携带B族链球菌的妊娠晚期孕妇妊娠结局分析

王 俊, 安 良, 王亮亮, 张利平

(1. 陕西省西安高新医院 检验科, 陕西 西安, 710075; 2. 延安大学附属医院 产科, 陕西 延安, 716000)

B族链球菌是一种需氧型革兰阳性链球菌，通常寄生于直肠与阴道内，是一种条件致病菌[1]。相关研究[2-3]显示，B族链球菌在1970年以来被证实是母婴感染的主要致病菌之一，也是婴幼儿脑膜炎以及败血症的最常见原因之一[4]。B族链球菌自身可产生侵袭性酶类以及毒素，且主要产生的致病菌为透明质酸酶、链球菌溶血素以及杀白细胞素等，上述物质在人体内会造成一系列的感染[5]。该病菌一般寄生于孕妇生殖道内，并且能够沿着阴道上行至宫腔内，或者分娩时导致新生儿感染，继而引发其免疫力低下，并导致一系列疾病。本研究探讨妊娠晚期孕妇携带B族链球菌的情况及其对孕妇妊娠结局的影响，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年1月—2019年2月210例携带B族链球菌的妊娠晚期孕妇，其中高龄产妇40例(产龄大于35岁)。产妇年龄23～45岁，平均(35.02±3.10)岁; 初产妇130例，经产妇80例; 28～34孕周的孕妇60例，超过34孕周的孕妇150例。2组一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)。纳入标准: 孕妇近期未使用抗生素; 孕妇有家属陪同，且同意参与研究。排除标准: 孕妇临床资料不完整; 孕妇配合依从性差。

1.2 方法

1.2.1 取材: 采集标本时先将外阴分泌物擦去，之后用2根无菌阴道棉拭子在阴道下三分之一处旋转1周，获取阴道分泌物。之后再选取2根棉拭子插入肛门内，在肛门括约肌2～3 cm处旋转获取直肠分泌物。将所得标本分为2份, 1份用于细菌培养，另1份用于实时聚合酶链式反应(PCR)技术监测。

1.2.2 细菌培养: 将210份标本置于生物安全柜中，接种COBA平板与改良TH肉汤，之后置于浓度为5% 的CO2环境中，温度保持在34～36 ℃, 放置18～24 h; 观察COBA平板的菌落生长特点，并观察有无白灰色或者是粉红色B群链球菌生长菌落，如果无典型菌落生长，则经TH肉汤过夜之后，再进行对比。之后用转种哥伦比亚血平板对标本细菌进行培养(与COBA平板培养方法相同)，观察2个平板上菌落生长情况，如果发现怀疑菌落，则按照B群链球菌鉴定的过程进行诊断。

1.2.3 聚合酶链式反应(PCR)检测: 将棉拭子置于2 mL标本运输液中振荡混匀，室温下保存与运送, 24 h时检测。之后吸取50 μL液体，置于1.5 mL离心管中，以13 000转/min的速度离心5 min, 取上清液并弃之，再用50 μL三羟甲基氨基甲烷-乙二胺四乙酸缓冲液重悬，并加进10 μL做参照。之后将一根提取固形物置入菌落中，高速振荡5 min, 待瞬时离心后，在95 ℃水中加热2 min, 再立即冰浴，将所获取的标本加入PCR反应管、5 μL阳性以及阴性对照上清液，并将管盖盖紧后低速瞬时离心。将待检测的PCR反应管进行扩增检测，时间为4 h。若检测结果与PCR检测结果不同，则进行第2次扩增检测。

1.3 观察指标

观察并统计直肠样本与阴道样本检测的阳性率; 分析B族链球菌带菌情况，直肠或者阴道检测有1项为阳性，则视为阳性。观察并统计实时PCR与细菌培养检测的阳性率。比较不同孕周妊娠期妇女B族链球菌检出阳性率，并统计分析阳性患者(阳性组)与B族链球菌阴性患者(阴性组)的妊娠结局。

1.4 统计学分析

2 结 果

2.1 直肠样本与阴道样本检测阳性率比较

直肠样本中，阴性197例，阳性13例; 阴道样本中，阴性185例，阳性25例。阴道样本检测的阳性率为11.91%，显著高于直肠样本的6.19%(P<0.05)。

2.2 PCR与细菌培养检测的阳性率比较

实时PCR法结果显示，阴性180例，阳性30例，阳性率为14.29%; 细菌培养法结果显示，阴性184例，阳性26例，阳性率为12.38%; PCR与细菌培养检测的阳性检测率比较，差异无统计学意义(P>0.05)。

2.3 不同孕周妊娠期的妇女B族链球菌检出阳性率比较

>34～37周B族链球菌的阳性检出率较其他孕周显著增高(P<0.05), 见表1。

表1 不同孕周妊娠期的妇女B族链球菌阳性检出率比较[n(%)]

2.4 B族链球菌阳性组、阴性组妊娠结局比较

B族链球菌阳性组与阴性组的早产发生率比较，差异无统计学意义(P>0.05); B族链球菌阳性组的羊膜炎、宫内感染、胎儿窘迫发生率显著高于B族链球菌阴性组(P<0.05)。见表2。

表2 B族链球菌阳性组、阴性组的妊娠结局比较[n(%)]

3 讨 论

B族链球菌被认为是引发新生儿败血症以及肺炎的主要病原菌之一，该病菌通常定植在女性生殖道中。妊娠期孕妇的自身雌激素以及孕激素水平升高，导致阴道pH值改变、机体免疫功能低下，容易引发阴道菌群失调，增高了B族链球菌繁殖的概率[6-7]。研究[8]显示，新生儿出生前4 h给予孕妇抗生素治疗，能够减少新生儿感染概率。因此，准确诊断晚期妊娠孕妇B族链球菌定植有重大临床意义。B族链球菌的检测方法较多，包括平板培养法、抗原检测法以及PCR法，不同方法均有一定的利弊，如抗原检测法的优点为检测时间短，但是假阴性的例数较多[9]。因此，寻找一种有效的诊断措施，可以提高疾病的检测准确率。

临床检验发现, B族链球菌会受到各种因素的干扰，如取标本时间、取材的部位以及检测细菌方法等[10]。虽然细菌培养与PCR检查法均可以准确地检测出B族链球菌，但是细菌培养需要的时间较长，而且对于胎膜早破、早产的孕妇而言，容易因检测时间长而耽误用药的最佳时机，患儿被该病菌感染的概率也会相对增加，进而影响妊娠结局[11]。另外，标本采集后会受到储存条件、保存温度、阴道其他微生物的干扰，均会影响检测的准确性。与细菌培养比较, PCR技术检查的速度快，而且检测准确率高，并且能够将已经死亡的B族链球菌检测出来，受到其他因素干扰的情况也较少[12]。

本研究结果显示，孕妇在>34～37周时B族链球菌的阳性检测率最高。研究[13]指出, B族链球菌检测时间在分娩6周前实施，检验方法的敏感度以及特异度均会下降。对B族链球菌阳性以及阴性组的孕妇进行跟踪随访，结果显示，B族链球菌阳性组的羊膜炎、宫内感染、胎儿窘迫发生率显著高于B族链球菌阴性组(P<0.05), 提示B族链球菌阳性能够影响妊娠结局，因此应该在适当时间内对妊娠晚期孕妇进行B族链球菌检测，且使用适当的抗生素以改善妊娠结局。

综上所述, PCR检测法在妊娠晚期孕妇B族链球菌检测中应用效果较好，能够准确检测疾病，为临床干预新生儿分娩提供可靠的理论依据。