两种方法检测乳腺癌组织中Her2蛋白表达并分析

郭秋杰，邹佳芮，解水杉，刘 伟，柳春辉，郝俊梅*

（滨州医学院烟台附属医院，山东 烟台 264100）

乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，发病率逐年上升。Her2是一种原癌基因，在肿瘤组织中过表达，且提示不良预后[1-2]。目前Her2蛋白的测定大多是通过IHC,由于其半定量性质，该方法不能提供组织生物标志物的绝对定量。近期有研究已经证明QDB能够用变性样品实现组织水平的蛋白质含量的绝对定量[2]。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2008～2013年本院存档的女性乳腺癌患者239例，术前均未经过放疗或化疗，年龄31～86岁。

1.2 试剂与方法

免疫组化Elivision法检测Her2蛋白表达情况，Her2免疫组化试剂为多克隆兔抗人her2蛋白，购于DAKO公司。参照文献[3]中的QDB方法检测Her2蛋白表达情况，QDB板购于烟台康体诊医疗科技有限公司。FISH试剂购于安必平公司。

1.3 结果判读

免疫组化判读参考最新《乳腺癌HER2检测指南》，定义0和1+为低表达，2+和3+为高表达。QDB结果判读：低表达：QDB值＜0.261 nmole/g，高表达：QDB值≥0.261 nmole/g[3]。FISH判读：参考2018版《CAP临床实践指南：乳腺癌HER2检测》。

1.4 统计学方法

采用SPSS 22.0软件处理数据。Kappa检验评价不同检测方法的一致性。

2 结 果

2.1 两种方法检测Her2蛋白结果及一致性比较

239例乳腺癌患者中，IHC和QDB检出均低表达162例，均高表达48例。（IHC染色见图1）。两检测方法有相关性（r=0.697，P＜0.001）（见表1），Kappa值为0.687,说明二者一致性较高。

表1 两种检测方法之间的关系

图1 乳腺癌Her2免疫组化染色：A低表达（1+）、B高表达（3+）

2.2 3例乳腺癌FISH检测结果分析

在两种检测方法结果不一致的病例中随机选取3例，2例IHC结果为Her2（2+），QDB为低表达；1例IHC结果为Her2（1+），QDB为高表达。对这3例标本进行FISH检测（见图2），结果与QDB一致。

图2 乳腺癌Her2 FISH检测：A无扩增、B扩增

3 讨论

乳腺癌中Her2基因扩增是独立的预后因素，提示预后较差，其过表达提示肿瘤对曲妥珠单抗靶向治疗反应良好[4]。所以，Her2蛋白检测结果的准确性对患者的治疗尤为重要。目前Her2蛋白的测定大多是通过IHC，但由于不同批号Her2蛋白抗体的差异及判读者主观性，会出现假阴性和假阳性的问题[5]。另外IHC属于半定量检测，所以不能准确、定量的测定乳腺癌标本中Her2蛋白的水平。

QDB方法是首个在福尔马林固定石蜡包埋样品中可以实现蛋白的绝对定量的方法，该测定只需较少的总蛋白裂解物[3]。这种定量测定的方法在测量中没有模棱两可的案例，检测的结果是或高于或低于建议的临界值的。

本实验用两种方法进行检测，得出Kappa=0.687, 两种方法一致性较高,表明QDB可作为除IHC之外临床实验室常规使用的选择。

FISH检测是乳腺癌Her2检测的金标准，本实验在两种检测方法结果不一致的病例中随机选取3例进行了FISH检测，结果与QDB一致，说明QDB可能较IHC准确性更高。

本实验证明QDB作为一种绝对定量的检测方法，可作为临床实验室乳腺癌Her2蛋白的检测常规使用的选择。