血清IgG、IgG4 水平对ANCA 相关性血管炎的诊断分析

张竞文， 肖燕， 蓝卫东， 陈莹莹

（1 华中科技大学协和深圳医院 检验科， 广东 深圳518052；2 深圳市南山区妇幼保健院 检验科， 广东 深圳518067）

抗中性粒细胞胞浆抗体 （anti－neutrophil cytoplasmic antibodies， ANCA） 相关性血管炎是一种自身免疫相关性疾病［1］，与原发性小血管炎中部分疾病和抗中性粒细胞胞浆抗体有密切关系， 故称之为ANCA 相关性血管炎， 和类风湿性关节炎、 系统性红斑狼疮属于一种疾病类型。 存在坏死性炎症的血管是该疾病的病理特点， 包括肉芽肿型血管、 显微镜下多血管炎以及嗜酸性肉芽肿性血管炎［2］。 该疾病主要的临床表现为不明原因的发烧、 血沉加快以及贫血等， 严重情况下甚至会侵袭肺部和肾脏， 影响患者机体健康， 但该疾病在临床治疗中的难点在于诊断， 因其症状和其他自身免疫相关疾病相似， 故临床常出现误诊或漏诊等情况［3－4］。 鉴于此， 本研究选取我院收治的60 例ANCA 相关性血管炎患者以及同期收治的55 例类风湿性关节炎患者作为研究对象， 旨在分析血清IgG、 IgG4 水平在两种疾病患者中的表达， 探讨其诊断价值， 现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 将2017 年10 月至2019 年9 月在我院肾内科穿刺活检确诊的60 例ANCA 相关性血管炎患者纳入观察组， 另选取同期我院收治的55 例类风湿性关节炎患者纳入对照组。观察组中男31 例， 女29 例； 年龄25 ～80 岁， 平均 （46．65 ±10．38） 岁； 病程1 ～32 年， 平均 （12．21 ± 5．86） 年。 对照组中男30 例， 女25 例； 年龄28 ～80 岁， 平均 （47．21 ± 10．04）岁； 病程1 ～30 年， 平均 （11．89 ± 5．91） 年。 两组患者的一般资料比较， 差异无统计学意义 （P ＞0．05）， 具有可比性。

1.2 方法 分别采集两组患者清晨空腹静脉血5 mL， 使用购自于安徽嘉文仪器装备有限公司的离心机JW－1050R， 取血清之前需3 500 r／min 离心10 min， 将血清置入－20 ℃冰箱保存， 等待下一步检测。

1.2.1 IgG 水平检测 采用免疫散射比浊法检测IgG 水平， 仪器为SIEMENS BNII 全自动蛋白分析仪 （德国西门子）， 试剂盒为德国西门子公司提供的配套试剂盒。

1.2.2 IgG4 水平检测 采用酶联免疫吸附法 （试剂盒由上海泽叶生物科技有限公司提供） 检测IgG4 水平， 将标准品、 标本以及使用HRP 标记的二抗按顺序加入预先包被IgG4 抗体的微孔中， 进行温育后洗涤， 加TMB 进行显色， 终止显色后由蓝色变为黄色， 其颜色的深浅不同和样品中IgG4 水平呈正比。使用购自于深圳雷杜生命科学股份有限公司的RT－6100 酶标仪， 设置波长450 nm， 测定OD 值 （吸光度） 并计算IgG4 水平。 检测方法严格遵守说明书进行。

1.3 观察指标 记录两组患者血清的IgG （7 ～16．6 g／L）、 IgG4（0．86 ～1．35 g／L） 水平， 并对二者的诊断效能进行计算。 以临床诊断结果为金标准， 分析IgG、 IgG4 单项测定的准确率、 灵敏度和特异度。

1.4 统计学处理 采用SPSS 18．0 软件处理数据。 计数资料以百分比表示， 采用χ2检验； 计量资料以表示， 采用t 检验。P ＜0．05 为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 血清IgG、 IgG4 水平 两组患者的IgG 水平比较， 差异无统计学意义 （P ＞0．05）； 观察组的IgG4 水平显著高于对照组，差异具有统计学意义 （P ＜0．05）。 见表1。

表1 两组患者的血清IgG、 IgG4 水平比较

表1 两组患者的血清IgG、 IgG4 水平比较

组别 n IgG IgG4观察组 60 12.34±5.02 10.42±4.98对照组 60 13.58±4.78 5.42±3.12 t 1.354 6.384 P 0.179 0.000

2.2 血清IgG、 IgG4 的诊断效能 以临床诊断结果为 “金标准”， IgG4 诊断ANCA 相关性血管炎的准确率、 灵敏度、 特异度均显著高于IgG 诊断ANCA 相关性血管炎， 差异有统计学意义 （P ＜0．05）。 见表2、 表3。

表2 IgG、 IgG4 与临床诊断结果的比较 （n）

表3 IgG 与IgG4 的诊断准确率、 灵敏度和特异度比较 ［% （n）］

3 讨论

ANCA 相关性血管炎的发病机制尚未明确， 临床普遍认为与环境因素、 遗传因素以及细菌感染相关［5］， 部分药物亦可引发ANCA 相关性血管炎［6］。 治疗该疾病应以早诊断、 早治疗为原则， 但因该疾病的临床症状和其他自身免疫性疾病相似， 导致部分患者错过最佳治疗时间， 影响治疗效果。

IgG 以及IgG4 均是免疫球蛋白的一员， 免疫球蛋白作为一种蛋白质， 是B 细胞通过抗原刺激后增殖分化成的浆细胞所产出， 能够特异性地结合与之相对应的抗原， 以此发挥体液免疫功能。 自身免疫性疾病活动期间， 免疫球蛋白含量常显示异常， 表示患者发生急性炎性反应或体液免疫亢进， 进而导致机体组织发生不同程度的损伤［7］。 本研究结果显示， 两组的IgG水平未见显著差异， 观察组的IgG4 水平显著高于对照组， 且IgG4 的诊断准确率高于对照组， 表明血清IgG4 检测可提高ANCA 相关性血管炎的临床诊断效果。 分析原因在于： 正常情况下， 人体血清中IgG4 的含量占总IgG 含量的3% ～6%， 其分泌方式主要为旁路途径激活补体， 如胎盘等， 且该因子对靶抗原的亲和力低， IL－4、 IL－5 等高表达的Th2 型细胞因子均可同时伴有高表达水平的IgG4。 IL－4 是Th2 的应答细胞吸引点，也是诱导IgG4 应答的主要细胞。 当Th2 型细胞因子IL－4 存在时， 机体内的血清IgG4 表达水平则会显著升高［8］。 IgG4 虽然不是一个特异性抗体， 但是在ANCA 相关性血管炎患者中表达水平有明显提高， 因此有助于ANCA 相关性血管炎的诊断。

综上所述， IgG4 作为一个免疫球蛋白亚型， 在ANCA 相关性血管炎患者的血清中表达较高， 有助于ANCA 相关性血管炎疾病的临床诊断。