香菇多糖对力竭运动大鼠外周血炎症反应的抑制作用*

卢 川，李 娟

（1.广西警察学院警察体育教研部，广西 南宁 530000；2.广西民族大学体育与健康科学学院，广西 南宁 530006）

反复力竭运动导致机体产生炎症，具体表现为炎性介质、促炎因子分泌增多。已有研究证实，炎症是导致疾病发生、发展的重要因素，如常见的高血压、高血糖、高血脂等慢性病都与自身的炎症反应密切相关[1]，目前认为，肿瘤的发生也是自身炎症累积导致[2]。因此，控制、减少炎症的发生、发展，具有重要意义。

多糖是香菇 (Lentinus edodes）中富含的活性成分，目前提取香菇多糖的方法已经十分成熟。体外药理试验中，香菇多糖具有抗氧化、提升免疫力等功效[3]，大鼠体内试验也表明香菇多糖有改善肠道功能的作用[4]。肠道是机体最大的细菌聚集地，研究表明通过改善肠道功能，可有效改善机体的炎症状态[5]。

本试验通过建立大鼠反复力竭运动模型，探讨香菇多糖对大鼠体重、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、白介-1β（IL-1β）、白介-6（IL-6）、白介-10（IL-10）的影响，旨在为香菇多糖在运动领域的应用提供相关科学依据。

1 试验对象与方法

1.1 试验动物及分组

成年雄性SD大鼠53只，8周龄，平均体质量（209±14）g，购于桂林医学院实验动物中心。试验前对大鼠进行为期3 d的适应性游泳练习，淘汰3只懒惰大鼠，剩余大鼠随机分为5组（每组10只），分别为安静组、运动组、低剂量运动给药组、中剂量运动给药组、高剂量运动给药组。大鼠体质量、力竭游泳的比较结果见表1。

表1 大鼠体质量、力竭游泳的比较（±s）Tab.1 Comparison of body weight and exhaustive swimming of rats（±s）

表1 大鼠体质量、力竭游泳的比较（±s）Tab.1 Comparison of body weight and exhaustive swimming of rats（±s）

组别 数量/只体重/g力竭游泳时间/min安静组 10208.42±14.28 55.85±6.73运动组 10209.11±13.32 56.01±5.29低剂量运动给药组 10中剂量运动给药组 10 208.12±13.31 56.88±5.31高剂量运动给药组 10 208.77±14.98 55.23±6.21 209.09±14.21 57.01±5.21

由表1可知，试验前对大鼠体重、力竭游泳时间进行测定，记录显示5组大鼠体重、力竭游泳（力竭标准：大鼠头没入水内约8 s，捞出吹干后，放桌面无法进行翻正反射）时间均无显著性差异，符合试验要求。

1.2 香菇多糖的制备

选用广西金秀大瑶山野生香菇，厚菇。香菇买回后晒干、粉碎、称重，采用石油醚脱脂，脱脂后按料液比1:20的比例加入90℃热水浸提2次，收集的滤液添加无水乙醇静置12 h后过滤收集沉淀，80%乙醇洗涤沉淀多次，干燥后得香菇多糖粗品[6]。多糖粗品呈白色粉粒状，测定多糖含量87%。

1.3 试剂与仪器

1.3.1 试剂

iNOS测定试剂盒、IL1β检测试剂盒、IL-6检测试剂盒、IL-10检测试剂盒，购自南京建成生物工程研究所。

1.3.2 仪器

小动物游泳缸（100 cm×60 cm×80 cm），水流为 100 L·h-1，水温为（30±1）℃，水深为 60 cm，自制；NVA S6801全自动生化分析仪，山东诺安诺泰信息系统有限公司；DL-1005型冷却液循环泵，西化仪有限公司；BCD-203A荣升冰箱，荣升冰箱有限公司；TGL-16G台式高带冷冻离心机，北京沃德生物医学仪器公司。

1.4 动物训练方案与给药方案

1.4.1 动物训练方案

安静组不运动，正常饮食、进水；运动组、低剂量运动给药组、中剂量运动给药组、高剂量运动给药组，进行隔天1次的力竭游泳训练，一共训练20 d。

1.4.2 给药方案

低剂量运动给药组、中剂量运动给药组、高剂量运动给药组每天上午9:00～10:00灌服香菇多糖溶液，每日剂量分别为 15 mg·kg-1、30 mg·kg-1、45 mg·kg-1，使用前采用生理盐水按 6 mg·mL-1配置香菇多糖溶液。安静组、运动组同时间灌服同体积生理盐水。

1.5 指标的测定与方法

1.5.1 大鼠取材与匀浆

运动组、低剂量运动给药组、中剂量运动给药组、高剂量运动给药组最后1次训练后，称重，摘眼球取血约2.0 mL，肝素抗凝，静止25 min，以4℃、3 500 r·min-1离心15 min，收集上清液，冰箱调制4℃保存。安静组大鼠以同样方式处理。

1.5.2 指标的测定

采用双抗体夹心ELISA法检测血清iNOS、IL-1β、IL-6、IL-10的浓度，测试过程按试剂盒说明书进行[7]。

1.6 数据处理

2 试验结果

2.1 大鼠体质量、力竭游泳时间、iNOS的比较结果

大鼠体质量、力竭游泳时间、iNOS的测定结果见表2。

表2 大鼠体质量、力竭游泳时间、iNOS的测定结果（±s,n=10）Tab.2 Determination results of body weight,exhaustive swimming time and iNOS of rats（±s,n=10）

表2 大鼠体质量、力竭游泳时间、iNOS的测定结果（±s,n=10）Tab.2 Determination results of body weight,exhaustive swimming time and iNOS of rats（±s,n=10）

注：*表示与安静组相比，P＜0.05差异显著；**表示与运动组相比，P＜0.01差异显著。Note:*means compared with the quiet group,there is a significant difference at the level of P＜0.05,**means compared with the exercise group,there is a significant difference at the level of P＜0.01.

组别 体重/g力竭游泳时间/min iNOS/（U·mL-1）安静组 270.37±17.33- 0.73±0.01运动组 234.22±12.11*62.01±6.43 0.31±0.04*低剂量运动给药组 257.27±13.27**中剂量运动给药组 261.23±13.14**73.21±7.21**0.51±0.04**高剂量运动给药组 259.23±13.22**71.23±7.21**0.50±0.02**71.16±7.22**0.49±0.03**

如表2所示，与安静组相比，运动组、低剂量组、中剂量组、高剂量组体重、iNOS均低降低，差异显著（P＜0.05）；与运动组相比，低剂量组、中剂量组、高剂量组体重、力竭游泳时间、iNOS均升高，差异显著（P＜0.05）；与低剂量运动给药组相比，中剂量运动给药组、高剂量运动给药组体质量、iNOS、力竭游泳时间均无显著性差异；与中等剂量为最佳相比，高剂量运动给药组体质量、iNOS、力竭游泳时间均无显著性差异。

2.2 大鼠IL-1β、IL-6、IL-10比较结果

不同剂量组大鼠IL-1β、IL-6、IL-10测定比较结果见表3。

由表3可知，与安静组相比，运动组、低剂量运动给药组、中剂量运动给药组、高剂量运动给药组IL-1β、IL-6含量升高，IL-10含量降低，差异显著（P＜0.05）；与运动组相比，低剂量运动给药组、中剂量运动给药组、高剂量运动给药组IL-1β、IL-6均降低，IL-10升高，差异显著（P＜0.05）；与低剂量运动给药组相比，中剂量运动给药组、高剂量运动药组IL-1β、IL-6、IL-10均无显著性差异；与中剂量运动给药组相比，高剂量运动药组IL-1β、IL-6、IL-10均无显著性差异。

表3 大鼠IL-1β、IL-6、IL-10比较结果（±s,n=10）Tab.3 Comparison results of IL-1 β,IL-6 and IL-10 in rats（±s,n=10）

表3 大鼠IL-1β、IL-6、IL-10比较结果（±s,n=10）Tab.3 Comparison results of IL-1 β,IL-6 and IL-10 in rats（±s,n=10）

注：*表示与安静组相比，P＜0.05差异显著；**表示与运动组相比，P＜0.01差异显著。Note:*means compared with the quiet group,there is a significant difference at the level of P＜0.05,**means compared with the exercise group,there is a significant difference at the level of P＜0.01.

IL-1β安静组 20.63±4.22 53.88±5.62 25.44±3.22组别含量/（ng·mL-1）IL-6 IL-10运动组 70.37±7.21*87.11±8.89* 8.21±2.01*低剂量运动给药组 43.21±5.64**71.22±7.72**22.46±3.21**中剂量运动给药组 42.20±5.60**69.34±6.71**19.46±2.25**高剂量运动给药组 44.22±5.13**68.27±6.23**20.46±2.11**

3 讨论

体质量是代表生长发育的重要指标，力竭游泳时间是代表运动能力的重要指标[8]。本试验中，大鼠经20 d隔天1次的力竭训练后，运动组大鼠体质量显著降低，力竭游泳时间较运动给药组少，说明香菇多糖能抑制力竭游动，提示香菇多糖能促进机体生长发育，提升运动能力。

iNOS是较典型的炎性介质，安静状态下细胞内不表达，在过度训练或者病理状态下可以过度表达，在催生一氧化氮（NO）的同时伴随大量毒性物质产生，引发机体的炎症反应[9]。本试验中，力竭运动引起机体外周血iNOS过量表达，而香菇多糖能减少i－NOS的产生，说明香菇多糖对力竭运动诱导的炎性介质的产生具有抑制作用。

炎性细胞因子在炎症反应中具有主导作用，在正常生理情况下，体内抗炎因子与促炎因子呈动态平衡状态[10]。病理或者大强度运动下平衡被打破，体内促炎因子分泌增多，引发炎症状态。L-1β、IL-6属于促炎因子，IL-10是典型的抗炎因子[10]。本试验中，力竭运动诱导L-1β、IL-6分泌增多，IL-10分泌减少，而香菇多糖能抑制上述现象，表明香菇多糖通过抑制促炎因子分泌、提升抗炎因子分泌，抑制机体炎症反应。

4 结论

香菇多糖能抑制力竭运动诱导的机体体重减轻、力竭游泳时间缩短，外周血iNOS、L-1β、IL-6浓度升高、IL-10浓度降低。说明香菇多糖通过抑制炎症介质，抑制促炎因子分泌，提升抗炎因子分泌，促进机体的生长发育，提升运动能力。