上皮性卵巢癌患者外周血中CK19mRNA水平及其临床意义

李淼 朱继红

摘 要：目的：探讨上皮性卵巢癌患者外周血中CK19mRNA水平与微转移的相关性。方法：应用反转录聚合酶链反应（RT- PCR），检测180例上皮性卵巢癌患者外周血中CK19mRNA的表达。结果：180例患者外周血中查出CK19阳性表达106例，阳性率58.9%。CK19阳性检出与肿瘤病理分化程度和病理类型无关，而与卵巢癌分期、淋巴转移有关。结论：CK19mRNA可作为检测上皮性卵巢癌病人外周血中微转移的指标，外周血中CK19 mRNA检测有助于远处转移的上皮性卵巢癌病人的早期诊断。

关键词：CK19mRNA; 上皮性卵巢癌; 临床意义

中图分类号：R730.43           文献标识码：A       文章编号：1006-3315（2020）8-199-001

卵巢癌是导致女性相关癌症的死亡原因和最致命的妇科恶性肿瘤之一[1]。其中85%-90%是上皮性卵巢肿瘤。经过手术和化疗90%的卵巢癌患者能达到完全缓解（CR），但是最终70%的患者在2-5年内复发。近年来，卵巢癌微转移的研究引起了国内外学者的重视，据报道[2]CK19mRNA作为靶基因产物检测外周血循环中的癌细胞，具有高度敏感性。我院以CK19mRNA为标志物，应用反转录聚合酶链反应（RT-PCR），对180例卵巢癌患者外周血在术前或术后不同时间分别进行检测，探讨外周血中CK19mRNA阳性表达与微转移及预后的关系。为制定有效的综合治疗方案提供客观依据。

1.资料与方法

1.1临床资料

收集保定市第一中心医院2017-2019年上皮性卵巢癌患者180例，年龄24～83岁，平均54.6岁。180例均行手术治疗，其中，根治性手术120例，姑息性切除术46例，剖腹探查术14例。180例卵巢癌诊断均经病理组织学证实为上皮性卵巢癌。癌细胞分化程度：高分化（G1）26例、中分化（G2）114例、低分化（G3）40例。手术分期按FIGO（1988）标准，其中Ⅰ期38例、Ⅱ期40例、Ⅲ期80例、Ⅳ期22例。只有原发灶90例（50%），有远处转移40例（22.2%）。术前、术后3天内和术后早期短程化疗结束后，分别从外周静脉抽取5mL血液，肝素抗凝。

1.2实验方法

参照GenBank，利用Primer Premier5.0引物设计软件。引物由北京赛百盛公司合成。TRIzol试剂为nvitrogen公司， RNA溶液（RNase-free DNase）为Fermentas公司。CDNA合成试剂盒为Fermentas公司，TaqPCRMasterMix为天根公司。

1.3统计方法

使用SPSS20.0统计软件包进行统计学分析，相关数据采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2.结果

180例患者

中，术前有106例患者外周血中CK19mRNA为阳性表达，阳性表达率为58.9%（106/180），CK19mRNA阳性表达率与病理分化程度及病理类型无关，与卵巢癌术后分期、局部淋巴结转移及远处转移有关（见表1）

本组患者手术后3d天内外周血CK19 mRNA阳性表达120例，较术前的106例多14例;术后早期短程化疗结束后，CK19 mRNA阳性表达54例，52例转阴。

3.讨论

卵巢癌患者的远处转移及术后复发严重影响患者的预后，目前尚无有效的预防措施，加之目前的临床监测手段尚不能准确检出，以致复发和转移患者病情不易被察觉。目前普遍认为，临床转移通常由微转移发现而来，微转移是影响无病生存率和转移复发的高危险因素。尽早发现微转移灶，及时指导临床采取治疗措施，消灭血液中的癌细胞，可改善患者的预后。

本研究表明，卵巢癌患者有较高的外周血微转移率（58.9%），即使是术后分期Ⅰ和Ⅱ期患者，微轉移率也高达31.6%，随着疾病的进展，外周血微转移明显增加。有淋巴转移者，外周血微转移也较多，说明卵巢癌在早期就可能累及全身，本组术后3天内对患者外周血的检测发现，术后较术前阳性检测增多14例，表明手术增加了卵巢癌转移的机会。因此，手术过程中应严格执行无瘤技术，最大限度地减少因手术导致癌细胞医源性播散的可能。术后早期短程化疗结束后，49.1%（52/106）卵巢癌病人外周血中瘤细胞被消除，表明术后早期短程化疗对控制卵巢癌微转移具有一定的作用，有助于改善患者预后，因此，如果患者一般情况允许，化疗应尽早实施。

总之，通过CK19RT-PCR方法，检测卵巢癌病人术时和术后水平，评估患者预后，为辅助治疗提供依据，有较大临床实际应用价值。

参考文献：

[1]Yildirim M，Demir CB，Filiz AA.Differentiation between benign and malignant ovarian masses in the preoperative period using neutrophil-to-lymphocyte and platelet-to-lymphocyte ratios[J]Mol Clin Oncol，2015，3（2）：317-321

[2]Oloomi M，Bouzari S，Mohagheghi MA，et ai.Molecular Markers in Peripheral Blood of Iranian Women with Breast Cancer[J]Cancer Microoenviron，2013，6（1）：109-116