鼻息肉患者血清TNF-α、IL-17的表达及其意义①

罗经泾，黄晓丽，范宗宪

(佳木斯大学附属第一医院，黑龙江 佳木斯 154003)

鼻息肉(nasal polyp)是一种很常见的耳鼻咽喉头颈外科的疾病，目前的治疗方法以手术治疗为主。其成人发病率约为1%～2%，术后复发率约为15%[1]。其难治性和易复发性的一个重要原因就在于该病的发病机制尚不明了。鼻息肉的发病已有很多学说表明可能与遗传、变态反应、感染等多种因素相关[2]。 就目前已有的研究来看，各种免疫细胞和细胞因子的作用举足轻重。很多学者发现Th1和Th2细胞失衡是鼻息肉病程的关键机制，而Th17细胞是否参与其中的平衡也是目前很多研究的对象。Th17细胞通过产生的白介素17[3]与Th1细胞产生的肿瘤坏死因子α可能在鼻息肉的发病及复发中扮演重要角色。在Reibman等的研究中TNF-α和IL-17会导致呼吸道的上皮细胞产生巨噬细胞炎性蛋白MIP-3α/CCL20增多[4]，而吴等[5]学者认为MIP-3α/CCL20直接对鼻黏膜产生作用，且趋化嗜酸性粒细胞和中性粒细胞，促进炎症的发展，刺激新生血管的产生，最终造成鼻息肉发生。本次研究旨在通过ELISA测定和比较初发与复发的鼻息肉患者和正常志愿者血清中IL-17和TNF-α的浓度，并分析它们的关系，从一个侧面来探讨在这两个因子在鼻息肉的发病和复发中可能起到作用。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2018-01～2018-12在佳木斯大学附属第一医院确诊的初发鼻息肉患者40例作为A组，其中男25例，女15例，年龄21～58岁，平均(45±13)岁，诊断依据病史采集、前鼻镜检查、鼻内镜检查和鼻窦CT检查，排除标准为患有其他良恶性肿瘤、其他急慢性炎症性疾病、支气管哮喘或阿司匹林过敏史。手术后复发鼻息肉患者24例作为B组，其中男15例，女9例，年龄35～60岁，平均(51±16)岁，其诊断和排除标准同上。选取同期于我院体检的健康成人20例为健康对照组，其中男12例，女8例，年龄24～60岁，平均(43±13)岁，排除标准同上。所有研究对象均已获得知情同意。实验组和对照组之间性别、年龄差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 材料准备，实验组和对照组所有对象晨起空腹采血，EDTA抗凝，加入1.5mL的离心管中，经3500r/min离心10min后分离出血清，-20℃冰箱保存待测。将IL-17 ELISA试剂盒和TNF-α ELISA试剂盒保存在4℃冰箱中。

1.2.2 ELISA法测量所有对象血清中的TNF-α和IL-17的浓度，试剂盒为武汉博士德公司产品，操作步骤严格地按试剂盒的使用说明书进行，所有待测对象和标准品设两个复孔，用酶标仪450nm处测量OD值。

1.3 统计学方法

采用SPSS21.0软件进行处理，数据采用均数±标准差的方法来表示，比较采用独立样本t检验，P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 各组血清TNF-α和IL-17水平的检测

A组、B组血清中TNF-α和IL-17的水平均明显高于对照组(P<0.05)，见表1～2。差别有统计学意义，且B组血清中的TNF-α和IL-17浓度明显高于A组(P<0.05)，差别具有统计学意义。见表3。

表1 初发组(A组)与对照组血清TNF-α和IL-17水平对比

表2 复发组(B组)与对照组血清TNF-α和IL-17浓度对比

表3 复发组(B组)与初发组(A组)血清TNF-α和IL-17浓度对比

2.2 各组血清中TNF-α水平和IL-17水平的相关性

在A组和B组TNF-α和IL-17的浓度之间存在中等程度正相关的关系，而对照组两因子之间的为极弱程度相关。见表4。

表4 各组TNF-α和IL-17浓度之间的相关性Pearson分析

3 讨论

鼻息肉的发病与复发过程中各种免疫细胞和其产生的细胞因子的作用举足轻重。IL-17主要由Th17细胞产生，在炎症反应的进一步进行当中扮演重要角色[6]。它能促进很多细胞释放各种其他细胞因子来促进炎症反应，它还可以和其他细胞因子(TNF-α、IL-1等)协同作用加强炎症反应[7]，它可能参与鼻息肉的基质纤维化、基底细胞增厚等[8]结构异常中。TNF-α则是一种前细胞因子，主要由单核巨噬细胞、Th1、Th17等细胞产生。研究表明，TNF-α大量且广泛地在鼻息肉上皮 、血管内皮、腺体以及部分炎性细胞中表达[9]。张敏等[10]的研究则认为鼻息肉的发生发展与TNF-α和IL-17刺激鼻息肉上皮细胞产生MIP-3α/CCL20增加有关。吴等[5]学者认为MIP-3α/CCL20能直接对鼻黏膜产生作用，持续改变局部微环境并影响捕获不成熟的树突状细胞，与此同时，MIP-3α/CCL20还能趋化嗜酸性粒细胞和中性粒细胞，令这些细胞捕获附近的上皮细胞，促进慢性炎症的发展，刺激新生血管的产生，最终造成鼻息肉发生。在本次研究中，健康志愿者、初发鼻息肉患者和复发鼻息肉患者血清的TNF-α和IL-17的水平依次增高，并且差异具有统计学意义，提示TNF-α和IL-17可能与鼻息肉的发生发展尤其是复发有着密切的关系。同时，各组血清TNF-α和IL-17之间具有正相关性，提示两个细胞因子之间可能存在相互的协同作用，并推动鼻息肉的发生和复发。Fokkens教授认为白种人的鼻息肉组织中效应T细胞主要是Th2，而中国人的则以Th1、Th17为占优[11]。本实验结果也间接支持了这一观点。尤其是对于鼻息肉的易复发性，可能和Th1、Th17的作用有极其密切的关系。综上所述，TNF-α和IL-17与鼻息肉的发生发展尤其是鼻息肉的易复发性密切相关，可能参与到鼻息肉的发病和复发中，并且可能存在协同作用。