一起信鸽支原体感染的诊断与治疗

龚翔

(云南省种羊繁育推广中心，云南 寻甸 655200)

支原体又称霉形体，属于柔膜体纲，天然无细胞壁，所以细胞柔软，高度多形性，可通过200～450 nm孔径的滤膜。革兰染色阴性(呈红色)，姬姆萨染色呈淡紫色。常见多种支原体以隐性方式污染细胞培养物。多数支原体的生长需要平面分子胆固醇，且生长缓慢[1]。

支原体常引起动物呼吸系统疾病(鼻肺炎)、关节炎、乳腺炎或角膜结膜炎，耐过动物有坚强的免疫力。

鸽子支原体病和鸡支原体病属于同种类型，都是禽支原体，引起鸽子的疾病称鸽慢性呼吸道病，主要引起鸽子呼吸道症状，一般呈群发性，传播迅速，病原体会在鸽群中存在很长时间。发病的鸽子通常表现出流鼻涕，鼻孔粘有鼻痂，呼吸道啰音，生长速度减慢，饲养周期延长，造成残疾鸽子和次级鸽子数量增多而影响养鸽收益。该病主要发生在秋冬、冬春寒冷季节，阴雨季节也常多发，鸽舍通风不良、空气污浊是诱发该病的主要因素[2-4]。该病可感染不同日龄的鸽子，主要危害乳鸽、幼鸽，种蛋带菌是乳鸽发病率升高的主要因素，尤其新发病的种鸽产的种蛋带菌率极高，疾病的传播也极为迅速，病原体通过胚胎传给乳鸽，使该病在鸽群中快速传播[5-8]，造成巨大的经济损失。

支原体病的主要传染源是带病的鸽子和隐性感染该病的鸽子，被病原污染的饲料、饮水、器械、空气等也是该疾病的传染源。该病的传播方式比较广泛，主要以水平和垂直传播为主。水平传播可以是飞沫、空气、食入或吸入等传播方式；垂直主要是通过种蛋传播[9-11]。

2019年11月，昆明市某信鸽养殖场鸽群中部分鸽子出现呼吸困难、咳嗽、被毛蓬乱、精神沉郁、甩头、观星等症状，并有大量鸽子死亡。采集病料样本进行实验室检测分析，确诊后提供切实可行的治疗方案，现将病例介绍如下，供同行参考。

1 材料与方法

1.1 样品采集处理

在昆明市某信鸽养殖场3 000只鸽子中采集了7只发病鸽子的喉气管和肺脏。用手术剪剪碎采集的喉气管及肺脏，取剪碎样品0.02 g在研钵中研磨1～2 min，加入1.5 mL生理盐水继续研磨，研磨液转移到2 mL灭菌离心管中。

1.2 主要试剂仪器

核酸提取试剂盒购自云南晨绿生物科技有限公司，Buffer、Mix、Taq DNA 聚合酶、ddH2O购自大连宝生物有限公司。普通 PCR 仪(T100TM Thermal Cycler)，稳压稳流电泳仪(DYY-31A)，全自动凝胶成像仪(ChampGel 6000)。

2 诊断方法

2.1 临床解剖观察

对发病鸽群进行临床观察，然后选临床症状具有代表性的鸽子，按常规方法进行解剖观察并记录。

2.2 实验室检测

按照核酸提取试剂盒说明书提取喉气管及肺脏研磨液核酸。参考文献[12]合成的支原体检测引物，以提取的基因组作为模板进行PCR检测。支原体PCR体系: Mix 12.5 μL,ddH2O 10.5 μL，上、下游引物各0.5 μL，DNA 模板1 μL，总反应体系为25 μL。反应条件均为:预变性95 ℃ 5 min,后进行 95 ℃ 15 s、54 ℃ 30 s、72 ℃ 60 s,30个循环；72 ℃ 10 min。反应结束后取5 μL扩增产物进行1.0%琼脂糖凝胶电泳,在凝胶成像系统上观察结果并拍照。

3 结果

3.1 剖检结果

临床观察发现发病鸽子的眼部分泌物增多，充满干酪样物，眼睑粘连已经造成失明；喉头、鼻腔和气管内有乳白色和黄色的黏性分泌物，肺脏表面有一层略带黄色的膜状物。

3.2 实验室检测结果

1—7号发病鸽子样品实验室PCR检测结果均出现条带(497 bp)，与阳性对照大小一致(图1)，支原体阳性。

1—7.检测样品；+.阳性对照；-.阴性对照；M.MDL-2000的Marker。

由临床剖检结果及PCR检测结果可确诊该养殖场的鸽子发病及死亡原因主要是支原体感染。

3.3 治疗方案及效果

泰乐菌素和多西环素混饮、混饲，连用5 d，同时以中药方剂白术150 g、茯苓100 g、山药150 g、车前草20 g、生姜50 g、桂枝30 g熬汤加入饮水中，连喂14 d，同时加强养殖场日常消毒及饲养管理。该养殖场的鸽子病情得到了很好的控制，发病的鸽子病情已经稳定并趋于好转，未发病的鸽子不再出现症状。

4 讨论

畜禽支原体病主要以呼吸道感染为主，临床治疗应该以清热解毒、清热燥湿及祛风杀虫为主[12]。在选择泰乐菌素和多西环素这类对支原体有效的大环内酯类药物混饮、混饲的同时，又增加了中药方剂白术150 g、茯苓100 g、山药150 g、车前草20 g、生姜50 g、桂枝30 g熬汤加入饮水中。

泰乐菌素和多西环素是主要抗支原体的药物，其余为辅助治疗，主要是增强机体的抗病能力[13]。泰乐菌素的主要作用是治疗和预防由支原体引起的各种呼吸道、肠道感染；多西环素主要用于革兰阳性菌和革兰阴性杆菌引起的上呼吸道感染、支原体肺炎等；白术主要有健脾益气、燥湿利水、和胃的功效；茯苓主要是利水渗湿，健脾；山药主要是益气养阴，对脾、肺、肾均有滋补作用，还能固精；车前草主要有利尿、清热、明目、祛痰的功效；生姜能够增进食欲、驱寒，还具有发汗的功效；桂枝主要促进出汗、利尿。这些药物中，多西环素和泰乐菌素主要是从西医学的角度进行治疗；中药方剂中的健胃、益气类药物主要是为了增强动物体自身抗病能力，利尿、泻下、发汗类主要是为了促进瘀积在动物体内的毒素排出[14]。