不同程度乙肝患者HA、PCⅢ、CⅣ、LN和HBV-DNA水平检测分析

邝永辉 王志剑 欧丹萍 李雪华

【摘要】 目的 分析不同程度乙型病毒性肝炎（乙肝）患者透明质酸（HA）、血清Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、Ⅳ型胶原（CⅣ）、层粘连蛋白（LN）和乙肝病毒-脱氧核糖核酸（HBV-DNA）水平检测差异， 探讨其相关性。方法 99例乙肝患者， 根据疾病诊断及病情程度不同将所有患者分为轻度组、中度组、重度组， 每组33例。检测并比较三组患者乙肝血清标志物情况以及HBV-DNA、HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平， 并分析乙肝患者HBV-DNA与HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平的相关性。结果 轻度组检测乙肝血清标志物情况为乙肝表面抗原（HBsAg）（+）、乙肝表面抗体（HBsAb）（-）、乙肝e抗原（HBeAg）（+）、乙肝e抗体（HBeAb）（+）、乙肝核心抗体（HBcAb）（+）， HBV-DNA水平為（1.14±0.27）×103 copies/ml;中度组检测乙肝血清标志物情况为HBsAg（+）、HBsAb（-）、HBeAg（-）、HBeAb（-）、HBcAb（+）， HBV-DNA水平为（1.71±0.30）×103 copies/ml;重度组检测乙肝血清标志物情况为HBsAg（+）、HBsAb（+）、HBeAg（+）、HBeAb（+）、HBcAb（+）， HBV-DNA水平为（2.80±0.38）×103 copies/ml。重度组患者HBV-DNA水平高于中度组及轻度组， 且中度组患者HBV-DNA水平高于轻度组， 差异均具有统计学意义（P<0.05）。重度组患者HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平分别为（413.26±48.88）ng/ml、（198.17±16.18）μg/L、（189.15±20.67）μg/L、（225.04±23.79）μg/L， 均高于中度组的（318.93±60.05）ng/ml、（159.24±15.87）μg/L、（135.60±13.72）μg/L、（200.11±20.85）μg/L， 及轻度组的（205.16±56.92）ng/ml、（123.98±16.14）μg/L、（80.04±20.76）μg/L、（150.98±35.03）μg/L， 且中度组均高于轻度组， 差异均具有统计学意义（P<0.05）。相关性分析显示， 乙肝患者HBV-DNA表达与HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平均呈明显正相关性（r=0.517、0.433、0.451、0.478， P<0.05）。结论 乙肝患者HBV-DNA水平与HA、PCⅢ、CⅣ、LN均呈明显正相关性， 其对于临床评估乙肝纤维化进展情况具有重要意义。

【关键词】 乙型病毒性肝炎;乙肝病毒-脱氧核糖核酸;透明质酸;血清Ⅲ型前胶原;Ⅳ型胶原;层粘连蛋白

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2020.23.016

乙肝在我国属于最为常见的慢性传染性疾病之一， 患者因各种原因而导致肝脏被乙型肝炎病毒感染而引起急性或慢性炎症;但由于早期缺乏特异性表现， 或症状被其他疾病所遮掩， 造成部分乙肝患者治疗延误并引起严重的肝脏损伤， 甚至出现肝硬化和肝癌， 威胁患者的生命安全[1， 2]。目前临床对于乙肝患者的确诊以及病情严重程度分级多是以组织病理活检作为金标准， 但该检查由于创伤较大， 导致患者排斥性较高， 因此实际应用效果并不理想[3]。随着医疗检测设备和技术的不断进步和发展， 肝脏疾病的血清学指标不断被发现并获得广泛的验证， 其中标志肝纤维化的血清学指标如HA、PCⅢ、CⅣ和LN最为常用[4]。本院为进一步了解肝纤维化指标和HBV-DNA水平在不同程度乙肝患者中的表达以及相关性， 特开展了此项专题研究， 现报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取本院2018年2月～2019年2月收治的99例乙肝患者作为研究对象， 纳入标准：①入组患者均经皮肝组织活检组织病理学诊断明确;②年龄>25岁， 病程>6个月， 患者均知情本研究并签署知情同意书。排除标准：合并严重器质性或系统性疾病、恶性肿瘤、合并其他肝脏或可能影响本研究结果疾病者。根据疾病诊断及病情程度不同将所有患者分为轻度组、中度组、重度组， 每组33例。其中轻度组男20例、女13例， 平均年龄（36.12±3.65）岁;中度组男23例、女10例， 平均年龄（36.32±3.73）岁;重度组男19例、女14例， 平均年龄（35.89±3.87）岁。三组一般资料比较， 差异均无统计学意义（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 方法 分别于清晨空腹状态下采集所有患者静脉血3～4 ml， 采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）及荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测法检测所有患者的乙肝血清标志物及HBV-DNA水平。其中荧光定量PCR检测设备为上海宏石医疗科技有限公司生产的SLAN全自动医用PCR分析系统， 试剂盒由上海复星长征医学科学有限公司提供， 其定量测定范围为103～107 copies/ml;ELISA法试剂由上海科华生物工程股份有限公司提供， 分别检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb， 其结果按照Thermo Multiskan MK3酶标仪比色进行判断。其中HBV-DNA检测结果正常下限参考值为5.0×102 copies/ml。另采用放射免疫法对患者的HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平进行检测。本研究所有检测均由2名临床工作具有5年以上经验的病理科医生进行检测和结果判读。

1. 3 观察指标 比较三组患者乙肝血清标志物情况以及HBV-DNA、HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平， 并分析乙肝患者HBV-DNA与HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平的相关性。

1. 4 统计学方法 采用SPSS22.0统计学软件处理数据。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验;计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验;相关性检验采用Pearson相关分析。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 結果

2. 1 三组患者乙肝血清标志物及HBV-DNA水平比较 轻度组检测乙肝血清标志物情况为HBsAg（+）、HBsAb（-）、HBeAg（+）、HBeAb（+）、HBcAb（+）， HBV-DNA水平为（1.14±0.27）×103 copies/ml;中度组检测乙肝血清标志物情况为HBsAg（+）、HBsAb（-）、HBeAg（-）、HBeAb（-）、HBcAb（+）， HBV-DNA水平为（1.71±0.30）×103 copies/ml;重度组检测乙肝血清标志物情况为HBsAg（+）、HBsAb（+）、HBeAg（+）、HBeAb（+）、HBcAb（+）， HBV-DNA水平为（2.80±0.38）×103 copies/ml。重度组患者HBV-DNA水平高于中度组及轻度组， 且中度组患者HBV-DNA水平高于轻度组， 差异均具有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2. 2 三组患者HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平比较 重度组患者HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平均高于中度组及轻度组， 且中度组患者的水平均高于轻度组， 差异均具有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2. 3 乙肝患者HBV-DNA表达与HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平的相关性分析 相关性分析显示， 乙肝患者HBV-DNA表达与HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平均呈明显正相关性（r=0.517、0.433、0.451、0.478， P<0.05）。

3 讨论

乙肝在临床上由于其病情较为稳定且病情较为漫长， 因此极易造成患者对疾病的忽视， 从而导致未接受相应的对症治疗， 导致慢性乙肝患者的病情出现持续发展;若乙肝病毒长期处于复制活跃阶段， 则会导致肝脏纤维化程度不断加重[5]。国外学者Gordon等[6]在研究中指出乙肝患者最为突出的病理特点便在于肝脏内的肝细胞因大量的以胶原蛋白为主的细胞外基质沉积而引起纤维组织增生;有相关研究[7]提出针对乙肝患者应当进行早期诊断， 并根据病情的严重程度不同制定相应的干预和治疗方案， 从而有效的对肝纤维化进行阻断， 提高患者的治疗效果和预后恢复。因此， 如何选择更加安全有效的非创伤性的检查项目成为乙肝患者关注的重点。

本研究中选择了对轻、中、重三种不同程度的乙肝患者进行分组并检测了各组的HBV-DNA表达和HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平， 结果显示随着乙肝病情严重程度的不断增加， 其HBV-DNA水平也同过往研究结果相一致， 呈现明显的上升趋势， 说明随着乙肝病毒活跃程度的增加， 对患者肝脏的损伤程度也会愈发严重。进一步的研究发现， 除了HBV-DNA水平外， 轻、中、重三种不同程度的乙肝患者， 其HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平也随着病情的严重程度而出现不同程度的增加趋势;这在周萍等[8]的研究中也获得了进一步的证实。而本研究最终结果也显示， 乙肝患者HBV-DNA水平与HA、PCⅢ、CⅣ、LN均呈明显正相关性（P<0.05）， 其r值分别为0.517、0.433、0.451、0.478。其中， HA水平在正常人体中含量极低， 这是因为正常人体中存在HA清除剂的缘故;但一旦肝脏被乙肝病毒侵袭后， 导致HA的清除率下降而引起指标的升高， Hsu等[9]在研究中提出HA水平越高则意味着患者的肝炎程度越重。PCⅢ水平的升高在临床上往往标志着肝脏合成Ⅲ型肽原的活跃程度提高， 而后者水平的升高则说明肝脏发生炎症、坏死以及肝纤维化的风险更高[10]。CⅣ是构成基底膜的重要成分， 因此当肝脏出现纤维化后， 其基底膜的胶原会因此出现变化， 并导致其血清学指标呈现上升趋势[11]。Heidrich等[12]在研究中指出LN也是基底膜的重要组成成分之一， 并将其视为临床标志肝纤维化的重要血清学指标， 其水平的升高与CⅣ保持相同的趋势。因此， 上述血清学指标和HBV-DNA水平的测定不仅有助于乙肝患者病情程度的判断， 而且也对患者纤维化水平的变化趋势提供重要的参考依据。

综上所述， 乙肝患者HBV-DNA水平与HA、PCⅢ、CⅣ、LN均呈明显正相关性， 其对于临床评估乙肝纤维化进展情况具有重要意义。

参考文献

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[收稿日期：2020-03-30]