基于市售重楼饮片质量研究对重楼饮片标准的思考

贾天颖 高岩 王海丽 辛洁萍 白玉莹 王敏 韩婷 刘梦楠 李向日 林瑞超

摘要 目的：对重楼市售饮片进行基于性状鉴别、浸出物、含量测定等多方面分析，以期为重楼的质量评价和重楼饮片市场的良性发展提供数据支持。方法：建立了重楼饮片浸出物测定方法，采用热浸法测定其醇溶性浸出物，对重楼饮片炮制方法进行了研究，测定了重楼饮片外观性状及重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ含量。结果：重楼饮片浸出物含量之间的差异性较大，云南产地浸出物的平均含量略小于四川产地浸出物含量;市售重楼饮片大部分为厚片，少数为段，均不符合《中华人民共和国药典》（2015年版）“重楼”炮制项“切薄片”的规定;重楼饮片皂苷含量差异较大，四川产地重楼饮片皂苷含量略大于云南产地，多数重楼饮片所含皂苷以重楼皂苷Ⅰ，Ⅱ，Ⅶ为主，少数样品重楼皂苷Ⅵ含量较高，可能存在掺伪现象。结论：为保证临床使用需求及药效，建议《中华人民共和国药典》修订饮片炮制项、含量测定项，并补充性状项。

关键词 重楼饮片;质量研究;《中华人民共和国药典》;标准修订;炮制;含量测定;饮片性状

Abstract Objective：To conduct analysis based on character identification，extracts，content determination and other aspects of Chonglou′s commercially available Decoction pieces，with a view to providing data support for Chonglou′s quality evaluation and the benign development of Chonglou′s Decoction Pieces market.Methods：The determination method of extracts of Chonglou Decoction Pieces was established，and the alcohol-soluble extractives were determined by hot dip method.The processing method of Chonglou Decoction Pieces was studied.The appearance characteristics of Chonglou Decoction Pieces and Chonglou SaponinⅠ，Ⅱ，Ⅵ，Ⅶ content was determined.Results：The difference in extract content of Chonglou Decoction Pieces was large.The average content of extract from Yunnan origin was slightly smaller than that in Sichuan; the majority of commercially available Chonglou Decoction Pieces were thick tablets，and a few were segments，which were not in line with “Chonglou” item of cutting thin slices in The Pharmacopoeia of the People′s Republic of China（2015 edition）; the content of saponins in Chonglou Decoction Tablets is quite different，the content of saponins in Sichuan province is slightly larger than that in Yunnan，and saponins IN most of the tablets contained in Zhonglou Decoction were Chonglou saponins Ⅰ，Ⅱ，and Ⅶ.A few samples have a high content of Chonglou saponins VI，and adulteration may exist.Conclusion：In order to ensure the clinical use requirements and efficacy，it is recommended that in Chinese Pharmacopoeia we should revise the processing items and content determination items of decoction pieces，and supplement the trait items.

Keywords Chonglou Decoction Pieces; Quality Research; Chinese Pharmacopoeia; Standard revision; Processing; Content determination; Decoction characteristics

中图分类号：R283;R921.2文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2020.13.007

《中华人民共和国药典》（2015年版）规定重楼为百合科植物云南重楼Paris polyphylla Smith var.yunnanensis（Franch.）Hand.-Mazz.或七葉一枝花Paris polyphylla Smith var.chinensis（Franch.）Hara的干燥根茎[1]。重楼始载于汉代《神农本草经》，列为下品，其味苦，性微寒;有小毒，归肝经。主要用于惊痫，摇头弄舌，下三虫，去蛇毒等症[2]。其临床应用历史悠久，效果显著，具有抗肿瘤[3-4]、抗炎[5-6]、镇静镇痛[7-8]和止血[9]等作用，是中医常用药之一，也是多种常用传统复方中成药的原料药之一。

近年来，由于重楼需求量逐渐增加，重楼野生资源趋于枯竭，再加上重楼种植难度大、培育时间久等因素，导致重楼市场缺口不断加大，价格急剧上升。致使重楼在市场流通中以劣充优，以假充真的现象屡见不鲜。为此，有必要对全国范围内重楼饮片的质量现状进行研究，为合理利用重楼资源、维护市场正常流通秩序，进一步优化市场交易的公平性提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 分析样品

本实验的30批重楼样品收集于全国范围内各重楼饮片生产公司、药材流通市场和药店，主要产地为云南、四川及其他省份，具体信息见表1。

1.1.2 对照品

重楼皂苷Ⅰ对照品（批号：111590-201604，纯度为93.6%）、重楼皂苷Ⅱ对照品（批号：111591-201604，纯度为91.4%）、重楼皂苷Ⅵ对照品（批号：111592-201604，纯度为97.0%）、重楼皂苷Ⅶ对照品（批号：111593-201604，纯度为94.0%），以上对照品均购于中国食品药品检定研究所。

1.1.3 试剂与仪器

乙腈（色谱纯，Fisher公司，批号：387L-25962U）;乙醇（分析纯，北京化工厂，批号：20190110）;甲醇（分析纯，北京化工厂，批号：20190115）;娃哈哈纯净水（杭州娃哈哈集团有限公司，批号：06GH 02685）。

高效液相色谱仪（Waters公司，型号：Waters 2489）、色谱柱（Agilent公司，Agilent Zorbax SB-C18，4.6 mm×250 mm，5 μm）、十万分之一电子天平（北京赛多利斯仪器系统公司，型号：BT25S）、电子天平（上海越平科学仪器有限公司，型号：FA1104B）。

1.2 方法

1.2.1 外观性状测定方法

中药饮片的外观性状是鉴定饮片来源真伪的重要基础资料，也是中药饮片加工原药材质量、加工方法、储藏方法和周期是否得当的关键判断信息。本实验对重楼市售饮片的表皮颜色、断面颜色、饮片质地和相关片型等指标进行测定。

1.2.2 浸出物测定

1.2.2.1 浸出物测定方法的建立

浸出物测定法为水或其他适宜溶剂对药材或饮片中可溶性物质总量的测定方法，一般情况下，药材浸出物可更加全面的反映药材的内部质量。根据药典规定，浸出物测定方法分为水溶性浸出物测定法，醇溶性浸出物测定法和挥发性醚浸出物测定法。

重楼的主要含甾体皂苷类成分，因此对重楼浸出物测定方法的建立应在水溶性浸出物测定法和醇溶性浸出物测定法中进行筛选。为此，依照2015年版药典第四部中通则2201“浸出物测定法”中的水溶性浸出物测定法和醇溶性浸出物测定法进行实验，本实验以滤液能否完全滤过及滤液中化学成分种类为评测指标，评价不同浸出物方法是否适用于重楼。

实验表明不同产地的重楼饮片和药材的水溶性浸出物不能完全滤过，以乙醇、80%乙醇、稀乙醇为溶剂分别对重楼进行醇溶性浸出物冷浸法预实驗，发现以上浸出液均难以滤过或不能完全滤过。造成该问题的原因可能是重楼中淀粉等多糖类成分含量较高，黏度较高堵住滤纸，因此放弃应用水溶性浸出物法和醇溶性浸出物冷浸法对重楼质量的评定。

对醇溶性浸提物所使用的乙醇浓度进行预实验筛选：95%、80%、75%、70%、60%、50%，见表2。

实验发现，50%、60%、70%乙醇的浸提液不能完全滤过，75%、80%、95%乙醇浸提液能过滤完全，但80%和95%乙醇成分溶出率较低，故选择75%乙醇为溶剂对样品进行热醇溶性浸出物含量测定。

1.2.2.2 样品浸出物测定方法

以75%乙醇为溶剂对样品进行醇溶性浸出物热浸法测定。

1.2.3 HPLC含量测定方法

根据《中华人民共和国药典》（2015年版）中重楼含量测定项对市售饮片进行含量测定。

2 结果

2.1 外观性状测定结果

性状鉴别具体信息见图1、表3。

样品多为近圆形、椭圆形，表面多为白色、黄白色，少数为浅棕色，周边表皮黄棕色至棕褐色，兼有粉性和角质。

2.2 市售重楼饮片浸出物测定结果 结果见表4。

重楼饮片浸出物最大值为32.0%，最小值为9.0%，极差为23.0%，均值为17.4%。其中云南产地重楼饮片浸出物最大值为32.0%，最小值为9.0%，极差为23.0%，均值为16.7%。四川产地重楼饮片浸出物最大值为26.9%，最小值为9.6%，极差为17.3%，均值为17.8%。

从以上结果可知，重楼饮片浸出物之间的差异性较大，云南产地浸出物的平均值略小于四川产地浸出物含量，如图2。

2.3 样品含量测定结果

具体结果见表5。

重楼饮片皂苷含量差异较大，四川产地重楼饮片皂苷含量略大于云南产地，见图3。多数重楼饮片重楼皂苷Ⅵ检出含量对其限度标准是否合格并未造成影响，少数样品出现重楼皂苷Ⅵ含量较高现象。

3 讨论

3.1 对《中华人民共和国药典》重楼药材含量测定项的思考

含量测定实验结果发现，多数重楼饮片重楼皂苷Ⅵ检出含量对其限度标准是否合格并未造成影响，少数样品重楼皂苷Ⅵ含量较高，课题组前期研究可知，重楼易混淆品延龄草中重楼皂苷Ⅵ含量较高，对重楼药材及饮片真伪辨识影响较大[10]，因而样品2、5、13、22、30可能存在掺伪现象。

3.2 重楼饮片厚度研究及对《中华人民共和国药典》重楼饮片炮制项的思考

2015年版药典中规定重楼饮片为薄片，其中第四部0213炮制总则规定，薄片为1～2 mm。通过对重楼饮片片厚相关信息进行测定和整理后，结果表明，30批饮片的片厚均超出2015年版药典对重楼饮片的规定，其中大部分为厚片，少数为段，因此对重楼饮片切片厚度进行研究。

将润制完全（润制48～72 h，至药材完全软化）的重楼药材，置于切药机上，分别切制为薄片（1～2 mm）和厚片（2～4 mm）2种规格。结果表明：薄片的翘片率和败片率要高于厚片。

切制饮片厚度的筛选评价指标为饮片收率、败片率。

重楼药材粉性较强、直径较大，根据饮片切制原则“质坚宜薄，质松宜厚”，粉性强、直径大的药材如山药、防己、天花粉等均为切厚片。经实验可得，重楼手工切薄片败片率达到24.15%，损耗过大。因而认为重楼适宜切厚片，重楼厚片于切制、运输、贮藏等过程中不易破碎，败片率降低。

同时根据重楼在各版药典中的演变过程可知，1977年版《中华人民共和国药典》中重楼药材炮制项为“除去杂质，洗净，润透，切片，晒干”。

因此建议药典更改饮片规格，对重楼饮片片厚不作要求，改切薄片为切片。

3.3 对《中华人民共和国药典》重楼饮片性状项的思考

2015年版药典中未对重楼饮片的外观性状进行规定，因此借鉴重楼药材外观性状对其饮片进行规范，具体规定如下：“本品为近圆形、椭圆形或不规则片状。表面白色、黄白色或浅棕色，周边表皮黄棕色或棕褐色，粉性或角质”。对重楼饮片表皮颜色、断面颜色和质地相关信息进行整理，所有批次饮片基本与上述规定相一致。

2015年版药典中未对重楼饮片的直径进行规定，通过采集和测定重楼饮片的外观性状相关指标，结果表明其中横切片有16批，纵切片14批，样品4、10、11、19、22、30饮片直径整体小于1.0 cm，因此拟不对其饮片直径进行规范。

综上所述，建议《中华人民共和国药典》修订饮片炮制项，改切薄片为切片;修订含量测定项，去掉建议药典重楼标准去掉重楼皂苷Ⅵ，保留重楼皂苷Ⅰ，Ⅱ，Ⅶ，但限度不变，仍为“总量不得少于0.60%”;并补充饮片性状项。

近年来，随着重楼的临床需求量不断增大，市场流通中的掺伪现象也愈发严重。该研究对市售重楼饮片的质量进行了分析研究，为重楼饮片的质量评价及《中华人民共和国药典》重楼标准的修订提供了理论依据。中药饮片质量是影响临床疗效的关键，中药饮片质量标准是否合理关系着饮片市场的发展和临床用药的安全性、有效性。多年生的藥用植物的根及根茎部位入药，常面临野生资源不能满足药用的情况，如人参、三七、重楼、防风[11]等，更应充分考虑其市场流通中的实际情况，对其标准进行合理地修订和完善。

参考文献

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[M].北京：中国医药科技出版社，2015：260.

[2]（魏）吴普等述.（清）孙星衍，（清）孙冯翼辑.神农本草经[M].北京：科学技术文献出版社，1996：104.

[3]钱芳芳，阙祖俊，田建辉.重楼皂苷的抗肿瘤作用机制研究进展[J].癌症进展，2018，16（14）：1709-1712.

[4]杨远贵，张霁，张金渝，等.重楼属植物化学成分及药理活性研究进展[J].中草药，2016，47（18）：3301-3323.

[5]熊伟，陈思如，修光辉，等.中药重楼的抗炎作用机制研究进展[J].云南中医中药杂志，2018，39（1）：92-94.

[6]滕林师，张鑫，成颖，等.重楼皂苷的药理活性及药代动力学研究进展[J].西北药学杂志，2019，34（2）：280-283.

[7]王强，徐国钧，蒋莹.重楼类中药镇痛和镇静作用的研究[J].中国中药杂志，1990，15（2）：45-47，64.

[8]何含杰，章怀云，陈丽莉，等.重楼皂苷的药理作用和临床应用研究进展[J].中药材，2014，37（3）：527-530.

[9]彭一凡，张欣，李焘，等.七叶一枝花提取物对小鼠的止血作用[J].陕西师范大学学报：自然科学版，2019，47（4）：97-101.

[10]贾天颖，张晓南，苏钛，等.重楼质量研究及对《中国药典》重楼药材标准规定的思考[J].中国中药杂志，2020，45（10）：2425-2430.

[11]薛雪，王浩，贾天颖，等.不同生长方式及年限防风饮片质量的比较研究及对《中国药典》防风饮片标准的思考[J].中国中药杂志，2019，44（18）：4034-4042.

（2020-06-10收稿 责任编辑：徐颖）