猪传染性胃肠炎疫苗抗体免疫效果评价

汤永蓉 陈 彬

（宝应县畜牧兽医站，江苏扬州 225800）

0 引言

猪传染性胃肠炎是由猪传染性胃肠炎病毒引起的一种急性、高度接触性肠道传染病，临床上以发热、严重呕吐、剧烈腹泻和高度脱水为特征，各个年龄的猪都可感。冬春寒冷季节易多发，因其潜伏期很短，一般12～18h，有的为1～8d，多数病例2～4d，发病较为突然，传播迅速，数日内可蔓延至全群，是严重危害猪群的原发性疾病之一，严重制约了规模化养猪场的经济效益。目前，对该病还没有特效的治疗药物，疫苗免疫是预防该病的最安全、最有效的手段，也能使猪群获得很好的抗体免疫效果，并且无副作用。

为了验证猪传染性胃肠炎疫苗对生猪的安全性和免疫效果，此次选择了本地4家规模猪场，开展猪传染性胃肠炎疫苗抗体试验。试验结果证明，猪传染性胃肠炎疫苗的免疫效果较好，随后在基层范围内进行推广应用，均取得了好评。

1 试验原理

试剂盒系由预包被猪传染性胃肠炎病毒重组N蛋白的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成，应用酶联免疫法（ELISA）原理检测猪血清、血浆样本中猪传染性胃肠炎病毒抗体。实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本，经温育后若样品中含有猪传染性胃肠炎病毒抗体，则将与酶标板上抗原结合，经洗涤除去未结合的其他成分后；再加入酶标记物，与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶标记物，在孔中加TMB底物液，与酶反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关；加入终止液终止反应后，产物变为黄色；用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有猪传染性胃肠炎病毒抗体。

2 试验材料与方法

2.1 材料

2.1.1 试验动物 用于试验观察疫苗免疫安全性和免疫效果测定的4个猪群分别由宝应县欣宇禽畜产销专业合作社、扬州市瀛宝农牧科技发展有限公司、宝应县华盛生态生猪养殖场、宝应县正旺畜禽养殖场4个示范基地提供的母猪群50头、100头、50头、80头。所选择的猪群均为猪传染性胃肠炎疫苗非免疫猪群，健康、生长良好，被检血清样品共314份。

2.1.2 检测试剂 猪病毒性胃肠炎抗体Elisa试剂盒（规格480T/盒，西班牙Ingenasa，由南京华恩生物科技科技有限公司提供）。

2.1.3 主要仪器设备 酶标分析仪、离心机、采血器、可调微量移液器、一次性吸头、去离子水、恒温箱。

2.1.4 试验用疫苗 猪传染性胃肠炎疫苗（上海海利生物技术股份有限公司生产），批准文号：兽药生字（2016）090201097。

2.2 试验方法

2.2.1 疫苗接种 将试验疫苗用生理盐水稀释为含1头份/ml，后海穴注射1ml。

2.2.2 采血 第1、2、3、4猪群疫苗免疫前及免疫后7、14、30d各采血1次。猪前腔静脉采血，3～4ml/头，分离血清，冷藏或冷冻备用。

2.2.3 抗体效价测定 按照“猪传染性胃肠炎诊断技术标准”（NYT548-2002）试验操作进行，使用酶标分析仪，当样品A450值大于临界值，判为阳性；当样品A450值小于临界值，判为阴性。

3 试验结果

3.1 安全性试验结果

经注射疫苗后，对试验猪群进行连续观察2周（精神状态、采食量、粪便、尿液以及猪群的发病死亡率），按照说明注射剂量注射的4个试验猪群均无异常情况发生，表明疫苗对猪群免疫是安全的，而且疫苗引起的副反应较小。

3.2 免疫效果测定结果

免疫前及免疫后抗体阳性率统计表

通过免疫、监测、消毒等防控措施的落实，根据试验数据进行统计分析，制作了抗体阳性率统计表。由上表可见，免疫后抗体上升的较快，7d抗体平均合格率达80%以上，监测到免疫后30d，抗体平均合格率达到90%以上。

4 小结与讨论

（1）试验结果表明，在免疫7d后抗体上升的较快，维持的时间也长，同时取得了很好的免疫效果，起到了有效的保护作用。

（2）猪场不能完全依赖疫苗，更加不能抱有侥幸心理不免疫，应该结合实际情况，建立符合自身完善的免疫监测制度，制定科学的免疫程序，合理的饲养管理模式。猪传染性胃肠炎的免疫效果及发病情况与饲养管理的好坏密切相关，只有在良好的环境控制下，才能真正发挥疫苗的免疫保护作用。养殖密度小、饲养环境优良、免疫措施到位、生物安全措施管控严格的猪场，猪传染性胃肠炎的免疫效果相对较好，猪传染性胃肠炎感染与流行的机率也相应减小。

（3）本次免疫试验的4个猪群均未出现免疫副反应，说明猪传染性胃肠炎疫苗安全性高、副反应小，在我县基层推广具有可行性。