NUSAP1 蛋白对非小细胞肺癌生存状况影响的分析

吴忠荣 ，刘福莉 ，武艳 ，宋玉

（1.河北省黄骅市人民医院，黄骅 061100；2.河北医科大学第一医院，石家庄 050031）

非小细胞肺癌是常见的恶性肿瘤疾病之一，患者发病后有较高的病死率， 严重影响患者的身体健康，且患者预后效果一般较差，目前关于非小细胞肺癌患者预后的研究报道较多， 但是分析其对非小细胞肺癌患者生存状况的研究报道较少[1,2]。NUSAP1 蛋白是一种DNA 和微管结合蛋白， 其在维护细胞周期的正常运作中对蛋白进行调控，在细胞周期中起重要作用[3]。 目前NUSAP1 蛋白在多种恶性肿瘤患者预后中呈高表达。 本次研究探讨NUSAP1 蛋白对非小细胞肺癌患者生存状况的具体影响， 为临床医师改善非小细胞肺癌患者生存状况提供参考，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取 2016 年 2 月-2019 年 2 月于我院接受治疗的68 例非小细胞肺癌患者的癌组织标本, 根据患者NUSAP1 蛋白表达量分为高NUSAP1 蛋白表达组和低NUSAP1 蛋白表达组。高NUSAP1 蛋白表达组 36 例，男 23 例，女 13 例；病程范围 6 个月-28 个月，平均病程（17.63±3.16）月；年龄范围 30-63 岁，平均年龄（51.37±5.44）岁。 低NUSAP1 蛋白表达组 32 例，男 21 例，女 11 例；病程范围 7 个月-30 个月，平均病程（18.43±3.59）个月；年龄范围 29-64 岁，平均年龄（5081±4.93）岁。纳入标准：⑴患者符合非小细胞肺癌的《中国表皮生长因子受体基因敏感性突变和间变淋巴瘤激酶融合基因阳性非小细胞肺癌诊断治疗指南（2015版）》[4]相关诊断标准并确诊；⑵患者年龄在18-65岁之间；⑶患者术前均未接受其他治疗方案。 排除标准：⑴患者合并其他恶性肿瘤疾病；⑵患者样本采集前有全身性感染疾病；⑶分娩期、哺乳期或者妊娠期妇女。 本次研究经医院伦理委员会审核通过，符合相关伦理标准。

1.2 方法

1.2.1 荧光定量PCR 检测方法 提取组织总DNA后采用反转录法转录为cDNA， 将cDNA 作为模板。 预变性 94℃，操作 5min；变性 95℃，操作 50s；退火 60℃，操作 40s；扩增 70℃，操作 40s；上述操作共进行30 个循环；实验共进行3 次。

1.2.2 免疫组化检测方法 样本组织行切片、脱蜡、水化后行抗原修复操作， 对样本组织进行染色，操作过程严格按照检测试剂盒说明书进行。将磷酸盐缓冲液作为对照，根据阳性染色强度和染色细胞比例作为判断NUSAP1 蛋白的标准。 染色强度：棕褐色 3 分、棕黄色 2 分、黄色 1 分、无着色 0 分；阳性细胞比例大于75%为4 分， 阳性细胞比例51%-75%是3 分，阳性细胞比例26%-50%是2 分，阳性细胞比例5%-25%是1 分，阳性细胞比例小于5%为0 分；两项乘积≥5 分为NUSAP1 蛋白高表达，＜5 分为NUSAP1 蛋白低表达。

1.2.3 统计学处理 应用SPSS24.0 软件对研究数据进行统计学处理， 两组计量结果比较采用t 检验，计数资料比较用χ2检验，有统计学意义的相关因素行多因素logistic 回归分析，P＜0.05 表示为对比差异有统计学意义。

2 结果

2.1 非小细胞肺癌患者临床资料比较 非小细胞肺癌患者男性44 例占比64.71%，女性24 例占比35.29%；年龄≤60 岁22 例占比32.35%，有淋巴结转移39 例占比 57.35%， 肿瘤直径≤3cm 有 19 例占比27.94%，TNM 分期Ⅰ期31 例占比45.59%， Ⅱ~Ⅳ期37 例占比54.41%。 见表1。

表1 非小细胞肺癌患者临床资料特征

2.2 非小细胞肺癌患者NUSAP1 蛋白高表达与临床病理特征的单因素分析 单因素分析结果显示，不同组织分型、病理分级、临床分期、化疗、长期吸烟史的非小细胞肺癌者NUSAP1 蛋白高表达率差异有统计学意义（P＜0.05）。 见表 2。

表2 非小细胞肺癌患者NUSAP1蛋白高表达与临床病理特征的单因素分析(%)

2.3 影响非小细胞肺癌生存状况的多因素logistic回归分析 多因素logistic 回归分析结果显示，淋巴结转移、 肿瘤直径、TNM 分期、 长期吸烟史、NUSAP1 蛋白是影响非小细胞肺癌患者生存状况的独立危险因素（P＜0.05）。 见表 3。

3 讨论

非小细胞肺癌是呼吸系统主要恶性肿瘤疾病之一，由于其具有高发病率和高病死率，因此已经成为危害人类健康的公共安全卫生问题之一，临床学者对非小细胞肺癌的关注度也不断深入[5,6]。分子生物学研究的开展使潜在分子靶点和分子标志物用于非小细胞肺癌的治疗成为可能， 其中NUSAP1 蛋白在参与细胞有丝分裂期间的纺锤体组装以及维持细胞周期的正常运作中起到重要的作用[7,8]。 临床学者[9,10]认为 NUSAP1 蛋白在乳腺癌、肝癌等恶性肿瘤中表达量出现异常， 而NUSAP1蛋白会影响恶性肿瘤细胞的增殖和侵袭， 并影响患者的预后。NUSAP1 蛋白在纺锤体装配中具有关键性作用，且在细胞增殖过程中具有特异性，而恶性肿瘤细胞进展过程中有丝分裂失调是常见的临床特征， 同时NUSAP1 蛋白的过度表达会导致机体纺锤体微管发生深度捆绑反应， 进一步影响恶性肿瘤的发生和发展[11,12]。 有临床学者[13]在研究中发现NUSAP1 蛋白参与了细胞癌细胞中的上调和表达， 另外通过对NUSAP1 蛋白进行下调能够组止恶性细胞的增殖， 从而起到治疗恶性肿瘤患者的效果。 本次研究探讨NUSAP1 蛋白对非小细胞肺癌患者生存状况的影响， 为临床医师改善非小细胞肺癌患者生存状况提供参考。

表3 影响非小细胞肺癌生存状况的多因素logistic回归分析

NUSAP1 蛋白表达量升高会使恶性肿瘤中的细胞核内微管聚集并进一步导致机体恶性肿瘤细胞的周期发生停滞， 而当NUSAP1 蛋白表达量明显下降后则会影响细胞纺锤体形成异常， 并使胞质分类发生异常[14]。 单因素分析结果显示，组织分型、 病理分级、 临床分期、 化疗、 长期吸烟史NUSAP1 蛋白高表达率差异有统计学意义 （P＜0.05），可能原因是NUSAP1 蛋白可能参与了机体恶性肿瘤形成的过程， 且有可能能够成为高选择性化疗靶点的一种； 另外当NUSAP1 蛋白表达量显著升高时癌旁组织的NUSAP1 蛋白表达量会出现一定的变异， 另外NUSAP1 蛋白表达量过高与恶性肿瘤的早期复发以及侵袭性的发生具有密切的相关性。多因素logistic 回归分析结果显示，淋巴结转移、肿瘤直径、TNM 分期、长期吸烟史、NUSAP1蛋白是影响非小细胞肺癌患者生存状况的独立危险因素（P＜0.05），可能原因是 NUSAP1 蛋白能够调节部分细胞因子并对恶性肿瘤的迁移、增殖、侵袭造成影响和抑制，并增强化疗药物的敏感性[15]。

综上所述， 非小细胞肺癌患者NUSAP1 蛋白表达较高， 不同临床病理特征非小细胞肺癌患者NUSAP1 蛋白高表达率存在差异，同时NUSAP1 蛋白是影响非小细胞肺癌患者生存状况的独立危险因素， 临床医师可以根据患者NUSAP1 蛋白表达量给予治疗方案，改善患者生存状况。