胃泌素释放前体、神经元特异性烯醇化酶和癌胚抗原在小细胞肺癌中的诊断价值

赵宝祥，李华，张亚君，王雪辉，尹志永

秦皇岛市第二医院检验科，河北 秦皇岛0666000

小细胞肺癌是肺癌中恶性程度最高的一类，具有病程进展快、易转移、临床预后差等特点[1]。目前，对小细胞肺癌患者尽早进行放疗和化疗能够显著改善患者的预后情况，因此对其早期诊断具有较为重要的临床意义[2]。然而，在无创诊断中，影像学诊断对小细胞肺癌的诊断效果较差。研究指出，血清肿瘤标志物在恶性肿瘤的诊断中灵敏度更高，具有费用低、创伤小等优点，癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）、神经元特异性烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE）、胃泌素释放前体（pro-gastrinreleasing peptide，ProGRP）等都是临床中常用的血清肿瘤标志物[3-4]。本研究旨在通过对比分析，探究血清ProGRP、NSE和CEA水平在小细胞肺癌诊断中的应用效果，并对临床价值进行分析，现报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取2016年1月至2018年12月秦皇岛市第二医院收治的100例小细胞肺癌患者为研究对象。纳入标准：①均经病理学检查，符合小细胞肺癌的诊断标准；②确诊后未进行任何治疗；③签署治疗研究知情同意书。排除标准：①同时存在其他系统原发性恶性肿瘤或转移瘤；②肝、肾功能不全；③无法配合完成所需检查。100例小细胞肺癌患者中，男性82例，女性18例，平均年龄（61.27±6.52）岁，局限期51例，广泛期49例。同时选取同期于秦皇岛市第二医院进行体检的健康人100例作为对照，其中男性61例，女性39例，平均年龄（56.36±6.58）岁。两组研究对象的年龄、性别比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经医院伦理委员会审批通过。

1.2 检测方法

1.2.1 血清ProGRP、NSE和CEA的检测方法 抽取小细胞肺癌患者开始治疗前以及对照人群晨起空腹静脉血5 ml，以4000 r/min低温离心15 min，收集上层血清，于-20℃冰箱保存，待所有样本收齐后进行统一检测。其中，血清NSE和CEA采用德国罗氏公司全自动电化学发光免疫分析仪进行检测，血清需要在冻存后进行复融，采用美国BioTek公司通用酶标仪进行检测。参考正常值：ProGRP＜37.7 pg/ml、NSE＜16.3 ng/ml、CEA＜5.0 ng/ml。

1.2.2 免疫组织化学检测方法[5]所有组织标本首先使用福尔马林进行固定，进行酒精、二甲苯脱水后石蜡包埋，5 mm切片连续切片6张。后取一张片进行苏木精-伊红（hematoxylin-eosin staining，HE）染色，作为病理学诊断依据。其余切片进行免疫组化染色，按照说明书进行，完成染色后由两位病理科医师进行视野观察，随机选取具有代表性的10个高倍视野，阳性标记为棕黄色颗粒，出现棕黄色颗粒沉淀为阳性（+），未染成棕黄色为阴性（-），免疫组化Syn的标记部位均位于细胞质内。

1.3 观察指标

①比较正常人群和小细胞肺癌患者血清肿瘤标志物水平。②比较血清ProGRP、NSE和CEA单项检测及三项联合检测对小细胞肺癌的诊断效能，以临床病理学检查为诊断金标准[6]，血清ProGRP、NSE和CEA以各项检测参考值为标准，超过正常参考值的患者为阳性（+），其余为阴性（-），三项联合检测中任意一项为阳性（+）即为阳性（+），计算单项检测和联合检测的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、总符合率以及Kappa值。其中灵敏度=真阳性例数（/真阳性+假阴性）例数×100%，特异度=真阴性例数（/真阴性+假阳性）例数×100%，阳性预测值=真阳性例数（/真阳性+假阳性）例数×100%，阴性预测值=真阴性例数/（真阴性+假阴性）例数×100%。③比较小细胞肺癌免疫组化指标Syn与血清ProGRP、NSE和CEA检测的诊断情况。④分析比较局限期与广泛期小细胞肺癌患者血清ProGRP、NSE和CEA水平。

1.4 统计学方法

采用SPSS 25.0软件对数据进行统计分析，计数资料以例数及率（%）表示，组间比较采用χ2检验；计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 健康人群和小细胞肺癌患者血清肿瘤标志物水平的比较

小细胞肺癌患者的血清ProGRP、NSE和CEA水平均明显高于健康人群，差异均有统计学意义（P＜0.01）。（表1）

表1 健康人群和小细胞肺癌患者血清肿瘤标志物水平的比较（±s）

表1 健康人群和小细胞肺癌患者血清肿瘤标志物水平的比较（±s）

组别健康人群组（n=100）小细胞肺癌组（n=100）t值ProGRP（pg/ml）29.57±8.46 975.37±638.25 14.817 NSE（ng/ml）11.12±6.46 38.93±26.47 10.207 CEA（ng/ml）1.85±1.29 13.58±24.62 4.758P值0.0000.0000.000

2.2 血清ProGRP、NSE和CEA单项检测及三项联合检测对小细胞肺癌的诊断效果

血清ProGRP和三项联合检测与实际检查结果一致性较好（Kappa值=0.818、0.827），三项联合检测与实际检测结果的总符合率最高，单项检测中，血清ProGRP的诊断灵敏度和总符合率最高。（表2）

表2 血清ProGRP、NSE和CEA单项检测及三项联合检测对小细胞肺癌的诊断效能

2.3 小细胞肺癌免疫组化指标Syn与血清ProGRP、NSE和CEA检测的诊断情况比较

以小细胞肺癌免疫组化Syn指标为参照，分别比较血清ProGRP、NSE和CEA指标的诊断效能。血清ProGRP检测与免疫组化Syn的符合率和一致性最高（符合率=94.00%，Kappa值=0.938）。（表3）

表3 血清ProGRP、NSE和CEA检测对小细胞肺癌的诊断结果与免疫组化指标Syn结果的对照

2.4 局限期与广泛期小细胞肺癌患者血清ProGRP、NSE和CEA水平的比较

广泛期小细胞肺癌患者血清ProGRP和NSE水平均明显高于局限期患者，差异均有统计学意义（P＜0.01）；广泛期和局限期小细胞肺癌患者血清CEA水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。（表4）

表4 局限期与广泛期小细胞肺癌患者血清ProGRP、NSE和CEA水平的比较（±s）

表4 局限期与广泛期小细胞肺癌患者血清ProGRP、NSE和CEA水平的比较（±s）

分期局限期（n=51）广泛期（n=49）t值P值513.38±427.43 1146.26±737.62 5.275 0.000 25.68±15.63 42.24±36.41 2.976 0.004 13.81±23.27 13.14±27.72 0.131 0.896 ProGRP（pg/ml）NSE（ng/ml）CEA（ng/ml）

3 讨论

随着环境的恶化以及人们生活方式的改变，肺癌的发病率逐年升高，其中，小细胞肺癌占所有肺癌的比例也呈升高趋势[7]。由于小细胞肺癌是肺癌中恶性程度最高的一类，使得对其进行早期诊断显得尤为重要，而目前临床对小细胞肺癌的主要诊断方法仍旧是病理学检查，无创早期诊断中影像学诊断效果并不理想，找寻一种可靠的早期诊断方式是目前临床中的研究重点[8-9]。在恶性肿瘤的发生发展中，肿瘤标志物是肿瘤细胞在生长过程中，机体分泌出的具有一定特异性的物质，与肿瘤的生长发育密切相关[10]。ProGRP、NSE和CEA都是临床中应用较多的肿瘤标志物，但其在小细胞肺癌中的诊断价值具有一定的争议[11]，本研究旨在通过对比分析，探究血清ProGRP、NSE和CEA检测诊断小细胞肺癌的效果，并分析临床价值。

本研究对比了健康人群和小细胞肺癌患者的ProGRP、NSE和CEA水平，结果显示，小细胞肺癌患者的血清ProGRP、NSE和CEA水平均明显高于健康人群，血清ProGRP、NSE和CEA是能够反映小细胞肺癌患者机体内肿瘤生长水平的指标，具有基础的诊断价值。对比病理检查结果发现，血清ProGRP和三项联合检测与病理检查结果一致性较好（Kappa=0.818、0.827），三项联合检测的诊断总符合率最高，单项检测中，血清ProGRP的诊断灵敏度和总符合率最高；与免疫组化结果比较发现，血清ProGRP指标与免疫组化指标Syn结果效能接近（总符合率=94.00%，Kappa值=0.938）。同时研究发现，广泛期小细胞肺癌患者血清ProGRP和NSE水平明显高于局限期患者，提示血清ProGRP和NSE指标对确定临床分期具有一定的参考价值。

本研究中，血清ProGRP是诊断价值最高的一个肿瘤标志物，其诊断小细胞肺癌的灵敏度和特异度均较高。既往研究也肯定了血清ProGRP检测在小细胞肺癌诊断中的作用，胃泌素释放肽（gastrin-releasing peptide，GRP）是参与肿瘤细胞生长的重要因子，其通过肿瘤细胞的自分泌或细胞间的旁分泌发挥作用，但既往研究发现，GRP的结构较不稳定，临床中难以检测其血清浓度[12-13]，但其前体ProGRP在血液中有稳定结构，能够反映GRP的浓度，是一个有效的检测指标，同时研究证实，小细胞肺癌中，GRP发挥着重要作用[14]。NSE是神经内分泌起源肿瘤中重要的作用因子，其在小细胞肺癌中的表达显著升高，也是既往临床中具有一定应用价值的检测因子[15]。而CEA作为非特异性肿瘤标志物，在多种肿瘤中的表达均有显著升高，同时，其在其他类型肺癌中的检测效果较好，但本研究发现，CEA对小细胞肺癌的诊断价值并不理想，这可能与其特异性有一定关系，与既往研究结果存在差异。

综上所述，血清ProGRP、NSE的检测效果优于CEA检测，三项指标联合检测能提高对小细胞肺癌的诊断效能。血清ProGRP在小细胞肺癌诊断中的效能与免疫组化Syn结果的检测效能一致，同时血清ProGRP、NSE的检测对临床分期具有一定诊断意义。