儿童血常规标本室温保存时间对结果影响的分析

廖旺 黄卫彤 韦淑玉

（南宁市妇幼保健院检验科 广西 南宁 530011）

随着医疗体系的改革和发展，检验质量在医疗活动中日趋重要，导致血常规检查出现误差的因素相对较多，按影响因素的高低可分为送检时间过长、保存不当、采集时间不合理、抗凝剂浓度不合格、受检者自身因素[1]。由于各医院的实验室质量管理和技术水平不一样，一些医院对标本采集人员和送检相关人员的培训过少或者培训不到位，导致标本送检时间过长而影响到检验结果。同时有些检验人员接收标本后不及时检测或由于工作量太大而无法及时检测最终影响到检验结果。CNASCL01:2006《检测和校准实验室能力认可准则》(ISO/IEC17025:2005)和《实验室资质认定评审准则》要求实验室为确保检测结果的准确可靠应采取一定的措施控制,如通过人员间比对、实验室间比对、留样再测等方法进行控制,确保实验室检测能力。其中留样再测是考核实验室能力较为常用、便捷的方式。留样再测又称留样试验,主要用于监视检测结果的复现性,包含了对整个检测过程(人员、环境、设备)的监视[2]。为了探讨血常规标本检测后室温保存4-8 小时是否适合进行留样再测，我们用Sysmex XN-10 血细胞分析仪在标本检测后室温保存4 ～8 小时内，连续每小时检测1次，动态观察（WBC）、红细胞（RBC）、血红蛋白（HGB）、红细胞压积（HCT）、红细胞平均体积（MCV）、红细胞平均血红蛋白含量（MCH）、红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC）、血小板（PLT）结果变化规律。

1.资料与方法

1.1 仪器和试剂

sysmex XN-10 血细胞分析仪及原装配套试剂，实验前检测质控物在控范围。

1.2 标本

50 份门诊健康儿童（3 ～7 岁）EDTA-K2 抗凝的静脉血。

1.3 方法

用EDTA-K2 抗凝管抽取50 例门诊健康儿童（3 ～7 岁）静脉血，每份各2ml，充分混匀，1 小时内在sysmex XN-10 血细胞分析仪上进行检测1 次，然后放置室温，分别在4h、5h、6h、7h、8h 时进行测定，测定前充分混匀。

1.4 统计学处理

采用SPSS17.0 对本次研究数据进行分析，计量资料（±s）表示，行t检验，计数资料（%）表示，行卡方检验，以P＜0.05表示差异有统计意义。

2.1 结果

2.1 红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC）在≥4h 时检测时，结果随时间的增加明显下降，结果与1 小时检测结果比较有明显差异（P＜0.05）。白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血红蛋白（HGB）、红细胞平均血红蛋白含量（MCH）、血小板（PLT）在8h 内检测结果与1 小时检测结果比较无明显变化，差异无统计意义（P＞0.05）。红细胞压积（HCT）和红细胞平均体积（MCV）在8h 内检测结果，虽然与1 小时检测结果比较不明显，差异无统计意义（P＞0.05），但随着时间的增加它们的结果呈逐渐上升趋势。标本室温放置检测结果随时间产生的变化结果见表1、2、3、4。

表1 标本室温放置WBC、RBC、HGB 和HCT 结果随时间产生的变化（±s）

表1 标本室温放置WBC、RBC、HGB 和HCT 结果随时间产生的变化（±s）

时间 WBC(×109/L) RBC(×1012/L) HGB(g/L) HCT(%)＜1h 8.00±1.73 4.56±0.31 122.48±6.41 36.67±1.91 4h 8.06±1.78 4.54±0.31 122.08±6.55 36.91±1.94 5h 8.05±1.76 4.55±0.30 122.40±6.63 37.08±1.96 6h 8.06±1.76 4.55±0.31 122.50±6.68 37.11±1.95 7h 8.06±1.75 4.54±0.31 122.56±6.44 37.20±1.92 8h 8.07±1.77 4.54±0.32 122.52±6.52 37.33±2.00

表2 标本室温放置MCV、MCH、MCHC 和PLT 结果随时间产生的变化（±s）

表2 标本室温放置MCV、MCH、MCHC 和PLT 结果随时间产生的变化（±s）

时间 MCV(fl) MCH(pg) MCHC(g/L) PLT(×109/L)＜1h 80.60±4.32 26.93±1.72 334.12±8.75 308.12±45.77 4h 81.43±4.47 26.95±1.76 330.78±8.69 323.54±48.01 5h 81.61±4.50 26.95±1.72 329.92±8.69 323.78±46.05 6h 81.83±4.54 27.03±1.73 329.78±8.09 323.12±45.91 7h 82.11±4.60 27.07±1.73 329.66±8.44 321.60±44.89 8h 82.37±4.63 27.05±1.74 328.30±7.66 320.30±47.78

表3 WBC、RBC、HGB 和HCT1h 结果与其他小时结果显著性（P 值）的变化

表4 MCV、MCH、MCHC 和PLT1h 结果与其他小时结果显著性（P 值）的变化

3.讨论

本研究表明，儿童静脉血在室温放置8h 时内，在血常规检验8 个项目（WBC、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、PLT）中，对WBC、RBC、HGB、MCH、PLT 检测结果的影响最小；而HCT和MCV 放置时间越长，其检测结果会逐渐升高，虽然差异无统计意义，但已出现逐渐上升趋势；对MCHC 检测结果的影响最大，随着保存时间的增加结果会明显下降。出现这情况主要是因为EDTA 盐属氨羧螯合剂，其机制是通过与水中的Ca2+形成稳定的螯合物而阻止血液的凝固，静脉血标本静置导致细胞分层，分层的细胞产生不同的代谢产物，都产生了自己渗透压和PH值[3]。当标本血细胞处于高渗环境时，就会使其渗透压不断升高，当血液在检测过程中遇到渗透压比较低的稀释液时，RBC 就会有水分流入，从而导致MCV 不断增大，就会导致HCT 随之升高，而使MCHC 不断降低[4]。由于sysmex 血细胞分析仪XN-10 检测原理中MCHC 不是由仪器直接检测所得而是根据HGB 与HCT 计算得来，有报道显示HGB 在室温下可稳定数日[5]，因此影响MCHC 的结果主要是HCT，MCHC 结果就随着HCT 上升结果越高其浓度值下降越明显。因此，血常规标本采集4 小后，不适合做实验室间比对、留样再测。在艾卫军[4]等82 例健康成人全血标本保存时间和温度对血常规检测结果的影响分析、蒋蓉蓉[6]等的30 门诊患者不同温度和时间对血细胞参数的影响和丁颖[7]等的血液保存温度和时间对激光法检测红细胞系统参数的影响的研究中，≤8h 时MCHC 的检测结果均无显著变化，但本研究MCHC 的检测结果在4h时已经发生明显变化。由于本研究对象为儿童，然而他们研究对象为成人，因此认为儿童静脉血MCHC 检测结果比成人更容易随时间的增加而产生影响。因此在日常工作中当标本量过大时，不能及时检测时，应注意根据不同年龄标本建立合理的保存方法，保证检测结果的准确性。当怀疑首次检测结果准确性或仪器故障维修后需要进行留样再测进行验证时，选择标本时应考虑标本保存时间和年龄因素，否则会影响检测结果。