杨雪莹,张译如,李慧玲,赵玉德,王淑英,邬 剑 ,苏晓曼,张 义
(1.佳木斯大学附属第一医院,黑龙江 佳木斯 154003;2.佳木斯大学基础医学院,黑龙江 佳木斯 154007;3.佳木斯市妇幼保健院检验科,154004)
EB病毒(Epstein-Barr virus)的病毒颗粒为球形。 EB病毒在各人群中具有易感性,其可累及人体全身多个系统,最初主要以呼吸道感染症状为主[1]。EB病毒为非噬肝病毒,但EB病毒感染所致肝损伤极为常见[2]。本次研究对我院最近一年内就诊患者的EB病毒检出率进行分析,对于由该种病毒感染引起的相关疾病的预防与治疗提供临床依据。
对于我院2018-10~2019-09接受EBV检测的6994名儿童患者的临床资料进行回顾性分析,对于EB病毒阳性结果进行分析,分别统计出常见临床症状、年龄分布、季节差异以及病毒载量的检出情况,对于本院的EB病毒的预防及治疗提供一定的数据支持。
具体操作:专业护士用真空采血管(含有抗凝剂)采集受检儿童的静脉血2mL,并且立即轻轻混匀后密闭送检。
1.3.1 实验用品
EB病毒检测试剂盒、ABI7500荧光定量PCR仪、高速水平离心机、低速离心机、淋巴细胞分离液、DNA提取液。
1.3.2 核酸定量检测
它的基本原理是利用EB病毒的特异性引物和荧光探针,用荧光定量PCR的方法进行检测。
1.3.3 实验步骤
(1)加入50μLDNA提取液处理阴阳对照。(2)用生理盐水稀释全血,加入1mL分离液,低速离心20min后吸取单个核细胞层,高速离心5min;在沉淀中加入50μLDNA提取液,混匀后核酸裂解10min;高速离心5min,备用;(3)PCR扩增:加样、编辑、结果分析。
采用WHONET5.6软件进行统计学分析,统计学方法用χ2检验。
EB病毒不同年龄段的检出数不同,本研究中以年龄≤4岁的儿童检出最高,其次为5~8岁儿童容易感染,见图1。
图1 EB病毒不同年龄段的检出情况
EB病毒核酸扩增荧光定量检测的病毒核酸载量以≤5000为主,其次为10000~50000检出较多。见图2。
图2 EB病毒核酸载量分布情况
2018-10~2019-09本院就诊的6994名儿童患者的阳性率随季节的不同而有所改变,其中秋季EB病毒的阳性率最高,具体四个季节的EB病毒检出率情况,见图3。
图3 EB病毒季节阳性率(%)对比分析
本次研究发现EB病毒阳性的儿童出现的一些症状应该引起临床重视,比如:肺炎、发热、支气管炎、急性化脓性扁桃体炎、呼吸道感染、急性脑炎、淋巴结炎、传染性单核细胞增多症等,见表1。
表1 EB病毒阳性者常见临床症状
2018-10~2019-09我院EBV儿童检测人数共6994例,EB病毒阳性例数为962例,阳性率为13.75%(962/6994)。其中女EB病毒阳性数为430例,检出率为13.40%(430/6994-3786);男共有3786例检测,EB病毒阳性数为532例,检出率为14.05%(532/3786)。可见男性检出率多于女性。本院最近一年内检出EB病毒阳性的儿童以≤4岁为主,其次是5~8岁儿童检出率较高,这可能因为儿童的年龄较小,免疫功能也很低下所致。有研究表明,1~10岁患者EB病毒阳性检出率最高,高达59.13%[3]。本研究中EB病毒的四季检出率分别为春季:12.44%,夏季:14.96%,秋季:15.68%,冬季:12.95%,以秋季检出率最高。与某三甲医院的检出情况相似,为春季:26.37%,夏季:22.64%,秋季:36.44%,冬季:13.00%,秋季最高,冬季最低[3]。EB病毒的核酸载量以≤5000检出最多,其次为病毒载量10000~50000检出较多。本研究中EB病毒阳性的儿童临床症状各种各样,其中最常见的症状为:肺炎、发热、支气管炎、急性化脓性扁桃体炎、呼吸道感染、淋巴结炎、传染性单核细胞增多症等。继发性HPS(噬血细胞综合征)以EB病毒感染最多见[4]。慢性活动性EB病毒感染是由持久性EB病毒感染引起的一种罕见且可能危及生命的疾病[5]。EB病毒感染临床表现的多样性与机体的免疫状态密切相关[6]。EB病毒感染也见于一些儿科疾病中,如:大细胞间变性淋巴瘤,川崎病等[7]。由EB病毒引起的疾病可累及全身各系统,其中肾脏损害较少,为0~13%[8]。
EB病毒最初通过口咽感染人类,在发展中国家,通常发生在儿童早期,而发达国家可能较晚[9]。有症状的原发性EB病毒感染通常是青少年的限性疾病[10]。研究表明,EB病毒的存在与肿瘤侵袭性之间可能存在联系[11]。目前,肿瘤的治疗仍然是一个很大的挑战。减少EB病毒移植后淋巴增生性疾病的疫苗将是预防EB病毒相关恶性肿瘤的重要原理证明[12]。鼻咽癌是EB病毒引起的最常见的疾病,对于它的治疗也有了一定的进展。AKR1B10蛋白可用于治疗鼻咽癌[13]。综上所述,医院相关部门应该加强EB病毒的筛查工作,这对于预防EB病毒引起的相关疾病的发生意义重大。