葡萄籽粕对蛋鸡产蛋高峰后期鸡蛋胆固醇、脂质代谢及新城疫免疫效果的影响

乔利敏，关文怡，马建民，石晓峰

（1.北京农业职业学院畜牧兽医系，北京 102442；2.北京乾元君健葡萄酒科技服务有限公司，北京 102447）

葡萄籽粕富含大量的多酚类物质，简称葡多酚，具有抗辐射、降血脂、抗氧化、保护心血管及免疫调节等多种生物学活性，可提高机体的健康水平[1-4]。近年来，关于葡多酚在畜牧生产的研究较多。研究发现，葡多酚可以调节肉仔鸡、小鼠免疫机能[3,5]，促进五龙鹅的生长和提高其营养物质利用率[6]，提高绵羊生长性能、器官指数及血液生化指标[7]，调节罗非鱼血脂水平，增强肝胰脏抗氧化能力[8]。葡多酚在蛋鸡饲料的应用报道多见于其对蛋鸡饲养效果和鸡蛋品质的评价上，而通过添加葡萄籽粕对蛋鸡免疫性能和血液脂肪代谢方面的应用还鲜见报道。针对蛋鸡在产蛋高峰后期体内代谢和生理功能逐渐衰老、退化，免疫功能和生产性能大大降低的现象，本试验以64 周龄罗曼灰蛋鸡为研究对象，探讨饲粮中添加葡萄籽粕对蛋鸡产蛋高峰后期鸡蛋胆固醇、新城疫免疫效果及脂肪代谢的影响，为改善产蛋后期蛋鸡健康状况、维持产蛋高峰、改善鸡蛋品质以及优化饲粮配方提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料 葡萄籽粕由北京乾元君健葡萄酒科技服务有限公司提供，经自然干燥后粉碎而成，其主要营养成分的实测值为粗蛋白质12.98%、粗脂肪8.92%、粗灰分7.95%、粗纤维36.82%、钙0.77%、磷0.45%、中性洗涤纤维40.95%、酸性洗涤纤维32.01%。

1.2 试验设计与饲养管理 选用810 只64 周龄常规免疫处理的健康罗曼灰蛋鸡随机分为6 个处理，每处理5 个重复，每重复27 只鸡。对照组饲喂基础日粮，试验组分别按基础日粮中玉米质量分数的3%、4.5%、6%、7.5%、9%添加葡萄籽粕替代玉米。预试期7 d，使对照组与试验组在预试期间产蛋率差异不显著，正试期30 d。

试验蛋鸡采用3 层阶梯式笼养，每笼3 只鸡。饲料为全价配合干粉料，人工每组单独喂料，自由采食和饮水，按常规程序进行栏舍消毒和免疫（用新城疫IV 系弱毒活疫苗喷雾免疫）。试验期间详细记录各组饲料消耗及试验鸡的健康状况。基础日粮组成及营养成分见表1。

1.3 生产性能测定 观察每组鸡的健康状况。正试期每天10:30 左右准时收蛋，以重复为单位准确记录每天产蛋数、蛋重、不合格数（破、畸、软、碎、无壳蛋）和死淘鸡数，每10 d 定时结料称重，统计各组实际耗料量。分别计算日均采食量、蛋均重、日均产蛋量、产蛋率、料蛋比及破软壳率。

表1 基础日粮组成及营养成分（风干基础）

1.4 鸡蛋胆固醇测定 试验期最后1 d，每重复随机采集3 枚鸡蛋，按照《禽蛋中胆固醇含量的测定——酶法》（GB/T 37077-2018）测定鸡蛋胆固醇含量。

1.5 血液生化指标测定 于试验最后1 d，每个重复随机抽取2 只蛋鸡，翅下静脉采血3 mL，将血液常温倾斜静置待血清析出，3 000 r/min 离心15 min，取血清于-20℃保存。血清中甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）含量的测定采用全自动生化分析仪（日立7180 型，北京），所用试剂盒均购于北京康柏阳国际贸易有限公司。球蛋白（GLO）含量为TP 含量与ALB 含量差。

1.6 血清新城疫抗体水平测定 分别在免疫新城疫当日、免疫后第15 天和第30 天，每个重复随机抽取1 只鸡，翅下静脉采血3 mL，标明组号，4℃倾斜静置后3 000 r/min离心10 min，分离后血清分装到小离心管中，-20℃保存，按《新城疫诊断技术》（GB/T 16550-2008）中的方法检测新城疫血凝抑制（HI）抗体效价。抗体效价用X log2表示。

1.7 统计分析 试验数据采用SPSS 19.0 软件进行方差分析，LSD 法进行多重比较，结果以平均值±标准误表示。P＜0.01 为差异极显著，P＜0.05 为差异显著。

2 结果与分析

2.1 葡萄籽粕对蛋鸡产蛋高峰后期生产性能的影响 由表2 可知，对照组与各试验组蛋鸡的日均采食量、料蛋比及破软蛋率差异不显著。与对照组相比，在日均产蛋量性状上，6%葡萄籽粕组高于对照组（P＜0.01），3%、4.5%葡萄籽粕组高于对照组（P＜0.05），7.5%、9%葡萄籽粕组与对照组差异不显著；在产蛋率性状上，3%、4.5%、6% 葡萄籽粕组较对照组分别提高了 12.38%（P＜0.05）、14.76%（P＜0.05）、18.09%（P＜0.01），7.5%、9%葡萄籽粕与对照组差异不显著。结果表明，在日粮中添加葡萄籽粕对种鸡产蛋高峰后期生产性能有促进作用。在本试验条件下以添加 6%的葡萄籽粕效果最好。

2.2 葡萄籽粕对蛋鸡产蛋高峰后期鸡蛋胆固醇的影响从表 3 可见，与对照组相比，各试验组鸡蛋胆固醇含量分别降低32.85%、36.17%、33.36%、37.00%、26.38%（P＜0.01），但没有随葡萄籽粕添加量增加表现出规律性变化，其中9%添加组鸡蛋胆固醇含量较其他处理组有所升高。

2.3 葡萄籽粕对蛋鸡产蛋高峰后期血液脂肪代谢的影响由表4 可见，与对照组相比，葡萄籽粕对血清中TG、TP 和GLO 没有显著影响，但试验组血清TP 有升高的趋势，其中6% 葡萄籽粕组高于对照组（P＜0.05），其他各试验组与对照组差异不显著；6%、7.5%、9%葡萄籽粕组血清中TC 较对照组分别降低了18.52%（P＜0.05）、20.14%（P＜0.05）、37.27%（P＜0.01）；3%、4.5%、6%、7.5%葡萄籽粕组血清中HDL 与对照组相比差异不显著，但均有升高的趋势；3%、6%、7.5%葡萄籽粕组血清中LDL 较对照组分别降低了7.95%（P＜0.05）、10.88%（P＜0.01）、9.62%（P＜0.01）；6%葡萄籽粕组血清中TP、ALB 含量分别较对照组提高3.90 g/L（P＜0.05）和 3.07g/L（P＜0.01）。结果表明，葡萄籽粕有助于清除血液中多余的胆固醇，减少血液中胆固醇的沉积，具有较好的调节脂类代谢的功能。在本试验条件下以添加 6%的葡萄籽粕效果最佳。

表2 葡萄籽粕对蛋鸡产蛋高峰后期生产性能的影响

表3 葡萄籽粕对蛋鸡产蛋高峰后期鸡蛋胆固醇的影响 mg/g

表4 葡萄籽粕对种鸡产蛋高峰后期血清生化指标的影响

表5 葡萄籽粕对蛋鸡新城疫抗体效价的影响 log2

2.4 葡萄籽粕对蛋鸡产蛋高峰后期新城疫抗体效价的影响 从表5 可知，免疫后15 d，4.5% 和7.5% 葡萄籽粕组新城疫抗体水平高于对照组，3%和9%葡萄籽粕组低于对照组，且各组间差异不显著；免疫后30 d，6%葡萄籽粕组抗体效价较15 d 时升高12.20%，4.5%、7.5%、9%葡萄籽粕组较15 d时分别降低4.65%、2.33%、10.26%；与对照组相比，除9%组显著低于对照组之外，其他各试验组与对照组相比差异不显著，其中以6%组抗体效价最高，显著高于9%和3%组。结果表明，葡萄籽粕具有提高蛋鸡体液免疫的作用，从而降低蛋鸡患新城疫的机会，在本试验条件下以添加 6%的葡萄籽粕抗体效价最高。

3 讨 论

3.1 葡萄籽粕对蛋鸡产蛋高峰后期生产性能的影响 葡萄籽粕在畜禽生产中的应用已有学者进行了研究，多数研究表明葡萄籽粕对畜禽的生产性能具有良好的促进作用。张玉等[9]研究发现，与对照组相比，在 64 周龄蛋鸡日粮中添加50、100 mg/kg 葡萄原花青素显著抑制了蛋鸡产蛋率下降。胡如久等[10]报道，添加 100 mg/kg葡萄皮渣提取物极显著提高了产蛋率，但是高水平添加有降低产蛋率的趋势。本研究结果表明，在日均产蛋量性状上，6%葡萄籽粕组极显著高于对照组，3%和4.5%葡萄籽粕组显著高于对照组；在产蛋率性状上，3%、4.5%及6%葡萄籽粕组较对照组分别显著提高了 12.38%、14.76%、18.09%，表明在日粮中添加葡萄籽粕对种鸡产蛋高峰后期的生产性能有促进作用。分析其主要原因是葡萄籽粕富含的原花青素是一种黄酮类化合物，具有超强抗氧化能力，可以改善蛋鸡的生理状态，延缓蛋鸡衰老、缓解不良应激，最终导致生产性能提高[11-12]；而且花青素具有弱雌激素活性，亦可双向调节动物生产性能[10,13-14]。此外，葡萄籽粕含有部分缩合单宁，高剂量添加会影响畜禽的采食量，引起营养物质利用效率的下降。本试验中，7.5% 和9% 葡萄籽粕组的采食量、日均产蛋量和产蛋率下降，均低于空白对照组，也进一步验证了其抗营养因子的作用。

3.2 葡萄籽粕对蛋鸡产蛋高峰后期鸡蛋胆固醇的影响动物性产品是人体摄取胆固醇的主要来源，因此降低动物性产品的胆固醇含量对人体健康非常重要。有研究表明，葡萄籽粕能够抑制鸡蛋胆固醇合成酶的活性、增加蛋鸡体内胆固醇的分解，进而降低鸡蛋胆固含量[15]。本研究表明，饲粮添加葡萄籽粕后，显著降低了鸡蛋胆固醇含量，但没有随葡萄籽粕添加量增加表现出规律性变化。这与胡如久等[10]、尹靖东等[16]的研究结果一致，可能原因是葡萄籽粕通过调节发育中的卵泡细胞的受体（LDL 受体基因家族产物）活性来调控鸡蛋胆固醇，值得进一步深入研究。

3.3 葡萄籽粕对蛋鸡产蛋高峰后期血液脂肪代谢的影响血清生化指标反映动物机体的健康水平及营养物质的代谢情况。血清中TG 水平能直接反映机体脂肪沉积状况[17]，所以蛋鸡脂肪组织发育和脂肪沉积主要取决于血清中TG 水平。HDL 和LDL 是动物体内运输胆固醇的2 种脂蛋白。HDL 是一种抗动脉粥样硬化的血浆脂蛋白，可以运载周围组织中的胆固醇，再转化为胆汁酸或直接通过胆汁从肠道排出，所以血清HDL 水平相对较高有助于机体健康。而LDL 把胆固醇从肝脏运送到全身组织，当其含量过高时，所携带的胆固醇便积存在动脉壁上，引起动脉粥样硬化，因此LDL 被称为“坏的胆固醇”，降低LDL 水平则有助于机体健康[18]，可以降低冠心病的危险。金亚倩等[7]研究表明，日粮中添加一定量的葡萄皮渣可增加绵羊血清高密度脂蛋白胆固醇含量，提高血清抗氧化水平；吴小雪[19]报道，产蛋高峰后期蛋鸡日粮添加3%～7%的葡萄皮渣可降低血液胆固醇；另有研究表明，葡萄籽粕还可降低正常血脂大鼠的血清TG 和LDL-C 水平[15]；在仓鼠动脉硬化模型试验中，葡萄籽粕降低了血清TC 和TG 水平[20]。本试验结果表明，日粮中添加葡萄籽粕可以显著降低蛋鸡产蛋后期血清中TC 和LDL 含量，提高HDL 含量。以上结果说明，葡萄籽粕有助于清除血液中多余的胆固醇，减少血液中胆固醇沉积，具有较好的调节脂类代谢的功能。

血清指标与机体代谢、营养及疾病有着密切的关系[21]。当机体受饲粮影响而发生生理变化时，必定会在血清指标中反映出来[22]。TP 和ALB 含量的变化可以反映肝脏的功能以及机体的能量代谢和免疫功能状况；大部分血蛋白质均由肝脏合成，当肝细胞受损时，这些血蛋白质合成就会减少，尤其是白蛋白会明显减少[23]。Young等[24]研究认为，血清白蛋白含量是衡量动物蛋白质需要量的重要标识之一。本研究结果表明，日粮中添加葡萄籽粕能够提高血清中TP 和ALB 含量，其中6%葡萄籽粕组血清中TP、ALB 含量分别较对照组提高3.90 g/L和3.07 g/L，这说明葡萄籽粕能够促进组织细胞蛋白质代谢活动旺盛，有利于体内蛋白质沉积及性能发挥，提高饲料利用率。而葡萄籽粕对血清中GLB 含量无显著影响，说明对机体无任何刺激作用，进一步证明了葡萄籽粕的饲用安全性。

3.4 葡萄籽粕对蛋鸡产蛋高峰后期新城疫抗体效价的影响鸡新城疫已成为威胁养鸡业最严重的一种传染病[25]。众所周知，蛋鸡在产蛋高峰后期体内代谢和生理功能逐渐退化、衰老，免疫功能和生产性能大大降低，极易引起鸡新城疫等疫病发生。抗体效价的变化可以直接反映机体的体液免疫状态。葡萄籽粕富含葡萄籽原花青素，可作为抗原刺激机体，使机体产生特异性免疫反应。葡萄籽粕富含的生物类黄酮又具有增强机体体液免疫和非特异性免疫的功能。本研究中，通过在蛋鸡产蛋高峰后期日粮中添加葡萄籽粕，对照组和各试验组蛋鸡在免疫当日的新城疫抗体效价平均在6.2～6.8 log2；免疫后15 d，对照组和各试验组新城疫抗体水平升高到7.8～8.6 log2；免疫后30 d，除9%葡萄籽粕组显著低于对照组之外，其他各试验组与对照组相比差异不显著，其中以6%葡萄籽粕组抗体效价最高，显著高于9%和3%组，表明葡萄籽粕具有提高蛋鸡体液免疫的作用，从而降低蛋鸡患新城疫的机会。这与李佳等[26]、郝瑞荣等[27]的报道相似，不同之处在于研究选取的试验对象不同。

4 结 论

本试验条件下，在蛋鸡产蛋高峰后期饲粮中添加葡萄籽粕，能够提高蛋鸡生产性能和新城疫抗体效价、降低鸡蛋胆固醇含量，调节血液脂肪代谢水平，且以玉米质量分数6%的剂量添加葡萄籽粕替代玉米效果较好。