散养鸡马立克氏病的诊断

张梦琳，段淇凡，陈立保，丁 芳，常建光，陈立功⋆，王学静⋆，刘聚祥，樊宝良，王丽娟

（1.河北农业大学动物医学院 071001；2.河北省畜牧兽医研究所 071000；3.河北农业大学动物科技学院 071001；4.河北省农业农村厅 050000）

马立克氏病（Marek，s disease，MD）是鸡的一种常见的淋巴细胞增生性疾病， 病原为α 疱疹病毒亚科Mardivirus 属的马立克氏病病毒（Marek，s disease virus，MDV）[1]，该病的病理特征为多种组织器官发生淋巴性瘤细胞浸润和形成肿瘤[2]。 20 世纪70年代我国鸡群发现该病，由CVI988 株、FC126 等毒株生产的MD疫苗投入生产以后， 该病在集约化养鸡场的流行得到了有效地控制。 近年来，散养鸡群发生MD 或白血病等肿瘤性疾病相对较多，给散养鸡养殖造成了较大的经济损失。

2019 年10 月，河北某地散养的公鸡，自80 日龄开始发病，病鸡表现采食量下降、消瘦、零星死亡，主要病理变化特征为腺胃、肝脏、脾脏等内脏器官肿大或有结节出现。 根据病理学诊断及PCR 检测结果，综合诊断送检病鸡为内脏型MD，该结果为鸡场尽早采取相应措施提供了参考依据。

1 发病情况

主诉该批散养公鸡共3000 只，购入时为6 周龄，饲养至80日龄时开始发病，主要表现采食量下降、消瘦、零星死亡。 发病后曾先后找基层兽医就诊， 按大肠杆菌病和传染性腺胃炎等疾病进行治疗，结果均未见明显疗效，至送检时已淘汰300 只左右。

2 临床症状观察

病鸡多表现精神萎靡，不喜活动，鸡冠发育不良，个体瘦弱。

3 病理学诊断

3.1 病理剖检变化

外部检查后，对送检鸡进行内部检查，观察、记录体表及内部器官的肉眼病变。 送检病鸡体重偏小、胸肌菲薄。 腺胃体积明显变大，腺胃壁增厚、质地变硬、腺胃乳头肿大或黏膜见出血和溃疡（2/5）；肝脏体积增大，表面和切面散在小米大至粟粒大小、灰白色结节（3/5）；脾脏明显肿大，表面和切面见大小不一灰白色组织浸润（3/5）；肾脏肿大，局部呈灰白色（2/5）；胸腺萎缩。 眼睛、皮肤、坐骨神经及其他内脏无肉眼可见病变。

3.2 组织学变化

采集送检鸡的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、腺胃、肾脏等器官，经3.7%甲醛溶液固定24h 以上，上述器官按常规制作石蜡切片，H.E 染色，用光学显微镜观察组织学变化。 镜检可见腺胃、肝脏、脾脏和肾脏中有肿瘤细胞浸润，肿瘤细胞为大、中、小淋巴样细胞、 成淋巴细胞及马立克氏病细胞。 心脏等器官未见组织学变化。

4 PCR 检测

无菌操作采取送检病鸡肝脏、脾脏等，加入适量灭菌生理盐水经研磨、匀浆、离心取上清液，按常规进行病毒核酸(DNA 和RNA) 的提取。 按照文献方法分别进行MDV 和禽白血病病毒的PCR 检测。 电泳结果显示，送检鸡仅为MDV 阳性（图1）。

5 小结与讨论

图1 MDV PCR 产物电泳结果

临床上，MD 有神经型、内脏型、眼型和皮肤型4 种致病型。MDV 多侵害坐骨神经等外周神经，引发神经型MD，病鸡多呈“劈叉”姿势，有时表现为翅膀下垂等。 内脏型MD 病鸡主要表现为心脏、肝脏、脾脏、肾脏等的肿瘤病灶。 眼型MD 病鸡主要表现为瞳孔缩小，甚至呈针尖大小，虹膜呈斑点状或者环状，且边缘不整齐，逐渐从正常的桔红色变成弥漫性的灰白色，如同“鱼眼状”。 皮肤型MD 病鸡可见皮肤毛囊的小结节或者瘤状物。 MD肿瘤细胞在组织学上有其特有的形态， 即大小不等的淋巴样细胞和变性的成淋巴细胞。 因此，通过病理组织学观察，肿瘤细胞符合上述描述特点，即可明确诊断。 根据病理学诊断和PCR 检测结果，可判定送检散养公鸡属于内脏型MD 病例。

据养殖户反映， 该批次公鸡出壳时未接种MDV 疫苗。 因此， 建议散养鸡养殖过程中应购买已接种MD 疫苗的鸡只。 此外， 养殖过程中还要注意接种MD 疫苗鸡只仍可能出现免疫失败。 MD 免疫失败的原因包括：MDV 早期感染；传染性法氏囊病病毒、鸡传染性贫血病毒等引发的免疫抑制；超强毒力MDV 感染；疫苗方面因素，如疫苗运输、保藏和使用不当等。 目前，必须采取规范使用疫苗、加强生物安全管理等综合性措施，才能减少该病的发生。