张娜 郑宁宁 郭凯丽 丁瑞雪 王睿 刘继平
【摘要】目的:辣木茯茶保健作用评价。方法:观察辣木茯茶煎煮液对小鼠耐缺氧、抗疲劳及其对小鼠酒精性肝损伤模型的影响,评价辣木茯茶的保健作用。结果:耐缺氧、抗疲劳研究结果表明,辣木茯茶组存活及游泳时间比空白组显著延长(P<0.01);在小鼠酒精性肝损伤实验中,辣木茯茶煎煮液给予治疗后能使肝损伤模型组血清ALP、ALT及AST较肝损伤模型组显著降低(P<0.05或P<0.01),肝组织SOD显著增高、MDA显著降低及GSH-PX显著升高(P<0.05或P<0.01表8)。结论:辣木茯茶具有一定保健作用。
【关键词】辣木茯茶;保健作用;实验研究
[中图分类号]TS272.5 [文献标识码]A [文章编号]2096-5249(2020)16-000-02
1 材料
1.1实验动物 雄性SD小鼠70只,SPF级,体重 20~22g,成都达硕实验动物有限公司提供,许可证号:SCXK(川)2015-030。
1.2试剂 煎煮液并浓缩成100%的茶液,备用)。血清谷草转氨酶(AST/GOT)测试盒(C010-2)、谷丙转氨酶(ALT/GPT)测试盒(C009-2)、碱性磷酸酶(AKP/ALP)测试盒(A059-2),以上试剂来源均为南京建成生物工程有限公司。
1.3主要仪器 离心机(上海安亭科学仪器厂,型号TDL-80-2B),酶标仪(美国BioTek公司,型号ELx808IU),电子分析天平 (赛多利斯科学仪器有限公司,型号BSA224S-CW),普通采血管。
2 方法
2.1耐缺氧实验 (1)取正常小鼠,体重20±2g,自由摄食摄水,动物室内光照12h昼夜循环,室温维持22~25℃,适应性喂养3天。将250mL广口瓶内加入钠石灰15克,用以吸收二氧化碳和水份。然后取小白鼠20只,称重后分为2组,每组10只。将一组辣木茯茶适量灌胃,另一组给以等量生理盐水。给茶后30分钟,将2组小鼠同时放入广口瓶中,并将盖盖严,立即记录时间,观察小鼠的活动,直至死亡,记录死亡时间,求得各小鼠的存活时间。综合实验结果,求得辣木茯茶组小鼠平均存活时间[1] 。(2)计算方法。存活时间延长百分率=(受试茶组平均存活时间-对照组平均存活时间)/对照组平均存活时间×100%
2.2抗疲劳实验 取小鼠20只,称重后分为2组,每组10只。一组给予辣木茯茶适量灌胃,另一组给以等量生理盐水。给茶后30分钟将小鼠(每次1只)投入玻璃缸进行游泳试验,水深25cm,水温调节30℃。为缩短观察时间可给予小鼠尾部用铅皮负重(体重的5%),用秒表计算鼻孔沉下水面所需时间,统计比较[2] 。
2.3辣木茯茶对小鼠酒精性肝损伤保护作用研究
2.3.1肝损伤模型建立及给茶 将30只小鼠分为正常组(空白组)、肝损伤模型组、辣木茯茶组,每组各10只,除正常组外,其余小鼠每日灌胃给予相应茶液(肝损伤模型组给予生理盐水)后4h用50%乙醇12mL/kg·bw灌胃,连续14d,末次乙醇灌胃6h后,小鼠麻醉,收集血清和肝脏标本,肝脏用10%的甲醛溶液固定,石蜡包埋[3-5]。
2.3.2指标检测 (1)血清学肝功能测定:取小鼠血液约0.3mL,置干燥玻璃管内,37℃保温30min,4℃冰箱静置2h,2000rpm,离心10min,取血清,-80℃保存自动生化分析仪检测肝功能指标ALT、AST、ALP。
3 结果
3.1辣木茯茶对小鼠耐缺氧、抗疲劳的影响实验
3.2辣木茯茶煎煮液对小鼠肝脏功能生化指标的影响 与空白组相比,肝损伤模型组的血清ALP、ALT及AST显著增高(P<0.01);给予辣木茯茶煎煮液治疗后血清ALP、ALT及AST较肝损伤组显著降低(P<0.05或 P<0.01,表2)。
3.3辣木茯茶煎煮液对小鼠肝脏SOD、MDA、GSH-PX的影响 与空白组相比,肝损伤模型组肝脏的SOD显著降低、MDA显著增高及GSH-PX显著降低(P<0.05或P<0.01);给予辣木茯茶煎煮液后肝脏SOD显著增高、MDA显著降低及GSH-PX显著升高(P<0.05或P<0.01,表3)。
3.4辣木茯茶煎煮液对小鼠肝脏损伤程度的影响 空白组镜下肝细胞结构完整,无炎细胞浸润、肝细胞变性;模型组肝细胞肿胀,出血、局灶性坏死;辣木茯茶组肝细胞肿胀,局灶性坏死,与模型组比较有明显改善。辣木茯茶煎煮液治疗组能显著改变上述病理改变(结果见图1)。
4 讨论
辣木含有丰富的营养成分,具有多种功效,作为蔬菜和食品有增进营养,食疗保健功能。但目前有关辣木茯茶的保健作用研究尚未进行,其质量评价体系并不完善。本研究旨在通过对辣木茯茶的研究,来分析辣木茯茶的保健效果。辣木茯茶对保护酒精引起的小鼠肝损伤有一定的改善作用。由此可见,辣木茯茶的确有保健作用,可长期服用。
参考文献
[1] 马艳, 汪宇, 康万军, 等. 蛹虫草口服液对小鼠耐缺氧和抗疲劳作用[J]. 中国药师2012, 15(10): 1375-1377.
[2] 罗翔丹, 潘风光, 张铁华, 等. 鹿茸多肽对小鼠耐缺氧和抗疲劳能力的影响[J]. 食品科学2008, 29(04): 386-388.
[3] 林春兰, 蒋建伟, 严玉霞, 等. 茶多酚对酒精诱导的小鼠肝脂质过氧化和血清ALT活性变化的影响[J]. 中国病理生理杂志, 2003, 19(1): 110-112.
[4] 梁華峰, 张莉莉, 吴帅, 等. 辣木种子提取物对小鼠实验性肝损伤的保护作用[J]. 中成药, 2019, 41(2): 285-291.
[5] 李大伟, 张士康, 吴惠岭, 等. 茶叶特征成分对小鼠酒精化学损伤修复作用的动物实验研究初报[J]. 中国茶叶加工, 2011, 35(1): 34-38.
基金项目:2018年国家级大学生创新创业训练计划“辣木茯茶保健作用评价”(201810716027)
通信作者:刘继平(1978-),男,博士,教授,研究方向:中药精神神经药理学。E-mail:liujiping@163.com