朱政 李文远 张玉芳 王惠珍 刘永斌 朱苗蕊 张晓惠
【摘要】目的:研究分析姜黄素对大鼠颈动脉球囊损伤后平滑肌细胞IL-18表达的影响。方法:选取正常SD雄性大鼠60只,采用随机分组的方式分为两组,30例作为对照组球囊损伤组,30例作为实验组姜黄素治疗组,随后建立大鼠颈动脉球囊损伤模型,对照组采用生理盐水灌胃,而实验组采用姜黄素灌胃,在损伤后大鼠颈动脉分别在第3/7/14d内取材,采用酶联免疫吸附办法监测反应不同时间点内大鼠平滑肌细胞IL-18的表达情况,对比两组患者的IL-18表达水平。结果:经过损伤后不同方式进行处理,实验组大鼠在不同时间点内IL-18表达的水平均低于对照组,同时相较于对照组平滑肌细胞增值受抑制明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:姜黄素对大鼠颈动脉球囊损伤后进行治疗能够明显抑制炎症因子IL-18在的表达,具有明显抑制炎症的作用,在临床实验中抗炎明显,具有继续研究价值。
【关键词】大鼠颈动脉球囊损伤;姜黄素;平滑肌细胞IL-18表达
[中图分类号]R [文献标识码]A [文章编号]2096-5249(2020)16-000-02
近年来研究人员发现血管在损伤之后的修复可能会出现平滑肌细胞增值与基质合成导致血管狭窄的情况发生,严重影响患者预后,在该过程中炎性因子可能发挥了不同的作用,经过新研究发现,IL-18是一种具有多项性效应的促炎症因子,该因子在血管狭窄事件中可通过基质金属蛋白酶-9达到有道人体冠动脉平滑肌细胞迁移的目的,从而导致血管狭窄情况的发生[1]。本文以正常SD雄性大鼠为实验对象,探究姜黄素对大鼠颈动脉球囊损伤后平滑肌细胞IL-18表达的影响效果,分析使用可行性,研究内容如下。
1 资料与方法
1.1一般资料 选用雄性SD大鼠60只,所有大鼠均由标准化SPF级实验动物室所提供,提质量为300~350g,平均为(323.4±11.1)g,均为12月龄。
1.2方法
1.2.1材料及模型、组织工作 (1)材料:球囊导管选用美国ME公司标准为长20mm,半径1.0mm的导管,而IL-18试剂盒选择美国ADL公司的IL-18试剂盒,姜黄素(陕西森弗生物有限公司,国药准字JGS081011)的纯度为98%的药物。(2)动物模型与组织处理:首先使用浓度为3%的戊巴比妥钠进行大鼠腹腔麻醉,随后暴露出左侧颈动脉,长度约为2.5cm,外动脉行切口,将导管插入总动脉,随后注入生理盐水约0.15l,来回牵拉导管3~4次,随后拔出,之后结扎外动脉后缝合,术后给予抗感染治疗,术后14d采用大出血办法处死,收集全血。
1.2.2 分组处理 两组大鼠中,球囊损伤组进行生理盐水灌胃,而实验组则采用姜黄素100mg·kg-1·d-1灌胃,在光镜下观察血管内膜与中膜的增生情况。
1.2.3 IL-18监测 采用美联免疫吸附法(ELISA)进行检测,将全血收集后规范保管,随后进行全血离心后取血清等步骤严格按照说明书规范进行,操作完成时候将酶标板至于酶标仪上读取OD数值,根据OD数值计算样本中IL-18的浓度。
1.3 观察指标 (1)IL-18表达水平:3/7/14d内两组大鼠的IL-18表达情况。(2)动脉平滑肌增生情况:显著(光镜下血管内平滑肌增生明显,血管狭窄情况明显可见);可见(光镜下能够见到血管内平滑肌增生,但是并未形成血管狭窄);未增生(光镜下平滑肌未增生,无血管狭窄情况出现)。
1.4 统计学方法 将数据纳入SPSS17.0软件中分析,计量资料比较采用t检验,并以(_x±s)表示,率计数资料采用χ2检验,并以率(%)表示,(P<0.05)为差异显著,有统计学意义。
2 结果
经过损伤后不同方式进行处理,实验组大鼠在不同时间点内IL-18表达的水平均低于对照组,同时相较于对照组平滑肌细胞增值受抑制明显,差异具有统计学意义(P<0.05),数据对比如表1。
3 讨论
人体主动脉发生疾病会累及全身出现并发症,患者生存质量受到明显影响,血管造影显示再狭窄率极高,当前认为再狭窄主要机制之一则是血管壁局部损伤触发过度的平滑肌细胞增殖与基质的合成[2]。在该过程中IL-18起到明显的作用,机制具体位置IL-18过度参与到AP-1和NF-KB介导物质的激活过程当中,被激活的两种介导出现异位表达的情况,从而导致基质金属蛋白酶启动因子(MMPS)活性不断增强,MMPs能够有效降解细胞外基质从而促进动脉内平滑肌细胞出现迁移并且新生内膜的过度增生[3]。大鼠在颈动脉球囊受到损伤之后,如果没有发生感染等情况,自身的调节作用会促进动脉血管的自我修复,而在该过程中除了血管的修复,则可能出现平滑肌细胞增生出现血管再狭窄等的情况,动脉血流出现异常,如果发生在人体身上将十分危险。
球囊损伤后的第三天,血管修复促使新生内皮细胞出现,此时IL-18水平一般,在7d可以明確观察到管腔内部分可见内皮细胞,新生内膜增厚,此时IL-18的分泌水平达到顶点,平滑肌细胞增殖十分明显[4]。要实现平滑肌增殖则需要预防介入,在平滑肌细胞实现增殖之前有效的遏制和截断该过程的发生,本研究选择姜黄素作为抗炎药物,该药物是姜黄的提取物,姜黄素抗炎主要是通过减弱PDGF介导的信号途径的传导、抑制增殖以及细胞外胶原的合成,具有明显的下调生存素表达、抑制新生内膜增厚的作用,同时经过药物的使用,IL-18的表达水平受到明显抑制,药物具有明显抑制炎症的作用[5]。
综上所述,姜黄素对大鼠颈动脉球囊损伤后进行治疗能够明显抑制炎症因子IL-18在的表达,具有明显抑制炎症的作用,在临床实验中抗炎明显,具有继续研究价值。
参考文献
[1] 张磊, 夏勇. 姜黄素对大鼠颈总动脉球囊损伤后血管内膜增生的影响[J]. 中国现代医药杂志, 2015, 44(05): 19-22.
[2] 戴凌燕, 程碧环, 李军. 姜黄素对大鼠脑缺血-再灌注损伤的影响及机制[J]. 中药材, 2015, 13(02): 142-147.
[3] 王笑音. 姜黄素对大鼠脊髓损伤后神经元GAP-43表达变化的影响[J]. 中外医学研究, 2018, 54(5): 171-172.
[4] 程大艳, 吴美平. 血管平滑肌细胞表型对动脉硬化类疾病的影响[J]. 现代中西医结合杂志, 2018, 13(1): 1474-1478.
[5] 郭梦凡, 王彩霞, 刁为英等. 姜黄素对创伤性脑损伤大鼠凋亡因子表达的影响[J]. 齐齐哈尔医学院学报, 2015, 382(36): 7-8.
通信作者:张晓惠,主治医师,E-mail:qujianbo@163.com