蛋氨酸铬对热应激条件下肉鸡免疫应答的影响

王 会

（枣庄市畜牧渔业技术推广中心，山东枣庄 277800）

高温应激是家禽业非常关注的问题，严重的热应激对饲料转化效率、生长性能具有不利影响。李玉保等（2005）研究证实，高温环境可影响鸡的特异性免疫反应。铬在三大营养物质（碳水化合物、脂肪和蛋白质）代谢方面起重要作用，因为它是葡萄糖耐受因子的成分，可以增强胰岛素功能。应激和疾病会增加尿中铬的排泄量，并可能加剧边际铬缺乏症，而补充铬在减少应激副作用、降低皮质醇水平和提高免疫力方面有效（徐熔泽，2017）。通常这些因素在提高生长性能中十分重要。目前针对家禽铬的适宜添加水平研究有限，同时大多数家禽饲料基本上是由植物源成分组成的，通常铬含量很低。蛋氨酸铬是一种新发现的有机铬源，其生物利用度和作用在肉鸡中报道较少。因此，本研究旨在探讨不同浓度的蛋氨酸铬对热应激肉鸡免疫反应的影响。

1 材料与方法

1.1 动物分组与日粮 将刚孵化的288 只体重接近的雄性肉鸡随机分为4 组，每组4 个重复，每个重复18 只。各组日粮分别以蛋氨酸铬（1000 mg 铬/kg）的形式在基础日粮（表1）中添加0、0.2、0.4 和0.8 mg/kg 铬。试验日粮为粉料形式，分为1 ～21 d 和22 ～42 d 两阶段进行。

表1 1 ～42 d 肉鸡日粮组成及营养水平

分别于出生后第4 天和第13 天口服传染性支气管炎活疫苗。所有雏鸡均于出生后第9 天肌内接种新城疫灭活疫苗。

1.2 样品采集与分析 在试验中期（21 d）和试验结束时（42 d），每个重复选择平均体重接近的2只肉鸡，通过翅下静脉采集血5 mL（使用EDTA作为抗凝血剂），样品以3500 g 离心15 min，分离血浆用于测定新城疫和传染性支气管炎病毒的抗体效价。利用血凝抑制试验评估新城疫病毒抗体滴度，并以2 为对数底数表示。用ELISA 法测定传染性支气管炎病毒抗体效价。

血液涂片使用May-Greenwald-Giemsa 染色，异嗜细胞与淋巴细胞的比例以总共100 个细胞 为 基 础（Gross 和Siegel，1983）。用ELISA 试剂盒测定血浆皮质醇浓度，OD 值设为450 nm，根据试剂盒公司建议的标准曲线计算皮质醇浓度（mg/mL）。在试验结束时（42 d），每个重复随机选择2 只肉鸡进行屠宰，收集脾脏和法氏囊，称重，以其与活体肉鸡体重比值来表示相对重量。

1.3 统计分析 数据分析采用SAS 软件完全随机设计的方差分析程序，采用Duncan’s 法进行多重比较，P ＜0.05 表示差异显著。

2 结果与分析

2.1 蛋氨酸铬对肉鸡抗体滴度的影响 由表2可 知，0.8 mg/kg 铬 组21 和42 d 肉 鸡 血 液 新 城疫抗体滴度较对照组分别显著提高43.98% 和46.10%（P ＜0.05），同时21 d 肉鸡传染性支气管炎抗体滴度显著提高35.76%（P ＜0.05），各组42 d 肉鸡传染性支气管炎抗体滴度无显著影响（P ＞0.05）。此外，对照组肉鸡在21 d 血浆皮质醇浓度较其他组分别提高15.90%、20.85% 和24.45%（P ＜0.05），同时对照组肉鸡在42 d 时，血浆皮质醇浓度较0.4 和0.8 mg/kg 铬组显著提高13.02% 和18.68%（P ＜0.05）。

2.2 蛋氨酸铬对肉鸡淋巴细胞数量的影响由 表3 可 知，0.4 和0.8 mg/kg 铬 组21 d 淋 巴 细胞数量较对照组显著提高8.87% 和12.37%（P＜0.05），但嗜异细胞与淋巴细胞比值显著降低22.73% 和25.76%（P ＜0.05）。 各 组 肉 鸡 在21 日龄时血液嗜异细胞数量无显著影响（P ＞0.05）。0.8 mg/kg 铬组42 d 嗜异细胞数量及嗜异细胞与淋巴细胞比值最低（P ＜0.05），但血液淋巴细胞数量最高（P ＜0.05）。

2.3 蛋氨酸铬对肉鸡淋巴器官相对重量的影响从表4 可知，各组肉鸡法氏囊和脾脏相对重量无显著差异（P ＞0.05）。

3 讨论

本研究发现，各处理组肉鸡在21 和42 d 时两种病毒抗体滴度（新城疫和传染性支气管炎）高于对照组。据报道，在高温应激下，以氯化铬或酵母铬的形式补充2 或10 mg/kg 的铬可以提高肉鸡对新城疫的抗体滴度（Guo 等，1999），同时Lee等（2003）也报道了以吡啶甲酸铬的形式补充0.4 mg/kg 铬可以提高肉鸡新城疫的抗体效价。本试验研究结果均与这些研究结果一致。但也有一些关于补充铬对血清皮质醇水平无显著影响的报道（Pollard 等，2002）。

表2 日粮添加不同水平蛋氨酸铬对肉鸡抗体滴度的影响

表3 日粮添加不同水平蛋氨酸铬对肉鸡嗜异细胞与淋巴细胞数量的影响

表4 日粮添加不同水平蛋氨酸铬对肉鸡淋巴器官相对重量的影响 %

各种应激源如寒冷应激、短暂暴露于高温、隔离和运输等会增加血浆皮质醇浓度，而吡啶甲酸铬中高浓度的铬可以直接抑制激动剂，刺激肾上腺皮质细胞系中的皮质醇分泌（Kim 等，2006）。热应激条件下雏鸡抗体产生量下降，这种减少可能是由于应激下炎症细胞因子的增加间接导致的，因为炎症细胞因子可以通过刺激下丘脑产生促肾上腺皮质激素释放因子，后者可增加垂体分泌促肾上腺皮质激素，后者可以刺激肾上腺产生皮质酮，而皮质酮可以抑制抗体的产生（Gross 和Sigel，1992）。

在本研究中，0.8 mg/kg 铬增加了淋巴细胞计数，降低了嗜异细胞与淋巴细胞比值，嗜异细胞与淋巴细胞比值是确定家禽应激的一个重要指标，因此，本研究结果说明了铬缓解了肉鸡的热应激。铬增强免疫系统的确切机制尚不清楚。但本研究发现，日粮添加铬降低了血浆皮质醇水平。皮质醇是最重要的糖皮质激素，具有免疫抑制作用，抑制抗体、淋巴细胞功能和白细胞群的产生和作用。日粮补充蛋氨酸铬对肉鸡淋巴器官相对重量无显著影响。Toghyani 等（2007）报道，在热应激条件下，肉鸡日粮中以吡啶甲酸铬的形式补充铬后，淋巴器官相对重量无显著影响，但未补充铬的试验组淋巴器官重量有所下降，其推测可能是由于热应激条件下采食量的减少，降低了营养物质的供应。

4 结论

总的来说，肉鸡日粮以蛋氨酸铬的形式补充0.8 mg/kg 铬可以改善热应激条件下肉鸡的免疫反应，但后续研究需进一步评估蛋氨酸铬对不同饲养条件下肉鸡生长性能和免疫反应的影响。