广东省东莞市大朗镇大朗医院(523770)陈彩玲 黎丽冰 陈巧玲 叶淑华
梅毒是一种比较常见的性传播疾病,具有较强的传染性。该病的主要病原体是梅毒螺旋体,能够通过多种途径传播,对人们的健康和安全造成了较大的影响[1]。人是梅毒螺旋体的唯一传染源,主要包括先天性、获得性两种。在临床上,常用的梅毒血清检测方法主要包括梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)、酶联免疫吸附法(ELISA)、快速血浆反应素环状卡片试验(TRUST)等方法,均可发挥一定的作用[2]。但是不同方法之间的检测结果,也存在一定的差异。基于此,本文选取医院收治的100例产前梅毒常规筛查的孕妇,研究了不同梅毒血清检测方法在产前梅毒常规筛查中的应用价值。
1.1 一般资料 选取2019年1月~2019年12月医院收治的100例产前梅毒常规筛查的孕妇,年龄为22~35岁,平均年龄为(28.2±3.6)岁,孕周为13~30周,平均孕周为(21.4±2.8)周,其中84例初产妇,16例经产妇。所有患者对本研究均知情同意,医学伦理委员会批准。
1.2 方法 所有孕妇分别采用TPPA法、ELISA法、TRUST法进行梅毒血清检测。孕妇空腹采集静脉血各5ml,以4000r/min的速度离心血清,静置后取上清液备用。TPPA法:取100ul血清稀释液加入第8孔,25ul血清稀释液分别加入第1、2、3、4、5、6孔。取25ul待检血清,加入第8孔,混合均匀后取25ul加入第1孔。重复操作步骤至第6孔,均匀混合后弃去25ul液体。细胞工作液均匀混合,取25ul未致敏颗粒加入第2孔,取25ul致敏颗粒加入第3、4、5、6孔。在微量振荡器上振荡30s,在湿盒内放置,在15℃~25℃下孵育2h。结果判定标准:颗粒凝集覆盖整个孔底,呈多边形膜状,边缘粗糙,结果为阳性(++)至阳性(++++);颗粒凝集,呈多边形性粗糙大环状,结果为阳性(+);颗粒浓集,呈边缘光滑小环状,结果为可疑(±);颗粒在孔底中央聚集,光亮,边缘光滑,结果为阴性(-)。
ELISA法:血液凝集半小时以上,取血清检测。用稀释液将酶复合物稀释,加入血清、阴性对照、阳性对照、质控品。孵育1h,洗板,加入底物,在避光环境下反应半小时,加入终止液完成分反应。根据数值结果判定阴性或阳性。
TRUST法:卡片定性试验,取50ul待检血清,加入卡片圆圈内,均匀涂抹。用专用滴管,加入摇匀抗原1滴,旋转卡片8min,观察结果。结果判定标准:卡片圆圈中有黑色凝聚颗粒及絮片出现,为阳性;未出现凝聚快,仅有均匀亮灰色,为阴性。卡片定量试验,使用等量生理盐水,在小试管中做6个稀释度,分别为1∶1、1∶2、1∶8、1∶16、1∶32,分别取50ul血清,加入每个稀释度的玻片圆圈中,用定性法进行测定。
1.3 评价指标 比较不同方法的检测结果,分析应用价值。比较三种方法单独检测和联合检测的阳性率结果,以及敏感度、特异度、准确度。
1.4 统计学处理 使用SPSS20.0软件处理数据,计量资料和计数资料分别用均数±标准差和数或率的形式代表,用t和卡方检验,P<0.05,有统计学意义。
所选100例孕妇中,常规筛查得出阳性12例,阴性88例。三种方法检测阳性率,TPPA法阳性率75.00%、ELISA法阳性率66.67%、TRUST法阳性率58.33%,三种方法间相互比较,均无显著差异(P>0.05)。三种方法联合检测阳性率为91.67%,高于每种方法单独检测,均有显著差异(P<0.05)。见附表。
附表 三种方法单独检测和联合检测阳性率比较[n(%)]
联合检测的敏感度91.67%、特异度98.88%、准确度99.00%,均高于3种方法单独检测的TPPA(75.00%、96.70%、97.00%)、ELISA(66.67%、95.65%、96.00%)、TRUST(58.33%、94.62%、95.00%),均有显著差异(P<0.05)。
梅毒是一种比较常见的性传播疾病,具有很长的历史。该病会对患者的皮肤、黏膜、其他组织等造成侵犯,一般会有较长的病程,对患者身体健康和生存质量造成较大的危害[3]。患者发病后,主要的临床表现是生殖器官溃烂。有很多潜伏性梅毒的情况,平时可能并没有明显的症状表现,但是依然有较高的风险[4]。如果孕妇携带梅毒螺旋体病毒,可能会通过胎盘传染给胎儿,发生先天性梅毒,引起不良的妊娠结局,甚至造成胎儿直接死亡。因此,医院对于梅毒的诊疗和预防工作,应当给予更高的重视,在产前检查中,要进行产前梅毒常规筛查,及时发现和干预,改善妊娠结局,保证母婴健康。当前临床上的梅毒血清检测方法有很多种,常见的方法主要包括梅毒螺旋体抗体检测、梅毒螺旋体DNA检测,非特异性梅毒螺旋体抗体检测等。在妊娠梅毒的检查与诊断中,梅毒血清学检测将提供重要的依据[5]。因此,应积极采取有效的检测方法,提高检测结果的可靠性和敏感性,确保能够准确筛查出妊娠梅毒的存在,进而减少梅毒的发病,为母婴健康安全提供更大的保障。
TPPA法、ELISA法、TRUST法都是当前比较常用的梅毒血清检测方法。其中TPPA法利用梅毒螺旋体天然抗体作为诊断抗原,具有较高的特异性,但是也存在一定的局限,如诊断结果难以自动化、检测时间较长、检测费用较高等。ELISA法能够利用基因重组梅毒螺旋体特异性抗原包被酶标板孔,采取双抗原夹心法,对梅毒螺旋体抗体进行检测,检测中可以使用全自动酶标仪检测系统,在大批量检测中具有明显的优势。TRUST法能够通过对患者血清的检查,观察其中是否存在非特异性类脂质抗体的存在,这种方法比较快捷简单,检测费用较低,但是灵敏度并不理想,对于弱阳性的标本,可能会受到肉眼主观判断的影响,并且也有一定的假阳性结果容易出现。因此,三种检测方法各自具有优缺点,对于临床上怀疑可能是梅毒的孕妇,可以将三种方法联合应用,能够大大提高检测结果的阳性率,同时敏感度、特异度、准确度等都能够得到较大的提升。很多妊娠期梅毒都属于潜伏期梅毒的范畴,此类患者一般并没有明显的临床症状表现,因此容易漏诊误诊。所以,需要重视产前梅毒常规筛查,采取有效的梅毒血清检测方法,尽早发现和干预梅毒,减少通过胎盘向胎儿传染的情况发生,改善胎儿的妊娠结局,为母婴健康和安全提供更有力的保障。
综上所述,在产前梅毒常规筛查中,TPPA、ELISA、TRUST等方法均可取得较为理想的结果,其中联合检测比单独检测效果更好,具有较高的应用价值。