黑木耳多糖对2型糖尿病大鼠血糖、体重及肾脏功能的影响①

曹雅菲，刘君星，刘玉荣，高 怡

(1.佳木斯大学临床医学院，黑龙江 佳木斯 154007；2.佳木斯大学基础医学院，黑龙江 佳木斯 154007)

糖尿病是由遗传因素、环境因素及社会因素等综合作用引发的代谢性疾病[1]。它是21世纪全球最大健康问题之一，世界卫生组织(World Health Organization，WHO)估计全球范围内，高血糖是继高血压和抽烟之后，过早死亡率最高的第三大危险因素[2]。我国糖尿病发病率逐年升高，是糖尿病患者的第一大国，2015年病患人数高达1.096亿，有130万人死于糖尿病及其并发症。同时据国际糖尿病联盟(International Diabetes Federation，IDF)预测，如果不加以干预，2040年全球糖尿病患者将达6.42亿[3]。其中2型糖尿病约占糖尿病患者的95%，糖尿病肾病是糖尿病病人最重要的合并症之一[4]。

黑木耳多糖(Auricularia auricular Polysaccharide)，为黑木耳中具有活性的主要成分。自古以来，就有用黑木耳治疗多种疾病的记录[5]。近年来，研究发现多糖类化合物具有抗氧化、抗肿瘤、降糖、调节免疫等生物活性[6]，因而多糖研究成为天然产物研究的一个热点课题。本实验就黑木耳多糖对2型糖尿病大鼠的血糖、体重及肾脏保护作用进行了探究。

1 材料和方法

1.1 实验动物

健康雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠28只，体重180～200g(60 ～ 70d龄)，由佳木斯大学实验动物中心提供及饲养。

1.2 主要试剂与仪器

普通饲料和高糖高脂饲料为清洁级颗粒鼠粮(沈阳市于洪区前民动物实验饲料厂)饲料质量合格(SCXK(辽)2015-0002)高糖高脂饲料配方：基础饲料59%，白糖20%，猪油18%，蛋黄3%[7]。

黑木耳多糖购自上海康舟真菌多糖有限公司，血糖仪购自德国罗氏诊断公司，链脲佐菌素购自美国Sigma公司。

1.3 实验方法

1.3.1 2型糖尿病模型的制备

28只大鼠，体重180～200g，适应性喂养1周后，随机抽取20只给予高脂高糖饲料喂养，正常组的8只给予普通饲料，保证食物和饮水充足。喂养4周后，禁食12h，不禁水。以35mg/kg剂量腹腔注射STZ，(STZ溶于柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液中，避光，现配现用，冰浴，于30min内用完)，正常组大鼠腹腔注射相同体积的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。7d后，尾静脉检测大鼠的空腹血糖，以空腹血糖值>16.7mmol/L为糖尿病成模标准。

在STZ注射1周后检测大鼠空腹血糖值，有16只大鼠血糖值达到2型糖尿病的成模标准，有2只死亡，2只血糖值低于16.7mmol/L。成模后的16只大鼠即可用于实验。

柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液的配置：柠檬酸2.1g加双蒸水100mL配成A液，柠檬酸钠2.94g加双蒸水100mL配成B液。用时A、B液按1:1.32比例混合，pH计调节pH=4.2～4.5[8]。

1.3.2 实验分组及处理

将STZ诱导成模后的16只鼠随机分为2组：黑木耳多糖治疗组和糖尿病模型组，每组8只鼠。黑木耳多糖治疗组，给予黑木耳多糖70mg/(kg·d)[9]灌胃，糖尿病模型组和正常组，给予等量的生理盐水灌胃，连续灌胃4周，每周测空腹血糖值(禁食不禁水)和体重变化。

1.3.3 测定指标

灌胃4周后，内眦静脉取血，分离血清。将血清送往佳木斯大学附属第一医院，检测血尿素氮(BUN)和尿素(UREA)。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 黑木耳多糖对2型糖尿病大鼠血糖的影响

造模前，由于高脂高糖饲料的诱导，治疗组与模型组的血糖均高于正常组，具有显著差异(P<0.01)，造模后，治疗组与模型组，血糖迅速升高，高于16.7mmol/L，说明造模成功。待模型血糖稳定后，给予黑木耳多糖治疗，治疗组血糖较模型组确实有所下降(P<0.01)，但仍然高于正常组血糖值(P<0.01)。血糖变化趋势见图1。

2.2 黑木耳多糖对2型糖尿病大鼠体重的影响

造模前，由于高脂高糖饲料的诱导，治疗组与模型组的生长速度均高于正常组，故治疗组和模型组的体重明显高于正常组，存在显著差异(P<0.01)。造模后，治疗组与模型组，体重呈下降趋势。给予黑木耳多糖治疗后，治疗组体重下降比模型组下降缓慢，体重高于模型组，存在显著差异(P<0.05)。对比正常组，模型组和治疗组体重明显下降存在显著差异(P<0.01)，证明造模成功。体重变化趋势见图2。

2.3 黑木耳多糖对2型糖尿病大鼠肾脏功能的影响

2.3.1 BUN的改变

黑木耳多糖治疗后，治疗组BUN含量低于模型组，但无明显差异(P>0.05)，正常组BUN含量低于模型组和治疗组，存在明显差异(P<0.05)。不同组BUN对比见图3。

2.3.2 UREA的改变

黑木耳多糖治疗后，治疗组UREA含量高于模型组，存在显著差异(P<0.01)，治疗组与正常组的UREA值相近，且不存在明显差异(P>0.05)。不同组UREA对比见图4。

3 讨论

2型糖尿病是糖代谢紊乱的一种全身性疾病。随着病程的发展，可以导致多组织、多器官的慢性进行性并发症。糖尿病肾病较为常见，其中BUN和UREA是反映肾脏功能的常见指标[10]。STZ是自由基激活剂，能够选择性的破坏胰岛细胞，引起糖紊乱，而且对肝、肾等脏器的损害还比较小[11,12]，故本实验采用此法造模。

黑木耳多糖对于降低2型糖尿病大鼠血糖和减缓体重降低的作用确实存在，本实验已经给予证实，但是血糖水平对于正常组来讲还是属于偏高，推测原因可能是由于药物作用的时间过短，所以我们可以适当增加药物作用时间，来观察药物疗效，就很可能会出现使用黑木耳多糖明显降低血糖的现象。

血尿素氮(BUN)，它是血浆中除蛋白质以外的一种含氮化合物，通过肾小球的滤过而排出体外。在肾功能不全失代偿时，BUN可以升高，潘永梅等[13]利用活血化瘀复方治疗患有糖尿病肾病的SD大鼠的实验中，通过观察BUN的变化情况来证明活血化瘀复方可以起到保护肾脏的作用。许啸虎等[14]也是根据BUN水平的变化来判断，交泰丸对糖尿病肾病具有改善作用。本实验中模型组BUN指标升高，使用药物之后出现了降低表现，说明药物具有改善2型糖尿病对肾脏的毒害作用，且该作用与活血化瘀复方和交泰丸的相同。

对于尿素(UREA)，主要由肾脏排出体外，所以血清中尿素水平可以适当地反映出肾脏功能。但是对于早期的肾脏功能受损，它可能不会导致血清中的含量升高[15]。本实验中模型组UREA的含量就没有升高。尿素是蛋白质的终末产物，在肝脏中生成，模型组含量低于其他两组，可能原因是糖尿病早期对肝脏的毒害作用先于肾脏，肝脏相对应产生的尿素减少，最终导致血清中尿素含量降低。而对于治疗组的UREA水平，与模型组相比有所升高，由此推测黑木耳多糖还可能会对2型糖尿病大鼠的肝脏的功能有一定的改善作用。

综上所述，黑木耳多糖可以降低2型糖尿病大鼠的血糖，减缓体重的下降，改善对肾脏的损害。