无精子症男性不育与染色体核型异常关系分析

李光，张译夫，文陶非

（长春市妇产医院 生殖医学中心，吉林 长春 130042）

0 引言

男性不育是指性生活正常情况下，夫妇婚后同居生活一年以上，在排除女方因素且未采取任何避孕措施的情况下不育者[1]。临床分析这主要是因男性生精异常而导致，在男性不育患者中，约20%患者是因精子生成障碍而导致的少精、弱精或无精。而且研究发现染色体异常是精子生成障碍的主要因此，临床有必要对无精症患者实施染色体核型分析，明确其异常情况。针对男性不育患者临床诊疗中，一般会采取进行细胞遗传学染色体核型分析检验项目。基于此，本文选择110例无精少精弱精子症男性不育患者，就无精子症男性不育与染色体核型异常关系进行分析。

1 资料与方法

1.1 一般资料。选取我院2018年1月至2019年6月收治的110例无精子症男性不育患者作为此次研究的研究对象。年龄21-58岁，平均（35.88±4.03）岁，不孕时间在1-11年，平均（7.88±2.02）年。以上患者婚后均未避孕，女方健康未见染色体异常。所有研究对象精液常规检查3次，每次至少间隔3d。根据《人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册》的实验标准，精子密度>20×106/mL，（A+B）级精子百分率超过50%，表示处于正常范围内。连续进行3次精液分析，且经离心沉淀镜检无精子，则判定为无精子症，精子密度<5×106/mL者为严重少精子症。110例患者经检查均判定为无精子症。所有患者接受专科医生进行体格检查，经《男性生殖病史询问表》采集病史，包括结婚时间、性成熟情况、避孕措施、性生活状况、既往病史、既往生育或受孕情况、外伤、泌尿系感染史与手术史等。

1.2 检测仪器与试剂。选用Forma3111型的恒温培养箱，恒温水浴箱、隔水式电热恒温培养箱，人体外周血淋巴细胞培养基与细胞培养液。

1.3 检查方法。取样前需告知研究对象相关情况，并签署同意书。取肝素抗凝静脉血1-2 mL，实施无菌操作，接种在两种不同厂家培养基中，并分别放入到2个独立恒温培养中，培养条件37℃、72 h，第3 d每个瓶中加入2滴秋水仙素（选用注射器剂量为2 mL，选用7号针头）3 h收获、处理、纸片与G显带。G显带分析，计数30个中期分裂相，对3-5个核型进行分析，染色体多态可结合C显带方法，确定具体核型。

2 结果

110例患者检查被确诊为无精子症男性不育实施染色体核型检查，显示，15例出现染色体异常，异常率为13.67%。其中性染色体异常10例，占异常总数66.67%，包括47，XXY（Klinefelter综合征）8例，Y多态2例。常染色体异常3例，约为异常总数20.00%。9号染色体臂间倒位2例。所有异常核型中，发病率最高即Klinefelter综合征（47，XXY），占比53.33%（8/15），见表1。

表1 无精子症男性不育与染色体核型状况分析

3 讨论

不孕不育症为一种临床常见病，不育是男女双方共同问题，女性原因导致的称为不孕，男性原因导致的成为不育。其中男性不育可分为性功能障碍性不育症和性功能正常性不育症，性功能正常性不育是因精液异常而导致。无精子症为一种类型，是指精液离心沉淀镜检，连续3次未发现精子，并排除逆行射精、不射精情况，输精管道梗阻、毒性药物与感染等原因，也会导致男性无精子症，遗传性状的变化，也会导致男性无精子症[2-3]。导致男性不育的原因可分为细胞遗传学原因，包括基因异常、染色体核型异常，还包括分子遗传学原因，是指促性腺激素缺乏。

细胞遗传学为男性不育的主要研究方法，染色体异常与相关基因缺失均会对精子产生不同程度影响，并影响生育能力，这是导致弱精、少精、无精的主要因此[4]。本研究中，110例患者检查被确诊为无精子症男性不育实施染色体核型检查，显示，异常率为13.67%。染色体数目异常中Klinefelter 综合征是发生率最高，本文研究15例异常核型中，Klinefelter综合征共8例。这类患者多思维正常、身材高大、四肢细长、阴茎小、睾丸发育状况不佳、无精子生成，有男性乳房发育，腋毛、胡须、阴毛稀少或基本无。其发生机制主要是因性染色体在减数分裂时，不分离而导致，与高龄孕产相关。47，XXY患者的Y染色体正常，因此存在正常睾丸发育，但睾丸发育状况不佳，而导致生精上皮细胞死亡，因此出现无精[5-6]。

染色体多态性是高度重复DNA结构中出现异染色质区的微小变异，一般是D/G组染色体随体区出现变异以及1、9、16号染色体出现缺失，这些高度重复DNA序列中几乎无编码结构基因[7]。其中Y染色体多态，主要是表现为小Y或大Y。研究表明，大Y多来自Y异染色质中DNA高度重复，重复DNA会导致染色质DNA量增加，出现有丝分裂错误，这可能受生殖异常的影响。因Y染色体长臂上有与男性生育能力相关、性别分化、性腺发育相关的基因，其高度重复可导致精子生成障碍。因此，临床认为大Y主要与性分化异常相关。小Y为一种多态性变化，一般不会影响生育，但也有研究提出，Y染色体部分遗传物质丢失，会导致自然流产、不育。因此临床认为大Y或小Y均与遗传效应相关。

常染色体易位。本次研究中检出常染色体平衡易位患者3例。常染色体相互易位影响着男性不育，常染色体上存在较多影响精子生成基因，一旦出现易位导致基因断裂或缺失，便会出现无精或少精。而且研究还发现9号染色体臂间倒位也会影响男性不育。其遗传效应主要有缺失或重复片段的长短与所含基因致死效应相关。分析9号染色体臂间倒位影响精子障碍发生，可能是与基因到位阻碍第一次减数分裂时二价体的形成相关。

本研究性染色体异常占比4.55%。Y染色体是含有决定男性特征的关键基因，主要包括睾丸成熟因子和睾丸决定因子，以此调控男性生殖器的发育及成熟。因此性染色体异常自然会影响生殖器的正常发育成熟。本研究显示异常核型中，发病率最高即Klinefelter综合征（47，XXY），占比53.33%。Klinefelter综合征发生机制与X染色体相关，主要是某些因素导致患者X染色体在生殖细胞减数分裂中出现分离异常[3]。染色体核型异常为男性不育的主要原因，临床可通过检测男性不育异常情况，其意义不在于早发现早治疗，直至现在临床并未发现有效的关于改变男性不育异常染色体核型的的方法，该检测开展的意义在于提早放弃对男性不育的无效治疗，引用他人精子提高受孕率。

综上所述，男性不育的重要原因之一即染色体核型异常，对患者染色体核型进行分析有利于男性不育诊断，并为临床治疗提供依据，具有重要意义。