血液常见炎症标志物用于甲型流感病毒感染的预测价值分析

刘松坚 郑少燕 黄茜

流行性感冒是由流感病毒引起的急性传染性呼吸道疾病，它在易感人群中能迅速传播，特别是在季节性流行或在暴发、流行和少见的大流行中，其发病率和发病的严重程度均不一致[1]，并且由于住院人数增加而造成了相当大的经济负担[2]。人流感病毒是正粘病毒科的成员，只有甲型流感病毒(IVA)和乙型流感病毒(甲流和乙流)具有流行病学意义[2]，以IVA危害为最大。因此，快速识别高灵敏度和高特异度的生物标志物，并将其用于IVA的辅助诊断成为临床医师研究的热点。血常规中包含了若干的炎症标志物，其获取方便、快捷，成为临床医生常用的辅助诊断手段之一，我院将血细胞计数的检测用于IVA的辅助诊疗中，取得了较为理想的效果，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 IVA的诊断标准 IVA的诊断参照《流行性感冒诊疗方案(2018年版修订版)》[3]，纳入标准：有畏寒、发热(体温≥38 ℃)、头痛、肌痛等局部临床症状；伴食欲减退、乏力、全身肌肉关节酸痛等全身症状；IVA抗原检测阳性。排除标准：既往慢性肺部疾病史；非IVA引起的呼吸道病毒感染。

1.2 病毒组和健康对照组的纳入 按照上述的诊断标准和排除标准纳入病毒组作为病例组，选择同期在我院进行健康体检的人群作为空白对照。另选择有畏寒、发热等流感样症状，但IVA抗原检测阴性的人作为第二组对照。三组研究对象在年龄和性别上具有同质性，差异无统计学意义。

1.3 实验室检测 对纳入的所有研究对象，采集外周血，对血样进行血常规的检测，血常规中的检测采用希森美康的XN-1000血球仪；白细胞计数(WBC)的参考值范围为(4～10)×109/L；单核细胞数目(MO)的参考值范围为(0.12～1.0)×109/L；单核细胞比率(MO%)的参考值范围为3%～10%；中性粒细胞数目(NE)的参考值范围为(2～7)×109/L；中性粒细胞比率(NE%)的参考值范围为31%～40%；平均血小板体积(MPV)的参考值范围为9.1～12.0 fL；血小板数目(PLT)的参考值范围为(100～300)×109/L。IVA抗原检测采用金标法，试剂和仪器来自广州万孚生物技术股份有限公司。所有的血样在抽血后半小时内上机，仪器在检测样本前均进行定标，样本的变异系数在可控范围内，确保检验质量。

1.4 统计学分析 采用SPSS 23.0进行统计分析，采用F检验对年龄进行统计分析，WBC、MO、MO%、NE、NE%、MPV、PLT和MPV/PLT的比较，采用非参数检验的Kruskal-Wallis H检验方法进行统计分析，数值以四分位间距(P25，P75)表示，卡方检验对纳入研究对象的性别进行统计分析，使用受试者工作特征曲线(ROC)比较WBC、MO、MO%、NE、NE%、MPV和MPV/PLT的诊断效能，以曲线下面积(AUC)判断诊断效果，所有的检验结果以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般人口学结果 本研究纳入了空白对照140例为对照组，平均年龄(52.82±12.33)岁，经临床诊断为IVA的研究对象142例为IVA组，平均年龄(55.32±13.11)岁，IVA阴性组155例，平均年龄(54.51±13.93)岁，三组年龄差异无统计学意义(F值1.91，P值0.149)。对照组男86例(61.4%)，IVA组男71例(50.0%)，IVA阴性组男84例(54.2%)，三组性别比较差异无统计学意义(P＝0.149)。

2.2 三组感染指标的比较 IVA组的MO、MO%、NE% 、MPV 和MPV/PLT 在 三 组 中 为 最 高(P＜0.001)，IVA阴性组的NE在三组中最高(P＜0.001)，PLT在IVA组为最低(P＜0.001)，见表1。

表1 三组感染指标的比较

2.3 炎症标志物的诊断效能分析 WBC诊断IVA的截断值为5.48×109/L，其灵敏度和特异度分别为85.2%和30.3%，其诊断IVA的AUC为0.504。MO%诊断IVA的截断值为7.07%，其灵敏度和特异度分别为71.8%和83.2%，其诊断IVA的AUC为0.815。MPV诊断IVA的截断值为10.45 fL，其AUC为0.828，其灵敏度和特异度为64.1%和87.7%，约登指数为0.518。MPV/PLT诊断IVA的截断值为0.05，其AUC为0.933，其灵敏度和特异度达78.9%和92.3%，约登指数为0.712，见表2，见图1。

续表1 三组感染指标的比较

表2 炎症标志物对IVA的诊断效能比较

图1 炎症标志物诊断IVA的ROC曲线

3 讨论

正常情况下流行性感冒是一种发病程度相对较轻的呼吸道感染疾病，其发病率高，死亡率低。但在人口基数大的情况下，死亡总数亦不容忽视，IVA病死率较高的人群为婴幼儿、老年人或免疫抑制人群[4-5]。由于轻度至中度流感的临床表现与其他呼吸道病毒引起的流感样症状类似，因而必须进行实验室检测才能确诊。RT-PCR、病毒分离和培养、病毒抗原快速检测和血清抗体检测等检测方法均可以诊断IVA[6-8]，但在基础条件较差的基层或社区医院，上述检测无法进行。若无法快速诊断或排除IVA感染，对传染病的疾病预防和控制传播方面将会造成很大的困扰。在此情况下，如何快速对识别宿主反应的生物标志物进行检测是一个急需解决的问题，而利用常规检测方法对IVA进行辅助诊断最为常见，其具有重要意义。

本研究基于使用常规检测方法对IVA进行快速辅助诊断，以期在等待出具病毒抗原检测结果前能对出现流感样症状的患者进行IVA的辅助诊断和鉴别诊断。由于血细胞计数分析在评估感染性炎症反应疾病中具有简单、有效、快速的效果，因此是该类疾病辅助诊断的实验室基础。本研究发现，由于IVA感染，许多血液学参数都发生了显著变化，如WBC、MO、MO%、NE、NE%、PLT、MPV等。流感病毒感染导致NE增加，而PLT下降，这与其他常见病毒(如腺病毒、呼吸道合胞病毒、EB病毒、人疱疹病毒6型和肠道病毒)引起的变化不同[9-12]。

本研究结果表明，MO、MO%、MPV、MPV/PLT均可以帮助诊断和鉴别诊断IVA。本研究中，IVA患者的PLT显著低于对照组和IVA阴性组，表明降低的PLT计数可将流感病毒感染与其他感染区分开。此外，有研究显示，在流感患者完全治愈的同时，PLT计数可恢复到正常水平[13]，这表明流感病毒对血小板的过度活化可能导致血小板计数明显低于其他呼吸道病毒感染的PLT计数降低，可能为流感病毒诱导血小板抑制导致[14]。本研究与上述研究的结果显示PLT计数在流感实验室诊断中具有高度相关性和特异性。

本研究在IVA组观察到PLT计数显著低于IVA阴性组和对照组，且与使用MO、MO%和MPV相比，单独使用MPV/PLT的诊断价值更高。ROC曲线表明，MPV/PLT诊断IVA的截断值为0.05，其AUC为0.933，其灵敏度和特异度达78.9%和92.3%，约登指数为0.712，表明MPV/PLT的比值在大于0.05时对流感病毒的辅助诊断具有鉴别意义。另一项研究显示，如果使用IVA 阴性组作为参考，MPV/PLT的最佳敏感性和特异性分别为73.82%和50.68%，且该项研究结果表明，当MPV/PLT值高于0.040，则可能预测儿童患有IVA[14]。文献显示，IVA结合上皮细胞的唾液酸受体后，病毒通过内吞复制并传播至其他细胞，刺激细胞释放细胞因子，并促进炎症因子在炎症部位聚集并可诱导不受控制的血小板活化，导致巨核细胞形成的破坏和PLT循环时间的缩短，导致MPV增大且PLT计数减少，同时，病毒会产生一些分子，导致PLT黏附和聚集，形成循环复合物并加剧PLT的降低[15]，最终观察到MPV/PLT比值处于0.05或更高数值时，能较好预测机体处于IVA感染的状态，但详细的机制可能很复杂，因此将来有必要进一步研究以确认这些关联。

综上所述，人体感染流感病毒尤其是IVA后，通过炎症反应促进导致PLT黏附和聚集，形成循环复合物并加剧PLT的降低，最终观察到MPV/PLT比值增加，当MPV/PLT比值处于0.05或更高数值时，能较好预测机体处于IVA感染的状态，是IVA流行期间临床医师常用的炎症标志物，可用于辅助诊断IVA的发生和判断疾病的病情。