细菌性阴道病与宫颈高危型HPV感染的关系研究

周波　黄丽梅　甘伟山　杨帆　丁德先

【摘要】 目的：探讨细菌性阴道病与宫颈高危型HPV感染的关系。方法：选取2017年7月-2018年6月就诊于本院门诊细菌性阴道病（BV）患者350例为BV阳性组，同时按1︰1配对，选择同一时期在该医院同科室就诊的其他疾病患者350例作为BV阴性组，调查BV发生率，以及BV患者中高危型HPV感染流行概况，探讨HPV感染危险因素，分析细菌性阴道病与宫颈高危型HPV感染的关系。结果：BV阳性组高危HPV阳性率6.57%（23/350）高于BV阴性组3.14%（11/350）;高危HPV阳性患者BV阳性率67.65%（23/34）高于高危HPV阴性患者49.10%（327/666）;Logisitic回归分析显示年龄、避孕方式、宫颈柱状上皮外移、BV阳性是宫颈高危型HPV感染发生的影响因素;BV阳性患者随访1年宫颈高危型HPV转阴率为34.78%（8/23）低于BV阴性组72.73%（8/11）。结论：年龄、避孕方式、宫颈柱状上皮外移、BV阳性是宫颈高危型HPV感染发生的影响因素，细菌性阴道病与宫颈高危型HPV感染有关，BV阴性者宫颈高危型HPV感染转阴率更高。

【关键词】 细菌性阴道病 人乳头瘤病毒 关系

[Abstract] Objective： To explore the relationship between bacterial vaginosis （BV） and high-risk cervical HPV infection. Method： A total of 350 BV patients who were treated in outpatient department of the hospital from July 2017 to June 2018 were enrolled as positive BV group. Another 350 patients with other diseases who were treated in the same department of the hospital during the same period were enrolled as negative BV group. The incidence of BV and prevalence of middle and high-risk HPV infection in BV patients were investigated. The risk factors of HPV infection were explored. The relationship between BV and high-risk cervical HPV infection was analyzed. Result： The positive rate of high-risk HPV in positive BV group was higher than that in negative BV group [6.57% （23/350） vs 3.14% （11/350）]. The positive rate of BV in high-risk positive HPV patients was higher than that in high-risk negative HPV patients [67.65% （23/34） vs 49.10% （327/666）]. Logisitic regression analysis showed that age， contraceptive methods， cervical columnar epithelium migration and positive BV were the influencing factors of high-risk cervical HPV infection. After 1 year of follow up， negative conversion ratio of high-risk cervical HPV in positive BV patients was lower than that in negative BV patients [34.78 % （8/23） vs 72.73% （8/11）]. Conclusion： Age， contraceptive methods， cervical columnar epithelium migration and positive BV are the influencing factors of high-risk cervical HPV infection. BV is related to high-risk cervical HPV infection. The negative conversion ratio of high-risk cervical HPV infection is higher in negative BV patients.

[Key words] Bacterial vaginosis Human papillomavirus Relationship

First-authors address： Kuiyong Peoples Hospital in Dapeng New District， Shenzhen 518119， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2020.16.008

宫颈癌为妇科常见恶性肿瘤之一，其发病率居世界范围内女性生殖道恶性肿瘤中的第二位[1-2]。依据大量分子生物学以及流行病学研究结果表明高危型人乳头瘤病毒（Human papillomavirus，HPV）持续性感染是导致宫颈上皮内瘤变以及宫颈癌发生的必要条件[3-4]。HPV作为女性生殖道常见的病原微生物，绝大多数会自行清除，然而有较少的一部分可能发生持续性的感染。依照HPV基因型和宫頸癌相关程度，可分为高危型和低危型[5-6]。低危型HPV可引起患者肛门与生殖器疣的轻度病变，而高危型HPV持续性感染的发生则可致使患者子宫颈以及肛门鳞状上皮发生高度病变，并有可能逐步发展为子宫颈癌或肛门癌[7-8]。细菌性阴道病（Bacterial vaginosis，BV）主要临床特征为阴道pH升高、阴道中乳杆菌减少甚至消失，其他相关微生物明显增多[9]。本研究对细菌性阴道病与宫颈高危型HPV感染的关系进行研究，以确定BV感染的发生是否增加HPV持续感染风险，旨在了解本地区育龄妇女HR-HPV感染流行现状及其相关危险因素，为降低HPV感染率，减少宫颈癌发生提供科学依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2017年7月-2018年6月就诊于深圳市大鹏区葵涌人民医院妇产科门诊细菌性阴道病患者为病例组，同时按1︰1配对，选择同一时期在该医院同科室就诊的其他疾病患者为对照组，要求年龄、民族、职业等相近或一致。患者知情同意前提下，填写调查问卷，内容包括年龄、文化程度、职业、婚姻状况、怀孕次数、流产次数、分娩次数、初次怀孕年龄、初次性生活年龄、性生活频率、烟酒史、恶性肿瘤、家族史等。所有研究对象均行阴道分泌物涂片及HPV-DNA（HC2）检测。（1）纳入标准：①非妊娠期女性，平时月经规律;②年龄≥15岁;③未接受过抗HPV治疗;④自愿接受阴道分泌物检测。（2）排除标准：①就诊时或1年内宫颈细胞学检查异常;②阴道异常出血;③合并内外科疾病或免疫系统疾病;④近1个月内使用过抗生素、性激素以及免疫抑制剂者;⑤阴道分泌物取样检查前3 d有性生活、阴道上以及阴道灌洗者;⑥急性生殖道感染或生殖道肿瘤者;⑦子宫全切或次全切术者。

1.2 标本的采取及运送 取材时间多为月经来潮前10 d以内，暴露宫颈，取阴道上1/3侧壁分泌物行生殖道微生态检测;无菌刷在宫颈表面顺时针刷5圈，样本留作HC2检测。（标本不能混有血液及反复冻融）。

1.3 实验方法

1.3.1 生殖道微生态检测 用1根无菌棉拭子于阴道侧壁近穹窿处取阴道分泌物，于载玻片中央涂成薄层，经革兰染色后置于油镜下镜检观察相关指标（清洁度、pH值、念珠菌、线索细胞及乳酸杆菌等）。

1.3.2 HPV-DNA检测 采用亚能生物科技有限公司基因芯片PCR反向杂交法测定HPV分型，型别包括HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82、83。

1.4 诊断标准 （1）HPV阳性：HC2检查结果RLU/CO>1.0 pg/mL。（2）BV阳性：①阴道分泌物涂片清洁度为I或Ⅱ度，线索细胞阳性，胺臭味实验阳性，阴道pH>4.5，阴道均质稀薄分泌物（其中至少3项阳性可诊断）;②宫颈液基细胞学未见宫颈上皮内病变及恶变[3]。

1.5 观察指标 （1）BV患者中的HPV感染率、非BV患者中的HPV感染率;（2）HPV阳性者中BV感染率、HPV阴性者中BV感染率;（3）分析BV与HPV感染率的相关性;（4）分析育龄妇女HPV感染危险因素;（5）对合并细菌性阴道病与宫颈高危型HPV感染的患者进行门诊随访12个月，观察高危型HPV感染转归情况。

1.6 统计学处理 采用统计学软件SPSS 19.0进行分析，计数资料采用率（%）表示，比较采用字2检验，进行相对危险度（OR）分析，采用Logisitic回归模型进行多因素分析，计算OR值与可信区间（95%CI），以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 细菌性阴道病与宫颈高危型HPV感染的关系 350例BV阳性者中高危HPV阳性23例，350例BV阴性者中高危HPV阳性11例，BV阳性组高危HPV阳性率6.57%（23/350）高于BV阴性组3.14%（11/350）（字2=4.452，P=0.035）。34例高危HPV阳性者中BV阳性23例，666例高危HPV阴性者中BV阳性327例，高危HPV阳性患者BV阳性率67.65%（23/34）高于高危HPV阴性患者49.10%（327/666）（字2=4.452，P=0.035）。

2.2 影响宫颈高危型HPV感染发生的单因素分析 高危HPV阳性组与阴性组患者经济收入、吸烟史、饮酒史、初次性生活年龄、妊娠次数比较（P>0.05）;年龄26～40岁、每月性生活次数≥9次、宫颈炎症史、宫颈柱状上皮外移史、BV阳性患者高危HPV发生率高于其他患者，使用避孕套作为避孕方式患者高危HPV发生率低于其他患者，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.3 影响宫颈高危型HPV感染发生的多因素分析 将上述因素差异有统计学意义项纳入多因素Logistic回归模型，以宫颈高危型HPV感染发生作为因变量，以上述差异有统计学意义项作为自变量，并进行赋值：年龄（≤25岁=0，26～40岁=1，≥41岁=2）、每月性生活次数（≤4次=0，5～8次=1，≥9次=2）、避孕方式（无=0，避孕药=1，避孕套=2，节育环=3）、宫颈柱状上皮外移（否=0，是=1）、宫颈炎症（否=0，是=1）、BV阳性（否=0，是=1）。Logisitic回归分析显示年龄、避孕方式、宫颈柱状上皮外移、BV阳性是宫颈高危型HPV感染发生的影响因素。见表2。

2.4 细菌性阴道病与宫颈高危型HPV转阴率的关系 BV阳性患者随访1年宫颈高危型HPV转阴率为34.78%（8/23）低于BV阴性组72.73%（8/11）（字2=4.300，P=0.038）。

3 讨论

据统计，2015年我国宫颈癌新发病例将近10万例，并有超过3万例妇女死于宫颈癌，且现阶段我国宫颈癌发病率仍处于上升趋势[10]。持续性感染高危型HPV是导致宫颈癌前病变和宫颈癌发生的主要原因，在目前已知的200多个HPV亚型中，和生殖道感染相关的型别超过40个[11]。

BV感染和盆腔炎、不孕不育、流产、妇科及产科术后感染、早产、胎膜早破、新生儿感染等系列事件的發生有关[12]。BV发生时，机体自行清除HPV感染的机制遭到损坏，再加上细菌与真菌黏附导致的上皮细胞损伤，增加了HPV侵入上皮细胞率[13-14]。细菌与真菌刺激患者免疫系统，激活巨噬细胞，乳酸杆菌减少，上皮细胞中HPV的负荷量相应增加，生殖道感染率增加，不利于HPV感染的清除[15]。目前，国内外关于细菌性阴道病与宫颈高危型HPV感染的相关性研究不多，主要集中在常见阴道感染与HPV感染、转归及子宫颈上皮内瘤变相关性研究。本研究对深圳市大鹏新区育龄妇女细菌性阴道病与宫颈高危型HPV感染的关系进行研究。

本研究中BV阳性组高危HPV阳性率6.57%高于高危HPV阳性3.14%，提示BV与高危HPV感染之间存在关系，阴道局部免疫包括非特异性免疫及特异性免疫，BV感染导致阴道正常菌群破坏，机体内局部具备防御功能的抗微生物多肽缺乏，增加生殖道HPV感染率，患者阴道内局部Th1细胞功能受到抑制，细胞免疫功能不足，增加了病毒易感性[16]。与此同时BV患者阴道分泌物中存在大量磷脂酶C和A2，后者可明显增加HPV易感性。谢建萍等[17]研究结果发现细菌性阴道病的发生影响高危型HPV转阴状态。本研究中BV阳性患者随访1年宫颈高危型HPV转阴率为34.78%低于BV阴性组72.73%，BV阴性者宫颈高危型HPV感染转阴率更高，与其研究结果一致。

本研究分析影响宫颈高危型HPV感染发生的危险因素，BV阳性是导致高危HPV感染发生的危险因素之一。与此同时本研究发现26～40岁年龄段患者高危HPV阳性率明显高于其他年龄段，这可能是由于此年龄段女性处于生育年龄，性生活频繁，易导致HPV感染的发生，临床上应加强此年龄段女性宫颈癌筛查力度[18-19]。性生活频率也是HPV感染的危险因素之一，性生活频率越高的女性，可能由于高危性行为以及卫生保健措施较差，而增加HPV感染率。卢永丽等[20]研究结果宫颈柱状上皮外移Ⅰ度与Ⅱ度患者HPV感染率低于Ⅲ度患者，并提示宫颈柱状上皮外移与HPV感染的发生具有相关性，且随着异位程度的增加，感染率呈现增高趋势，本研究中宫颈柱状上皮外移是高危型HPV发生的危险因素，与其研究结果一致。本研究中使用避孕套避孕患者HPV感染率较低，说明避孕套对预防生殖道感染有一定作用。

综上所述，年龄、避孕方式、宫颈柱状上皮外移、BV阳性是宫颈高危型HPV感染发生的影响因素，细菌性阴道病与宫颈高危型HPV感染有关，BV阴性者宫颈高危型HPV感染转阴率更高，临床上应进行高危型HPV和细胞学的联合筛查，早期预防宫颈癌的发生。

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（收稿日期：2019-11-06） （本文编辑：周亚杰）