精索静脉曲张患者精浆TGF-β,IL-2及IL-6水平与精液质量的关系研究

华 斌，王书斌，陈妍妍(兴化市第五人民医院检验科,江苏兴化 225766)

精索静脉曲张（varicocele,VC）是男性泌尿生殖系统常见的疾病，也是临床上造成男性不育的主要原因，其中青壮年男性具有较高的发生率。发病机制是由于包绕精索的静脉和蔓状静脉丛的扩张引起血管性精子发生障碍所致[1]。近年来研究发现，细胞因子在男性静脉曲张不育的发病中起着非常重要的作用，细胞因子是由机体内活化的免疫细胞和某些基质细胞分泌的具有高活性和多功能的小分子蛋白质，参与介导炎性反应和免疫应答等多种生物效应，与生殖相关的细胞因子主要包括白介素、干扰素、表皮生长因子和肿瘤害坏因子等[2]。本研究中收集VC 患者和正常男性精液标本测定转化生长因 子（transforming growth factor-β，TGF-β）、白介素-2（interleukin-2，IL-2）以及白介素-6（interleukin-6，IL-6）等指标的水平，分析细胞因子对精液质量的影响作用，旨在为治疗VC 引起男性不育提高科学依据。

1 材料与方法

1.1 研究对象 收集江苏省兴化市第五人民医院2018年1月～2019年12月收治的VC 患者40 例（观察组），同时抽取同期体检健康者40 例为对照组，其中观察组年龄22～36 岁，平均年龄28.62±3.29岁；对照组年龄24～38 岁，平均年龄28.21±3.98岁；两组患者一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05）。纳入标准：①患者经常规体检和彩色多普勒超声检查确诊为原发性VC；②研究符合伦理道德，患者知情同意。排除标准：①生殖道畸形、全身性疾病；②严重器质性疾病；③长期接触有毒有害物质；④遗传病家族史患者排除。

1.2 仪器与试剂 ELISA 试剂盒购自深圳康百德生物科技有限公司，批号20180106；En Spire2300型酶标仪购自铂金埃尔默仪器有限公司。

1.3 方法 按照标准[3]采集两组研究对象的精液，在禁欲2～7 天后留取精液标本，待液化后立即进行常规分析，另取一部分精液高速离心后分离精浆，按照ELISA 定量试剂盒要求检测TGF-β, IL-2, IL-6 等指标的水平。

1.4 统计学分析 SPSS25.0 软件，计量资料以均数±标准差 （±s）表示，组间比较采用独立样本t 检验；计数资料以n(%)表示，组间比较采用χ2检验；P ＜0.05 为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 精液常规及精浆中细胞因子各项指标水平比较 见表1。与对照组相比，观察组患者精子密度和精子活动率均明显降低，两组间的差异均具有统计学意义（P ＜0.05），观察组患者IL-2, IL-6 和TGF-β 等指标水平均显著升高，两组间的差异均具有统计学意义（P ＜0.05）。

表1 两组精液常规及精浆中细胞因子各项指标水平比较（n=40, ±s）

表1 两组精液常规及精浆中细胞因子各项指标水平比较（n=40, ±s）

项 目 观察组 对照组 t P精液量（ml） 3.14±0.76 2.97±0.81 0.968 0.336 pH 值 7.30±0.15 7.29±0.16 0.288 0.774精子密度（×106/ml） 34.65±9.02 51.23±6.23 9.566 ＜0.001精子活动率（%） 51.35±7.21 68.04±5.16 11.906 ＜0.001 IL-2（ng/ml） 1.18±0.15 0.43±0.11 25.501 ＜0.001 IL-6（ng/ml） 1.42±0.16 0.53±0.08 31.466 ＜0.001 TGF-β（ng/ml） 201.64±53.21 138.61±24.92 6.485 ＜0.001

2.2 相关性分析 见表2。精浆中IL-2, IL-6 和TGF-β 水平和VC 患者的精子密度、精子活动率呈明显的负相关性，IL-2, IL-6 和TGF-β 之间呈明显的正相关性，差异均具有统计学意义（均P＜0.05），与患者精液量和精液pH 值无明显相关性。

表2 精浆中IL-2, IL-6 和TGF-β 水平和精液质量参数的相关性

3 讨论

VC 属于一种血管病变，病情严重的患者出现不育，而临床上出现不育的精液异常的患者多数是由VC 引起的，对VC 患者进行精索高位结扎后患者的精液质量会明显提高[4]。研究证实，引起患者发生VC 的机制主要有：精索内静脉瓣膜发生缺失或发育不全后血液发生返流[5]；5-羟色胺、儿茶酚胺、类固醇等一些反流物质堆积，使患者表现出不育；引起生精细胞过度凋亡[6]；过度产生活性氧使细胞膜脂质层发生破坏，从而影响生精细胞正常功能；睾丸内环境中一氧化氮的浓度持续升高，损伤正常的细胞，使生精细胞的数目减少或功能减弱；睾丸组织中有毒物质蓄积对精子的生成造成干扰。而近年来很多研究证实免疫相关的细胞因子在VC患者所致的不育中具有重要的作用[7]。

本研究结果显示，发生VC 的患者精子密度和精子活动率明显低于健康男性，患者精浆中的IL-2,IL-6 和TGF-β 等细胞因子水平明显高于对照组，差异具有统计学意义。患者精子密度、精子活动率等反映精液质量的主要参数与IL-2, IL-6 和TGF-β 呈明显负相关性，IL-2, IL-6 和TGF-β 之间呈明显正相关性。目前已有研究证实多种IL, TNF, 肿瘤坏死因子相关配体（TNF-related apoptosis-inducing ligand，TRAIL）等细胞因子存在于人类的精子中[8]。生殖系统感染后会刺激内皮细胞分泌IL-6 和IL-2，使白细胞透过受损的血-睾屏障进入精浆参与免疫病理过程[9-10]，IL-6 可促进VC 患者精子生物膜表面的脂质过氧化过程，影响精子细胞的耐受力、受精和着床，降低精子数目从而发生不孕[11-13]。TGF-β 属于具有多重效应的信号分子，实质是蛋白质，具有独特的免疫调节功能，可调节睾丸间质细胞的类固醇合成，诱导生精细胞凋亡[14-15]。因此，IL-2, IL-6和TGF-β 水平与精子质量密切相关。

综上所述，VC 患者IL-2, IL-6 和TGF-β 等细胞因子水平高低与精液质量呈明显的负相关性，为阐明VC 不育机制和临床治疗提供依据。