自身免疫性脑炎与外周血免疫指标及红细胞免疫指标的相关性研究

齐红艳, 吴 芳

(陕西省西安市儿童医院 神经内科, 陕西 西安, 710003)

自身免疫性脑炎(AE)是一组自身免疫功能系统中存在的自身抗体损害中枢神经，进而导致精神及认知等脑组织功能异常的疾病。研究[1]显示, AE的发病与家族遗传、免疫细胞功能受损及细菌、病毒入侵等因素存在相关性。AE严重危害患儿的健康，近年来其检出率呈显著上升趋势，早期进行疾病诊断及预防治疗尤为重要。研究[2]指出，人体内的红细胞免疫指标以及外周血相关免疫指标检测结果与自身免疫细胞功能之间存在一定联系。本研究探讨AE患儿体内的免疫细胞指标水平与疾病的相关性，旨在为临床治疗提供一定参考，现报告如下。

1 资料及方法

1.1 一般资料

选取本院2015年5月—2019年5月收治的80例AE患儿为观察组，其中男36例，女44例; 年龄3～12岁，平均(7.48±4.37)岁; 病程1～5年，平均(3.42±1.98)年。另选取同期体检的40例健康儿童为对照组，其中男18例，女22例; 年龄4～13岁，平均(8.17±4.35)岁。2组儿童的年龄及性别分布比较，差异无统计学意义(P>0.05)。本研究方案经患儿及其家属知情同意并签订知情同意书，并经本院伦理委员会批准。纳入标准[3]: ① AE患儿的实验室相关检查结果符合中华医学会心脑血管疾病分会制定的AE的临床诊断标准[4]; ② 实验前3个月内未服用过免疫类及激素类治疗药物; ③ 年龄3～12岁，且积极配合整个研究过程。排除标准[3]: ① 伴有其他部位的脑组织损伤或智力功能障碍; ② 合并肝脏、肾脏等主要组织器官功能减退; ③ 伴有急性感染或血液、内分泌系统疾病。

1.2 方法

采集所有儿童清晨空腹肘正中静脉血4 mL, 注入黄色生化管中，避免摇晃，及时送至检验科，放置于-25 ℃环境中，在3 500转/min条件下离心10 min，静置后取上层血清进行免疫因子指标检测，采用全自动生化检测仪(美国贝克曼公司AU5800型号)，以流式细胞检测法检测外周血免疫指标CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD8+及自然杀伤细胞(NK细胞)水平，以免疫吸附法对红细胞免疫亲和力受体(FEER)、红细胞免疫因子复合物花环(RBC-ICR)、红细胞C3b免疫受体花环(RBC-C3bR)及电泳指数、聚集指数、刚性指数进行检测，检测试剂由山东博科有限公司提供，严格按照检测说明书进行相关操作。

1.3 观察指标

① 观察2组患儿的外周血免疫指标; ② 观察2组患儿的红细胞免疫及多项功能指标; ③ 以AE为自变量，以CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD8+、NK细胞、FEER、RBC-ICR、RBC-C3bR为因变量，分析各指标与AE的相关性。相关指标的正常值范围参照文献[5]。① 外周血免疫指标正常值: CD3+为60%～80%, CD4+为35%～55%, CD4+/CD8+为1.00～2.87, CD8+为15%～20%, NK细胞为8.1%～25.6%。② 红细胞免疫指标正常值: FEER为45%～50%, RBC-ICR为2%～7%, RBC-C3bR为10%～15%。③ 红细胞相关指数正常值: 电泳指数4.59～6.17, 聚集指数3.19～5.33, 刚性指数3.71～5.61。

1.4 统计学分析

2 结 果

2.1 外周血免疫指标比较

观察组患儿的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及NK细胞水平低于对照组, CD8+水平高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 2组儿童外周血免疫指标比较

2.2 红细胞免疫及多项功能指标比较

观察组患儿的FEER、RBC-ICR、RBC-C3bR、电泳指数、聚集指数、刚性指数均低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05), 见表2。

表2 2组儿童红细胞免疫及相关功能指标比较

2.3 外周血免疫指标、红细胞免疫指标与AE的相关性

以AE为自变量，以CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD8+、NK细胞、FEER、RBC-ICR、RBC-C3bR为因变量，进行相关性分析显示, AE疾病与CD8+呈显著正相关性(r=0.657,P<0.05), AE疾病与CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK细胞、FEER、RBC-ICR、RBC-C3bR呈显著负相关性(r值分别为-0.758、-0.635、-0.768、-0.814、-0.987、-0.765、-0.854，P均<0.05), 见表3。

表3 外周血免疫指标、红细胞免疫指标与AE的相关性分析

3 讨 论

AE的病因机制尚未明确，李春等[6]认为机体细胞免疫功能受损后会降低免疫反应强度，产生抗体，而这种抗体本身具有毒性，会损害中枢神经及脑组织功能，导致患儿认知能力、记忆力等减退。近年来有学者[7]对心力衰竭患者体内的免疫细胞因子进行检测，发现免疫细胞水平与疾病本身存在一定联系，而AE患儿体内的免疫细胞因子指标是否与疾病本身具有联系尚待证实。

调节性T细胞作为一种常规的有效抑制性T细胞，可以有效调节机体的免疫抑制力，增强病毒入侵时的对抗性，其中CD3+、CD4+主要起辅助作用，通过分泌免疫细胞因子来调节机体的免疫反应; CD8+主要是抑制淋巴细胞产生抗体来发挥免疫调节机制，减少病原菌入侵，水平升高常见于细菌、病毒感染及免疫细胞功能受损; 皮肤黏膜是机体抵抗细菌、病毒的屏障, CD4+/CD8+主要作为免疫调节的一项指标，可以有效反映AE患者体内细胞免疫因子功能情况，若出现异常，表明免疫功能出现紊乱; NK细胞是重要的免疫调节细胞，可以抵抗细菌、病毒的入侵，参与AE疾病的发生、发展[8]。正常情况下，机体主要通过T淋巴细胞与NK细胞的相互作用、制约来发挥免疫调节机制，从而维持机体内正常的免疫调节功能。本研究中，观察组患儿的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及NK细胞水平低于对照组, CD8+水平高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。分析原因, AE常由细菌、病毒感染所致，当病毒入侵时会通过血脑屏障进入到中枢神经及脑组织，损害脑神经功能，也降低患儿免疫抑制功能，造成CD3+、CD4+等免疫细胞因子水平下降, CD8+细胞因子水平上升，这一观点与刘夏青等[9]研究结论相符。

近年来，临床对红细胞免疫因子指标的研究不断深入，红细胞在体内可清除血液循环过程中的阻碍物质，维持机体正常免疫水平，其中FEER主要反映红细胞的免疫吸附功能，其水平降低预示着免疫功能减弱[10]; 而RBC-ICR与RBC-C3bR作用于红细胞膜，通过对血液中免疫因子复合物的吸附来抵抗细菌、病毒的入侵，辅助提高免疫功能。红细胞电泳指数反映红细胞在直流电下移动的时间，降低常表示红细胞聚集能力减弱，免疫抑制功能下降[11-12]; 聚集指数反映红细胞对于病原体的聚集能力，而刚性指数反映红细胞的细胞膜柔韧度。正常生理条件下，红细胞具有较好的聚集能力，可以吸附体内的病原菌，清除病毒，提高抵抗力。本研究中，观察组患儿的FEER、RBC-ICR、RBC-C3bR、电泳指数、聚集指数、刚性指数均显著低于对照组(P<0.05)。分析原因, AE患儿的免疫细胞功能受损，降低了红细胞的聚集、吸附能力，破坏了细胞膜的韧性，缩短了红细胞在电荷下的运动时间，从而导致FEER、RBC-C3bR等指标水平的下降，与STEINER J等[13]研究结果相近。

相关研究[14]显示，免疫性疾病的发生及发展与T淋巴细胞水平异常有关，当免疫系统遭到破坏时，会损伤自身免疫因子，加速淋巴细胞的释放，产生自身抗体，影响周围神经功能，进一步加快疾病进程。而免疫因子反应以及免疫调节机制的强弱也与淋巴细胞功能、数量有关，多数AE患儿体内的T淋巴细胞数量减少，减弱了对外界病原体的抵抗能力，从而影响了免疫细胞功能。外周血T淋巴细胞亚群与NK细胞之间相互作用共同起到调节免疫功能的作用，红细胞免疫因子指标由红细胞内C3b受体、FEER及相关红细胞指数组成，反映AE患者体内免疫功能的变化情况。外周血免疫指标及红细胞免疫因子指标改变，会影响机体内免疫细胞功能，进而影响疾病的发生、发展。自身免疫功能受损，也会影响免疫指标的改变。本研究以AE为自变量，以CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD8+、NK细胞、FEER、RBC-ICR、RBC-C3bR水平为因变量进行相关性分析, AE疾病与CD8+水平呈正相关性(r=0.657,P<0.05), 与CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK细胞、FEER、RBC-ICR、RBC-C3bR水平呈负相关性(P<0.05)。这是由于AE患儿体内免疫系统紊乱，导致细胞免疫功能受损，红细胞免疫因子的吸附及聚集能力减弱，机体内多数C3b受体的因子特异性表达水平降低，清除血液循环过程中的免疫复合物的能力减弱, CD8+水平异常增高，抑制了免疫调节功能，导致细菌、病毒入侵，进一步降低了机体免疫功能，与STAFFORD EG等[15]研究结论相符。

综上所述, AE患儿体内的外周血免疫指标、红细胞免疫指标水平与疾病存在相关性，可为AE的治疗提供一定参考依据。但本研究样本量有限，实验过程中存在一定误差，还需继续深入研究进行证实。