免疫的完整机制提供了重要的基础。
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2.Luo-Luo Wang1,Luc Swevers2,Caroline Rombouts3,4,Ivan Meeus1,Lieven Van Meulebroek3,Lynn Vanhaecke3and Guy Smagghe1(1.Department of Plants and Crops,Faculty of Bioscience Engineering,Ghent University,9000 Ghent,Belgium;2.Insect Molecular Genetics and Biotechnology,Institute of Biosciences and Applications,National Centre for Scientific Research“Demokritos”,15341 Athens,Greece;3.Laboratory of Chemical Analysis,Department of Veterinary Public Health and Food Safety,Faculty of Veterinary Medicine,Ghent University,9820 Merelbeke,Belgium;4.Laboratory of Cell Biology&Histology,Department of Veterinary Sciences,Antwerp University,FacultyofPharmaceutical,Biomedical and Veterinary Sciences,2610 Wilrijk,Belgium).A metabolomics approach to unravel Cricket Paralysis virus infection in silkworm Bm5 cells.Viruses,2019,11(9):E861.
题目:蟋蟀麻痹病毒感染家蚕Bm5细胞的代谢组学研究
摘要:宿主代谢如何响应昆虫病毒感染以及如何与发病机制有关的研究很少。我们以前的研究发现,蟋蟀麻痹病毒(CrPV)在进行急性感染前,有一短期持续存在于家蚕Bm5细胞中。本项研究采用基于高分辨质谱的代谢组学方法,研究宿主代谢在Bm5细胞感染CrPV的过程中是如何变化的,这些变化从持续性到致病性的转变特征。结果发现,CrPV感染导致Bm5细胞发生明显并阶段特征性的代谢变化。不同代谢产物的丰度和途径分析,进一步确定了病毒生命周期不同阶段的特定代谢特征。值得注意的是,葡萄糖和谷氨酰胺水平在CrPV持续感染期间显著增加,在随后的致病阶段急剧下降,这表明中枢碳代谢在CrPV感染Bm5细胞的过程中发生了显著变化。此外,在CrPV感染过程中还检测到了多胺水平的动态变化。综上所述,本研究首次揭示了CrPV感染昆虫细胞的代谢动力学,提出了CrMV持续感染对Bm5细胞的氨基酸和糖代谢调节起着核心作用。
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3.Ping Lia1,Jingwei Hub2,Chaowei Wenc3,Yang Hang2,Zhuohua Zhou3,Min Xie3,Jiacheng Lv3,Chunmeng Wang3,Yinghao Huang4,Jiaping Xue5and Mingjie Deng6(1.Analysisand Testing Center,School of Pharmaceutical Sciences,Wenzhou Medical University,Wenzhou,China;2.Biotechnology Center of Anhui Agricultural University,Anhui Agricultural University,Hefei,China;3.School of Laboratory Medicine and Life Sciences,Wenzhou Medical University,Wenzhou,China;4.Renji College,Wenzhou Medical University,Wenzhou,China;5.School of Life Sciences,Anhui Agricultural University,Hefei,China;6.Anhui International Joint Research and Development Center of Sericulture Resources Utilization,Hefei,China).Sanguinarine caused larval lethality and growth inhibition by suppressing energy metabolism in silkworms,Bombyx mori.Pesticide Biochemistry and Physiology,2019,190:154-162.
题目:血根碱通过抑制家蚕能量代谢引起幼虫死亡和生长抑制
摘要:血根碱是一种天然生物碱,分布于罂粟科的几种植物中。桑树的抗肿瘤、抗氧化、抗菌、抗炎作用已被广泛报道,但其对鳞翅目昆虫的特异性作用机制尚不清楚。本研究通过毒理学试验来确定血根碱对家蚕的毒理学参数,采用基于核磁共振(NMR)的代谢组学方法来分析桑蚕摄食血根碱后的血淋巴代谢产物变化。结果显示,喂饲0.05~0.3%血根碱可显著抑制4龄幼虫的生长,喂饲0.3%血根碱组蚕在第4天和第5天出现大量死亡;喂饲0.3%血根碱24小时后,血淋巴中海藻糖和柠檬酸的含量增加,丙酮酸、琥珀酸、苹果酸和富马酸盐的浓度降低;喂饲0.3%血根碱均降低海藻糖酶(THL)的活性和编码基因的转录水平。血根碱引起家蚕生长抑制一个重要机制可能被解释如下:血根碱引起海藻糖水解作用减弱,THL活性降低,THL编码基因转录水平减弱,从而导致能量代谢被抑制,最终引起家蚕幼虫的抗生长和高致死率。本研究从能量代谢角度为血根碱的杀虫作用提供了新见解,为血根碱在桑树鳞翅目害虫防治中的应用提供了依据。
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4.Ichaya Yiemwattana1,Ruchadaporn Kaomongkolgit2,Sodsi Wirojchanasak1and Niratcha Chaisomboon3(1.Department of Preventive Dentistry,Faculty of Dentistry,Naresuan University,Phitsanulok,Thailand;2.Department of Oral Diagnosis,Faculty of Dentistry,Naresuan University,Phitsanulok,Thailand;3.Research Laboratory,Faculty of Dentistry,Naresuan University,Phitsanulok,Thailand).Morus alba stem extract suppresses Matrix Metalloproteinases(MMP)-1,MMP-9,and tissue inhibitors of Metalloproteinase(TIMP)-1 expression via inhibition of IκBα degradation induced by PorphyromonasgingivalisLPS signal in THP-1 Cells.European Journal of Dental Education,2019,13(2):229-234.
题目:桑白皮提取物通过抑制THP-1细胞中牙龈卟啉单胞菌LPS信号诱导的IκBα降解来抑制基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-9和组织金属蛋白酶(TIMP)-1的表达
摘要:本研究的目的是探讨桑白皮提取物(MSE)对在牙龈卟啉单胞菌脂多糖(LPS)激活的急性单核白血病细胞株(THP-1)中的基质金属蛋白酶1(MMP-1)1、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和组织金属蛋白酶1(TIMP-1)表达的抑制作用。用非细胞毒性浓度MSE和1 μg/mL牙龈卟啉单胞菌LPS处理THP-1细胞,通过定量实时PCR检测MMP-1、MMP-9和TIMP-1的mRNA水平,酶联免疫吸附法检测培养液中的分泌蛋白,Western blot法检测Kappa B-α蛋白抑制剂(IκBα)的降解,试验数据进行方差分析和TUKY差异显著性比较。结果显示,20μg/mL和40 μg/mL MSE显著下调MMP-1和MMP-9基因及蛋白的表达,上调TIMP-1基因的表达(p<0.05);牙龈卟啉单胞菌LPS诱导IκBα降解,而添加MSE(20和40 μg/mL)则增加IκBα胞浆水平。MSE抑制牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导的MMPs表达,并通过抑制THP-1胞质IκBα降解来增加TIMP-1基因的表达。结果表明,MSE在对MMPs和TIMP之间的调节机制上发挥了积极的作用,这为MSE对牙周炎的治疗潜力提供了可靠依据。
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5.Hyun-Dong Cho1,Hye-Ji Min1,Yeong-Seon Won3,Hee-Young Ahn2,Young-Su Cho2and Kwon-Il Seo2(1.Industry-Academy Cooperation,Dong-A University,49315,Busan,Republic of Korea;2.Department of Biotechnology,Dong-A University,37,Nakdong-daero 550 Street,Saha-gu,Busan,49315,Republic of Korea;3.Institute of Agriculture Life Science,49315,Busan,Republic of Korea).Solid state fermentation process with Aspergillus kawachii enhances the cancer-suppressive potential of silkworm larva in hepatocellular carcinoma cells.BMC Complementary and Alternative Medicine,2019,19(1):241.
题目:川崎曲霉固态发酵增强了家蚕幼虫对肝癌细胞的抑癌能力。
摘要:家蚕幼虫是世界上最古老的食物和传统医药资源。虽然报道了家蚕幼虫对各种慢性病的治疗,但通过微生物发酵来改善家蚕幼虫的生物活性尚未见报道。本研究通过川崎曲霉固态发酵法来生产发酵家蚕幼虫,并研究其在人肝癌细胞中的抗肿瘤活性。本文检测了未发酵家蚕幼虫乙醇提取物(SEE)和发酵家蚕幼虫乙醇提取物(FSEE)对人肝癌细胞HepG2的抗癌作用,用气相色谱法、氨基酸分析仪和火焰原子吸收分光光度计分别测定比较了SEE和FSEE的脂肪酸、游离氨基酸和矿物质含量的变化,同时通过SRB染色、细胞周期分析、膜联蛋白V染色、Hoechst染色、DNA片段分析和Western blot分析了其抗肿瘤作用机制。结果显示,与SEE相比,FSEE处理可导致HepG2细胞凋亡,其特征为G0/G1期细胞周期阻滞、DNA断裂和凋亡小体形成;FSEE显著上调了HepG2细胞中的促凋亡蛋白和下调了抗凋亡蛋白,但相同浓度的SEE没有诱导HepG2细胞的细胞周期阻滞或凋亡;川崎曲霉发酵过程,导致家蚕幼虫体中脂肪酸含量增加以及氨基酸和矿物质含量下降。研究结果表明,川崎曲霉固态发酵的家蚕幼虫能通过调节次级代谢产物来增强人肝癌细胞中Caspase依赖性和非依赖性的凋亡途径。
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6.Shoumin Fang1,2,Qiuzhong Zhou1,Quanyou Yu1,Ze Zhang1(1.School of Life Sciences,Chongqing University,Chongqing,401331,China;2.College of Life Science,China WestNormal University,Nanchong,637002,China).Genetic and genomic analysis for cocoon yield traits in silkworm.Scientific Reports,2020,10(1):5682.
题目:家蚕蚕茧产量性状的遗传和基因组分析
摘要:本地品种为研究产量性状进化的遗传机制提供了一个强有力的模型。家蚕(Bombyx mori)是蚕桑产业的重要本地品种,而控制蚕茧产量的机制还不清楚。本文以家蚕及其野生野蚕为杂交亲本,采用限制性位点相关DNA测序法(RAD-Seq)对100个BC1个体进行了测序,构建了包含9632个标记的连锁图谱,同时对4个蚕茧产量性状进行了高分辨率数量性状位点(QTL)定位,结果共鉴定出11个QTL,其中1个为野蚕增产QTL。将群体基因组学和转录组学分析与QTLs相结合,在家蚕和野蚕5龄幼虫丝腺转录组中发现了14个驯化相关基因和71个差异表达基因(DEGs)。实时定量PCR(qPCR)分析明确了两个重要候选基因(KWMTBOMO04917和KWMTBOMO12906)的表达与蚕茧产量相关。我们的研究结果为家蚕复杂的产量性状的分子机制提供了新的见解,同时联合方法可能是鉴定本地品种和野生亲缘品种中可能存在的因果基因的一种有效方法。
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7.Hiroki Kusaka1,Shunsuke Kita1,Takashi Tadokoro1,Kouki Yoshida1,Yoshiyuki Kasai1,Harumi Niiyama2,Yukari Fujimoto3,Shinya Hanashima2,Michio Murata2,Shigeru Sugiyama2,4,Toyoyuki Ose1,5,6,Kimiko Kuroki1,Katsumi Maenaka1,5(1.Faculty of Pharmaceutical Sciences,Hokkaido University,Sapporo,060-0812,Japan;2.Department of Chemistry,Graduate School of Science,Osaka University,1-1 Machikaneyama,Toyonaka,Osaka,560-0043,Japan;3.Department of Chemistry,Faculty of Science and Technology,Keio University,Yokohama,223-8522,Japan;4.Faculty of Science&Technology,Kochi University,Kochi,780-8520,Japan;5.Graduate School of Life Science,Hokkaido University,Sapporo,Hokkaido,060-0810,Japan;6.Faculty of Advanced Life Science,Hokkaido University,Sapporo,060-0810,Japan).Efficientpreparation ofhuman and mouse CD1d proteins using silkworm baculovirus expression system.Protein Expression and Purification,2020,22:105631.
题目:利用家蚕杆状病毒表达系统高效制备人和小鼠的CD1d蛋白
摘要:CD1d是一种主要的组织相容性复合物(MHC)Ⅰ类糖蛋白,与自然免疫T(NKT)细胞识别的糖脂抗原结合,但迄今为止对CD1d与糖脂抗原结合和受体识别的结构基础的认识仍然有限。本文利用家蚕杆状病毒表达系统建立了人和小鼠CD1d胞外区的制备方法。人和小鼠的CD1d和β2-微球蛋白(β2m)在家蚕杆状病毒系统中共表达成功,但人CD1d的产量较低。为了提高蛋白质产量,制备了一种人CD1d与β2m通过柔性GS连接而成的多肽复合物。结果多肽复合物的产量(50 μg/幼虫)高于共表达复合物。此外,差示扫描量热分析显示GS连接剂使CD1d复合物更加稳定和均匀。结果表明,家蚕杆状病毒表达系统在CD1d的结构和生物物理学研究中具有成本低、操作简便、无生物危害、快速、高产等优点。
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8.Hui Wang1,Zhengting Lu1,Mengxue Li1,Yilong Fang1,Jianwei Qu1,Tingting Mao1,Jian Chen1,Fanchi Li1,2,Haina Sun1,2,BingLi1,2(1.School of Basic Medicine and Biological Sciences,Soochow University,Suzhou,Jiangsu,215123,PR China;2.Sericulture Institute of Soochow University,Suzhou,Jiangsu,215123,PR China).Responses of detoxification enzymes in the midgut of Bombyx mori after exposure to low-dose of acetamiprid.Chemosphere,2020,251:126438.
题目:低剂量啶虫脒对家蚕中肠解毒酶的影响
摘要:家蚕是重要的经济昆虫,广泛使用新烟碱类杀虫剂所造成的环境污染已严重影响蚕业生产的安全。本文测定了新烟碱类杀虫剂---啶虫脒对5龄家蚕幼虫的半数致死剂量(LC50),检测了家蚕连续暴露于低剂量啶虫脒后,其血淋巴和中肠中的啶虫脒残留,并研究了解毒相关基因的转录水平和解毒酶的活性。结果啶虫脒对家蚕幼虫具有很强的毒性(24小时LC50为1.50 mg/L);连续暴露于低剂量(0.15 mg/L)啶虫脒后,血淋巴和中肠中的啶虫脒残留浓度在48 h时分别为0.90和0.58 μg/mg,在96 h时均下降;连续暴露于低剂量啶虫脒后,CYP4M5和CYP6AB4的转录水平和P450酶活性在24 h时均显著提高,而CarE和CarE-11的转录水平以及CarE酶的活性均受到啶虫脒的抑制。在暴露于啶虫脒的24~72 h后,GSTe3和GSTd1的转录水平显著上调,GST酶活性也在48~96 h显著升高;解毒酶的关键上游基因FoxO、CncC和Keap1的表达水平也呈现出与GST基因相似的趋势。以上结果表明,啶虫脒可通过FoxO/CncC/Keap1信号途径降低在中肠中的含量,其中GSTs表达上调在解毒反应中起关键作用。
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9.YanZhang1,2,3,MuyaTang1,2,3,ZhaomingDong1,2,3,DongchaoZhao1,2,3,LingnaAn1,2,3,HongtaoZhu1,2,3,QingyouXia1,2,3,PingZhao1,2,3(1.State Key Laboratory of Silkworm GenomeBiology,CollegeofBiotechnology,Southwest University,Chongqing 400715,China;2.Biological Science Research Center,Southwest University,Chongqing 400715,China;3.Chongqing Key Laboratory of Sericultural Science,Chongqing Engineering and Technology Research Center for Novel Silk Materials, Southwest University, Chongqing 400715,China).Synthesis,secretion,and antifungal mechanism of a phosphatidylethanolamine-binding protein from the silk gland of the silkworm Bombyx mori.International Journal of Biological Macromolecules,2020,149:1000-1007.
题目:家蚕丝腺磷脂酰乙醇胺结合蛋白的合成、分泌及抗真菌机制
摘要:蚕茧含有蛋白酶抑制剂、血清蛋白等若干种抗菌蛋白,并为蚕蛹提供封闭的保护。本文采用半定量RT-PCR、Western blotting和免疫荧光技术,在茧丝中鉴定了一种具有抗菌活性的新的家蚕磷脂酰乙醇胺结合蛋白(BmPEBP)。结果表明,Bm-PEBP是在蚕中部丝腺中合成,并分泌到茧丝的丝胶层中。功能分析表明,BmPEBP能与真菌细胞膜结合,抑制白念珠菌、酿酒酵母、白僵菌和烟曲霉4种真菌的孢子生长。BmPEBP与膜磷脂相互作用的研究表明,该蛋白对磷脂酰乙醇胺具有较强的结合亲和力,对磷脂酰肌醇亲和力较弱,对磷脂酰丝氨酸或磷脂酰胆碱无亲和力。圆二色光谱表明,Bm-PEBP通过与磷脂酰乙醇胺结合而减少β-片层的形成以及诱导α-螺旋基序的出现,从而引起其分子构象的变化。我们推测BmPEBP通过与真菌膜上的磷脂酰乙醇胺相互作用而在茧丝中发挥抗真菌作用。
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