SMART300全自动化学发光分析仪检测N-末端脑钠肽前体（NT-proBNP）的性能评价

张 玮，黄学强

（1.宁夏医科大学，宁夏 银川 750004；2.宁夏红寺堡区人民医院，宁夏 吴忠 751999）

科斯麦SMART300全自动化学发光分析仪将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合[1]，通过对化学发光免疫反应产生的光子进行计数分析处理，从而对各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等进行检测分析[1-2]。我们根据《医疗机构临床实验室管理办法》和《医学实验室质量和能力认可准则》（ISO15189:2012）的要求，结合实际工作环境，对重庆科斯麦SMART300的重复精密度、期间精密度、正确度、线性范围（可报告范围）、参考区间进行验证和评价[3-4]。为实验室自动免疫定量检测系统的专业化技术评价提供必要的实验数据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

（1）重庆科斯麦SMART300全自动化学发光仪，科大创新SC-3614型普通离心机，N-末端脑钠肽前体（NTproBNP）检测试剂盒（武汉明德生物科技股份有限公司），试剂批号A18120101（使用期限至2019年12月），M6U1516、M6U1516复合质控品。

（2）标本来源：明德质控LEVEL1、LEVEL3水平,明德厂家指定的CaL1、CaL2定标液；2018年12月健康体检者血清标本20例（年龄＜70岁）。

1.2 方法

参照美国临床和实验室标准协会（CLSI）的要求，严格按照仪器的操作规程和试剂说明书操作，在室内质控结果允许范围内对标本进行检测[5]。同时，按本实验室标准操作（SOP）对科斯麦SMART300全自动化学发光分析仪进行每日保养，质控结果在可受控、检测系统处于优良的条件下，进行操作。

1.2.1 精密度试验

1.2.1.1 重复精密度：在条件稳定的情况下，按常规程序在2 h内完成对高低两个浓度的质控

标本分别连续进行10次的重复检测，判断这10个独立结果间的一致程度。计算其结果重复

精密度的CV值和SD值，得到重复性精密度。

1.2.1.2 期间精密度：在条件稳定的情况下，按常规程序在2h内完成对高低两个浓度的质控

标本分别连续5天对明德质控LEVEL1、LEVEL3水平各检测2次，记录检测结果，判断这

10个独立结果间的一致程度。计算其结果期间精密度的CV值和SD值，得到重复性精密度。

1.2.2 正确度验证评价

仪器测试结果与接受参考值之间的一致程度，采用定标液CaL1、CaL2的标本作为验证标本，通过计算实验室检测数据的偏倚从而评价和验证实验室检测结果的准确性。

1.2.3 生物参考区间验证

选择20份体检合格的健康人作为验证标本，在科斯麦SMART300检测系统上进行测定，对检测结果进行整理分析并与厂家提供的参考区间进行对比，如果这20份标本中不超过2例的观察值在原始报告的区间之外，说明厂家提供的参考区间的实验报告可接受。本实验说明书的参考区间为0-117pg/ml。

1.2.4 线性测量范围验证

用于验证线性范围的标本类型应与临床测试所用的标本类型相同或相类似，所有标本应不含厂家所标定的干扰因素（如溶血、黄疸、脂血等）。选取一份低值及高值血清标本（尽量靠近试剂说明书的线性高低值），将H 和L样品按：5L、4L+IH、3L+2H、2L+3H、lL+4H、5H 关系各自配制混合，形成系列评价样品，每个浓度重复测定3次，将所得各浓度均值进行线性回归分析，得出测量值与预测值是否呈线性关系线性关系。从而保证该浓度范围检测结果的准确性。

1.2.5 结果判断方式

＜1/4TEa

2 结 果

2.1 精密度验证

结果血清SMART300的LEVEL1低浓度批内CV3.28%，期间CV3.61%，LEVEL2高浓度批内CV3.03%，期间CV2.63%；各项目实际CV＜1/4自治区临检中心TEa的要求，并且均低于厂家声明的CV，说明精密度验证通过。结果见表1、2。

表1 批内精密度验证结果

表2 期间精密度验证结果

2.2 正确度验证结果

检测的厂家提供的2份样本，计算实测值的各项目定标液CaL1、CaL2的偏倚，与偏倚范围相比较，来判断偏倚是否可以接受，≤1/2自治区临检中心允许总误差（TEa）。结果在要求范围内，表面准确度通过，详见表3。

表3 正确度验证结果

2.3 参考区间验证

最终我们检测20个标本的检测结果均在验证区间＜0.5mlU/ml内，在厂家声明的参考区间之外的结果均为0，故本实验室参考区间验证通过。详见表4。

表4 参考区间验证结果

2.4 线性测量范围验证

参照线性范围的要求，验证结果的斜率a值在1±0.05范围内，相关系数R²≥0.995，线性范围验证通过。详见表5。

表5 线性范围验证结果

3 讨 论

根据ISO15189:2012的相关要求，仪器设备项目在应用于临床之前，都需要对其检验方法和相关程序进行分析性能验证，内容应包括精密度、正确度、线性范围和参考区间。我院在2017年引进一台科斯麦SMART300全自动免疫分析仪，NT-proBNP的开展为临床医生提供了心功能诊断价值、心脏预后的评估价值、AHFCHFLVD治疗等方面发挥重要价值，由于厂家的性能参数是在其合适的环境下测定得到的与我实验室实际的外部条件存在一定的差异[6,7]，因此，本实验室在使用科斯麦SMART300 日常检测前必须要对其分析性能进行验证和评价。

精密度是指在规定的条件下，重复检测样本的结果一致程度，主要评价仪器的重复性，是检测系统的基本分析性能指标之一。通过检测结果分析比对，科斯麦SMART300分析仪检测 NT-proBNP 批内和批间精密度（CV%）均低于厂商要求（10% 和 12%）；说明该仪器检测的重复性好。计算实测值的项目定标液CaL1、CaL2的偏倚，检测结果与靶值的相对偏倚为0.1%～1.02%；线性范围验证结果表明 NT-proBNP 测量值与预期值的相关系数R²≥0.990，该项目所涉及的浓度范围内（0-29450pg/ml）是线性关系，两者相关性很好，复合临床预期要求。收集20例正常健康人血清标本及时检测，要求其年龄，性别等均匀分布，对参考范围进行验证，SMART300分析仪测定其NT-proBNP 的数值都是＜117pg／ml，参考区间与厂家声明一致。

综上所述，本 实验对科斯麦SMART300全自动免疫分析仪检测血清NT-proBNP的精密度、正确度、线性范围和参考区间进行验证和评价。各项结果与厂家声明的分析性能基本一致。能够为实验室自动免疫定量检测系统的专业化技术评价提供实验数据。