不同采血方法、样本保存方式和时间对健康体检者生化指标的影响

杨艳茹， 赵雅霞， 王 珂， 刘 钱， 刘 璐

(陆军军医大学第一附属医院检验科，重庆 400038)

现代医学中，临床工作和检验工作关系日趋密切，二者相辅相成，互相促进。临床实验室每天提供的实验检测信息关系到对患者正确诊断、疗效观察、病情转归、人体健康状况评估等[1]。据统计，临床实验室提供的检测信息占临床诊断、临床治疗等辅助信息的50%以上[2]。近年来，随着全自动生化分析仪等在临床广泛应用，血液生化检测的准确度和灵敏度均得到极大提高[3]。生化检测一般要求样本能在最短时间内送达实验室，并在室温放置半小时后进行离心，总放置时间不宜超过3 h[4]。但在临床现实操作中，采血时间多集中在早上6～7点，因住院患者较多，且科室一般需集中送血，加上送检、排队等时间，样本检测时间比较长[5]。由于条件限制有些实验室会将样本先行保存后再进行检验。因此，为了进一步考察血液样本不同采集、保存方式等对生化检验结果的影响，本研究对60例健康体检者采血后，对不同采集血样以及同一血样不同保存方式、不同保存时间的检测结果，进行比较分析，评价其对检验结果的影响，报道如下。

1 对象与方法

1.1 对象 选取2017年8月—2018年8月某陆军医院体检中心健康体检者60例为研究对象，纳入标准：①经医院体检中心检查诊断为健康体检者。②均取得入组人员的知情同意。排除标准：①抽血失败者。②抽血量不足者。③抽血前一周服用或使用过影响生化检查的药物。将60例入选者随机分为观察组与对照组，各30例，观察组男16例，女14例，年龄29～65(42.3±3.9)岁；对照组男17例，女13例，年龄28～64 (41.9±3.8) 岁。2组入选者性别(2=0.07,P=0.795)、年龄(t=0.40,P=0.689)比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法 所有入选者于抽血前一晚7点后禁食，次日早上7点根据分组方式进行抽血，每人抽取32 mL，分装于提前标记好的采血管中，每管2 mL，再按照保存时间和方式不同进行保存。观察组采取普通静脉负压采血，对照组采取针管采血，再根据保存方式和保存时间的不同，将观察组采血分别在4 ℃和25 ℃条件下保存1、3、6、24 h；在4 ℃密封(密封管)和4 ℃非密封(非密封管)条件下保存24 h。密封组与非密封组分别采用密封管与非密封管保存。利用全自动生化分析仪(德国西门子股份有限公司，ADVIA2400型)测定生化指标，采用比色法进行检测，包括肝功能：总蛋白(TP)最低检出限0.046 mg·mL-1;白蛋白(Alb)最低检出限0.50 g·L-1;直接胆红素(DBL)最低检出限0.09 mmol·L-1;总胆红素(TBL)最低检出限0.046 mg·mL-1;谷草转氨酶/谷丙转氨酶(AST/ALT)最低检出限1.1 IU·L-1。血脂：总胆固醇(TCH)最低检出限0.046 mg·mL-1；三酰甘油(TG)最低检出限0.14 mmol·L-1；低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)最低检出限0.04～12.00 mmol·L-1。血糖(GLU)最低检出限0.04～30.00 mmol·L-1。肾功能：尿素/肌酐(Urea/Cr)最低检出限38.2 μmol·L-1。电解质：钠(Na)最低检出限11.3 mmol·L-1；钾(K)最低检出限0.80 mmol·L-1；氯(Cl)最低检出限9.4 mmol·L-1。试剂盒均购自武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司，严格按试剂盒要求操作。

2 结果

2.1 不同采血方式生化指标检测结果比较 比较两种不同采血方式后的检测结果，与对照组比较，采血后1 h观察组的TP、GLU、Na、K、Cl等指标水平下降；DBL、TBL水平升高，差异均有统计学意义(P<0.05)；其余检测指标2组间比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 不同采血方式生化指标检测结果比较

2.2 不同保存方式生化指标检测结果比较 与密封组比较，非密封组采血后1 h进行检测，TG和Cl均降低，差异有统计学意义(P<0.05)；其他指标2组间比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 不同保存方式生化指标检测结果比较

2.3 不同温度、不同保存时间的生化指标检测结果比较 在4 ℃的保存温度下，与血液样本保存1 h的检测结果较保存为6 h的样本，TP水平升高，TBL水平下降，差异均有统计学意义(P<0.05)；保存时间为24 h的样本，GLU、AST/ALT、Urea/Cr水平较保存1 h的样本下降，差异均有统计学意义(P<0.05)。在25 ℃的保存温度下，与血液样本保存1 h的检测结果比较，保存时间为3 h的样本，TP水平升高，TBL水平下降，差异有统计学意义(P<0.05)；保存为6 h的样本，TP水平升高，TBL、GLU、Urea/Cr水平下降；保存24 h的样本，GLU、AST/ALT、Urea/Cr、DBL、TG、LDL水平均较保存1 h的样本下降，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表3-4。

3 讨论

肝脏是人体内最大的实质器官，也是最大的腺体,在机体生命活动中占有十分重要的地位，在机体的代谢、胆汁生成、解毒、凝血、免疫、热量产生及水与电解质的调节中均起着非常重要的作用[6]。TP、Alb、DBL、TBL、AST/ALT是反映肝脏功能的重要指标[7]。本研究结果显示，TP、DBL、TBL水平受采血方式影响较为明显，这可能与针管采血后将血样注

表3 在4 ℃下不同保存时间生化指标检测结果比较

表4 在25 ℃下不同保存时间生化指标检测结果比较

入生化管时血细胞被部分破坏,细胞内蛋白质和胆红素外漏浓度增加有关。本研究结果还显示，肝功能指标中TP、DBL、TBL、AST/ALT与保存温度和时间关系密切。可能由于血样保存时间和温度对酶的影响较大，因此样本保存时间越长，温度越低，AST/ALT测定结果越不准确[8-9]；有研究[10]表明，TP、DBL、TBL血液样本不宜在4 ℃保存超过12 h，否则检测结果会发生显著变化。

人体的血糖浓度保持相对恒定。人体的血糖主要有两个来源，一是来自小肠内碳水化合物的消化吸收，二是来自肝糖原[11]。肝脏在糖的分解、合成代谢和糖类的相互转化上均起着十分重要的作用，当肝细胞损害时，由于肝内糖代谢酶系的变化可导致血糖异常[12]。临床上血糖测定的目的是了解体内的神经激素是否平衡。因此，保证血糖检测结果的准确性对疾病的诊断、治疗具有重要意义[13]。本研究结果显示，血样在放置过程中，GLU水平一直呈下降趋势，其中样本分别在4 ℃和25 ℃存放6 h和24 h时，GLU水平均低于存放1 h。GLU浓度随时间逐渐降低，是因为血液离体后，红细胞供能、葡萄糖降解等过程仍在继续。孔丽蕊等[14]研究表明，离心分离血浆和离心后不分离血浆在4 ℃和22 ℃时促肾上腺皮质激素(ACTH)可稳定12 h，全血在4 ℃和22 ℃时ACTH稳定性不超过2 h，与本研究结果相近。因此，采血后最好在1 h之内对样本进行血糖检测。

电解质是维持细胞外液渗透压、调节酸碱平衡、维持神经肌肉应激性等机体生理供能的重要物质，主要包括Na、K、Cl等微量元素[15]。机体电解质平衡对维持正常生理功能具有重要作用，浓度过低或者过高都会导致机体产生病变[16]。影响血K浓度的因素较多，包括血液酸碱紊乱造成细胞内外的H+-K+交换受抑制、细胞外液稀释或浓缩、手术患者输注葡萄糖使K+伴随葡萄糖进入细胞内等[17]。研究[18]发现，溶血对血清K+也会产生一定的影响，由于细胞内K+浓度与血清K+浓度相差40倍，因此溶血时会导致血清K+的含量明显增高，故血液标本采集时一定要避免溶血。本研究结果也表明，与观察组比较，对照组血K水平明显升高，这可能与对照组采用针管采血导致红细胞破坏，致使K+外流所致。

综上所述，采血方式、保存方法和保存时间对血液生化指标均有一定影响。因此，在采血、血样保存以及实验室操作时必须正确及时处理样本，保证样本检测结果的准确性。在长时间大样本检测时，仪器的精密度会发生变化，因此，要定期按说明书要求对仪器进行维护和校准，保证仪器的准确性和结果的可靠性。本研究不足之处，首先未考虑将对象的某些特征、条件相同或相近原则配对，再将每对中的两个研究对象随机分到观察组和对照组，给予不同处理，缺乏一定的严谨性，后期将进一步加大样本量进行验证；其次本研究得出的结果可能受到抽血方法差异影响，但主要是混杂年龄、性别等因素所致。