SERPINH1在结肠腺癌中的表达及临床意义

宋佳星,王 曌

(吉林大学第一医院 检验科，吉林 长春130021)

结直肠癌(CRC)是全世界较为常见的癌症和癌症死亡原因。在诊断时，男性和女性患者患结肠癌的中位年龄分别为68岁和72岁，而直肠癌患者的中位年龄均为63岁[1]。流行病学调查结果显示，2008年至2016年期间，CRC发病率每年增加6%[2,3]。确诊后五年的总生存率(OS)约为60%[1,4]。尽管在疾病的治疗上我们取得了一些进展，但转移性CRC表现出不良的预后，并且在现有技术水平下，仅有14%的患者在诊断后5年内存活[1,4]。因此，发现一个可以辅助判断结直肠癌转移及预后的指标对于改善患者的生存率具有一定的现实意义。本研究通过TCGA数据库检索，获取差异表达基因SERPINH1，通过免疫印迹验证其差异表达水平，同时分析其表达水平与结肠腺癌肿瘤转移与预后之间的关系。

1 材料与方法

1.1 研究对象将手术中切取的新鲜肿瘤组织、正常组织收集于无菌容器内，PBS冲洗处理，液氮速冻。

1.2 方法通过TCGA数据库检索，获取差异表达基因SERPINH1，免疫印迹方法验证其差异表达情况，免疫组化观察其表达水平与结肠腺癌肿瘤转移与预后之间的关系。

1.3 主要试剂中性树胶，蛋白定量试剂盒，无水乙醇，蛋白抽提试剂盒，DAB 试剂盒，二甲苯。

2 结 果

2.1 TCGA数据库检索差异表达基因SERPINH1

通过在线数据库UALCAN，检索TCGA数据库中结肠腺癌基因表达谱，搜索SERPINH1基因在结肠腺癌以及癌旁组织中的转录水平存在差异。如图1所示。

图1 TCGA数据库检索差异表达基因SERPINH1

2.2 SERPINH1在结肠腺癌组织与癌旁组织表达水平的比较

通过免疫印迹法，观察结肠腺癌以及癌旁组织中SERPINH1 的表达水平，SERPINH1在结肠腺癌的肿瘤组织的表达水平显著高于配对的癌旁组织，见图2。

A:结肠腺癌组织；B：结肠腺癌癌旁组织

2.3 SERPINH1在结肠腺癌组织与癌旁组织的表达意义

通过免疫组化法，我们观察到SERPINH1的表达，如图3。分析本研究收集的50例组织样本，发现SERPINH1的高表达与肿瘤的转移相关(P<0.05),见表1。

3 讨论

结肠直肠癌作为全世界较为常见癌症同时也是导致癌症死亡的比较常见的原因[5]，手术切除是CRC的唯一治疗方法，特别是对于局限性肿瘤的患者。治愈性手术切除通常涉及所有可能受影响的淋巴结(LN)的初步、标准化和系统性解剖，以确定肠切除的程度。最近的一项meta分析揭示了原发性CRC的组织病理学特征，可以预测LN转移，并分类如下(按重要性降序排列)：淋巴侵袭，肿瘤深度，肿瘤分化差和肿瘤出芽[6]。然而，这是通过对手术后切除的肿瘤标本的苏木精和伊红染色来确定的。因此，开发用于准确检测术前LN转移情况的检测方法对于判断使用例如微创手术或新辅助化疗等方式是重要的。

图3 SERPINH1在结肠腺癌及癌旁正常组织中的阴性表达(×200)

表1 SERPINH1在结肠腺癌表达水平与肿瘤转移的关系

HSP47是染色体11q13.5上的由SERPINH1编码的产物，同时也是细胞外基质(ECM)的组分，在人类常见的癌症中上调表达[7]。在应激条件下，HSP47在细胞表面上的表达表明HSP47在肿瘤发生和随后的肿瘤进展时期可以调节细胞迁移，表现为肿瘤向周围组织的侵袭和转移。临床上，与正常组织相比，HSP47在肺癌，胶质瘤，食管鳞状细胞癌和溃疡性结肠炎相关肿瘤中的表达增加[7-12]，并且一些研究报道了HSP47的表达在恶性疾病中与预后相关[10,13,14]。

在本研究中，我们使用生物信息学方法观察SERPINH1基因在结肠腺癌中的差异表达；然后，我们使用免疫印记方法，验证其产物HSP47在结肠腺癌肿瘤组织中的表达。为了进一步确定HSP47的差异表达，我们接下来使用免疫组织化学方法来确定它们在CRC组织和邻近的正常结肠黏膜中的表达水平。研究显示，结肠腺癌组织中HSP47的高表达与肿瘤的转移相关。