不同贮藏方式对四大药材品质的影响

肖淑贤，方玉强，李飞鹤，侯沁文，雷振宏，王玉龙*，王旭峰

(1.山西振东道地药材开发有限公司，山西 长治 047100； 2.君安百合仓储科技(北京)有限公司，北京 100020；3.山西振东制药股份有限公司，山西 长治 047100； 4.长治学院，山西 长治 047100)

党参、黄芪、地黄、款冬花均为山西道地药材，考虑党参、黄芪等4种药材在长期贮藏过程中会出现返潮、发霉、虫蛀、泛糖、成分降解等问题[1]，品质难以长期保持，故研究不同贮藏条件下的四大药材品质影响，具有重要实际意义和实用价值。

低温和气调是国际公认的绿色贮藏技术，可较好地保持粮食品质，抑制粮食有害生物的生长。气调贮藏主要应用在小麦、稻谷和玉米上，而药材上应用较少。君合百安仓储科技(北京)有限公司生产的气调剂，则是利用物理反应，通过增加氮气，置换出空气中的氧气，在包装袋中形成低氧或绝氧状态，降低呼吸消耗，杀灭害虫，抑制霉菌的生长，从而达到保证药材品质。目前，鲜见对不同的含水量、温度、贮藏时间、贮藏方式等对党参有效成分的影响交互研究[2]。本文研究了不同贮藏方式和贮藏时间下，气调贮藏、常规贮藏和密封贮藏3种方式对党参、黄芪、地黄、款冬花4个药材贮藏品质的影响，为实际生产提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 供试样品

供试党参、黄芪、地黄、款冬花均由山西振东道地药材开发有限公司提供样品。试验于2015年3月20日至2017年10月20日在山西振东道地药材开发有限公司指定仓库进行，试验地海拔1 052 m。

1.2 仪器与试剂

沃特世UPLC高效液相色谱仪；PDA检测器；Kromasil 100-5-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；C18保护柱(20 mm×4.6 mm，5 μm)；Empower II色谱工作站(美国Waters公司)；高速万能粉碎机(北京中兴伟业仪器有限公司)；DK-S26电热恒温水浴锅(上海森信实验仪器有限公司)；电热鼓风干燥箱 (上海实验仪器有限公司)；UV-1800紫外-可见分光光度计(上海美谱达仪器有限公司)；超纯水仪(上海优普超纯水公司)；超声波清洗机(浙江宁波超声波仪器公司)。

试剂对照品苍术内酯Ⅲ(20 mg；纯度为>98%，上海融禾医药科技有限公司)。甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯，水为超纯水。本试验所用其他试剂均为分析纯。

1.3 检测方法

1.3.1 色谱条件

苍术内酯Ⅲ色谱柱为Agilent C18柱(150 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相为甲醇∶水(65∶35，V/V)，流速1.0 mL·min-1，检测波长为220 nm。党参炔苷色谱柱为Agilent C18柱(150 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相为乙腈∶水(28∶72，V/V)，流速1.0 mL·min-1，检测波长为267 nm。在选定条件下，色谱峰能达到基线分离，苍术内酯Ⅲ和党参炔苷与相邻色谱峰的分离度大于1.5。

1.3.2 检测波长选择

对苍术内酯Ⅲ及党参炔苷的甲醇溶液作全波长扫描。结果显示，对照品苍术内酯Ⅲ在220 nm处有最大吸收峰，将苍术内酯Ⅲ检测波长定为220 nm，党参炔苷检测波长定为267 nm。

1.3.3 线性范围考察

对照品制备。精密称取对照品苍术内酯Ⅲ 6.22 mg，置于100 mL量瓶中，甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，即得0.062 2 mg·mL-1苍术内酯Ⅲ溶液，进样体积分别为1、3、5、7、10、15 μL。以峰面积(y)对进样量(x)进行回归，得回归方程y=44.67x-0.257 1，相关系数R2=0.999 9，以峰面积值(y)对进样量(x)作图得到直线，说明苍术内酯Ⅲ在0.06～1.0 μg范围内与峰面积呈良好的线性。

1.3.4 供试品溶液制备

将党参药材粉碎过0.425 mm筛，16种药材共制样品粉末16份。

苍术内酯Ⅲ供试品溶液制备。精密称取党参粉末5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL后称重，超声处理30 min，冷却后再称重，用甲醇补充减失的重量摇匀，滤过，精密量取续滤液25 mL，减压蒸干，残渣用甲醇溶解并转至5 mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45 m)过滤，取续滤液即得。

党参炔苷供试品溶液制备。精密称取党参粉末0.5 g，加入25 mL甲醇，精密称重。超声处理30 min，放冷称重，加甲醇补足减失的重量。摇匀静置，取上清液，用微孔滤膜(0.45 μm)过滤，取续滤液即得。

1.4 处理设置

以党参等4种药材饮片为试验材料，贮藏方式分为自然存放(C1)、常规密封(C2)、气调密封(C3)3个处理，每处理又设3个不同贮藏时间6个月(S1)、12个月(S2)、18个月(S3)，裂区设计，贮藏方式为主区，贮藏时间为副区，共9个处理，每处理重复3次，具体处理及编号见表1。6个月为从2015年6月至2015年12月，12个月为从2015年6月至2016年6月，18个月为从2015年6月至2016年12月。随机选取色泽正常、无虫霉现象的党参、地黄、黄芪药材各3.5 kg，用切片机切成0.5 cm左右厚度均匀的片，充分混匀，然后从中随机称取3 kg的药材片，平均分成10份，每份0.3 kg，随机各选择3份分别进行气调密封(加气调剂)、常规密封和自然存放处理(常规密封后进行扎眼处理)，剩余1份作为留样。款冬花直接分成10份，其后操作如同党参。

1.5 指标测定

1.5.1 贮存过程中外观性状变化分析

气调贮存试验期间，要对各试验处理药材的变色、虫蛀、发霉、泛油等变质现象进行动态观察。详细记录各试验处理下的药材的变质程度。变质程度大致分为轻微、一般、较重、严重4个程度等级，其中个别出现变质现象的记录为轻微等级，1/3以内出现的记录为一般等级，1/2以内出现变质现象的记录为较重等级，1/2以上则记录为严重等级。

1.5.2 贮存过程中主要成分变化分析

分别测定气调密封、常规密封和自然存放处理间主要成分含量，比较不同处理对4个药材主要活性成分的影响。党参、黄芪、地黄、款冬花检测指标依次为党参水分、党参浸出物、苍术内酯Ⅲ、黄芪水分、毛蕊异黄酮葡萄、地黄水分、梓醇、毛蕊花糖苷、款冬花水分、款冬花浸出物。

1.6 数据分析

通过Excel 2019、SPSS 19.0软件进行整理作图，采用Duncan’s新复极差法进行多重比较。

2 结果与分析

2.1 贮藏前后样品外观对比

贮藏6和12个月时，个别党参样品轻微变质，其他药材贮藏完好。药材贮藏前无变色、虫蛀、发霉、泛油现象，贮藏后样品外观情况见表1。

表1 贮藏后样品的外观品质

2.2 不同药材主要成分含量

2.2.1 描述性统计结果

表2可见，不同贮藏方式和时间处理下的党参、黄芪、地黄、款冬花主要成分含量和水分主要指标差异不同，变异系数在2.1%～30.0%，从大到小依次为毛蕊花糖苷(30.0%)>梓醇(14.5%)>款冬酮(13.2%)>毛蕊异黄酮葡萄(11.8%)>黄芪水分(10.9%)>苍术内酯Ⅲ(10.4%)>款冬花水分(8.5%)>地黄水分(8.2%)>党参水分(5.9%)>党参浸出物(2.6%)>款冬花浸出物(2.1%)。

表2 指标的描述性统计结果

2.2.2 不同贮藏方式和时间对4种药材水分的影响

方差分析表明，不同贮藏方式和时间交互作用对党参、黄芪、款冬花、地黄含水分影响差异不同，其中党参(F=50.917*)、地黄(F=18.811*)、款冬花(F=3.994*)水分含量在0.05水平差异显著。

采用Duncan’s新复极差法进行多重比较。由图1可见，党参水分在常规密封和气调密封12个月显著高于6和18个月的水分，而自然存放下水分随时间的增加而显著升高。黄芪水分在自然存放与常规密封6和12个月时差异不显著，而气调密封18个月显著高于12个月的水分。3种贮藏方式下，地黄水分贮藏6个月显著高于12和18个月。自然存放与气调密封贮藏6和12个月时款冬花水分差异均不显著，常规密封贮藏6个月的水分含量显著高于12个月。

2.2.3 不同贮藏方式和时间对4种药材含量的影响

图2表明，自然存放条件下，党参浸出物随着时间的增加呈持续下降趋势，但差异不显著；常规密闭条件下，党参浸出物表现出先增后降的趋势，但3个时间段浸出物差异不显著；气调贮藏下党参浸出物先增后降，贮藏12个月与6和18个月间差异显著。随着贮藏时间的增加，3种贮藏方式下的党参苍术内酯Ⅲ、浸出物含量均有所下降，但均达药典标准，所以贮藏时间不宜超过18个月。

图2 不同贮藏方式和时间对4种药材成分含量的影响

款冬花在3种贮藏方式下贮藏6个月时，款冬酮较贮藏前有所降低，且均低于药典标准0.07%，贮藏12个月时款冬酮含量接近或高于药典标准。黄芪自然存放和常规密封12个月的毛蕊异黄酮葡萄显著高于18个月，而气调密封贮藏下毛蕊异黄酮葡萄的差异不显著。地黄梓醇不同贮藏时间和方式间差异均不显著。3种贮藏方式下，地黄贮藏6和12个月的毛蕊花糖苷差异不显著，贮藏18个月时，气调密封和常规密封的地黄毛蕊花糖苷显著高于自然存放。

2.2.4 相关性

相关性分析见表3，贮藏时间与黄芪毛蕊异黄酮葡萄呈显著负相关，与地黄水分和款冬花水分呈极显著负相关，与党参水分、款冬花的款冬酮呈极显著正相关。贮藏方式与地黄水分呈显著正相关。党参浸出物与苍术内酯Ⅲ呈显著正相关。党参水分与地黄水分呈显著负相关，与款冬花水分呈极显著负相关，与款冬酮呈极显著正相关。

柱间无相同小写字母表示组间差异显著(P<0.05)，图2同。图1 贮藏方式和时间对4种药材水分含量的影响

表3 各指标的相关性

3 小结

党参药材含水量的多少，是影响其贮藏过程中品质变化的主要因素，对党参药材发生霉变、虫蛀、泛糖、有效成分降低、外观品质改变等影响较为明显[3]。晋小军[4]研究发现，党参含水量低于15%时贮藏是安全的；当含水量超过17%～18%时，贮藏2个月即开始霉变；含水量继续升高时，不到10 d即发生霉变。陈瞾等[5]也指出，真空贮藏党参的最高含水量控制在13%以下可有效防止霉变的发生。中药材含水量越高，虫蛀现象就越严重，如果把含水量控制在一定范围内，即可抑制虫蛀或减少虫蛀的发生[6]。党参含糖量高、贮存条件不适宜时，糖及糖酸物质可被分解，产生糖醛及其类似化合物，而出现颜色变深、质地变软和糖分外渗等现象[6]。禹娟红[2]研究表明，党参药材宜贮藏于通风干燥处，安全相对湿度在65%～75%，安全含水量在10%～13%，而2015版药典规定含水量在16%以下[7]。

本研究发现，不同贮藏方式和贮藏时间交互作用下，4种药材含水量存在差异。党参水分在自然存放、常规密封、气调密封3种贮藏方式下的不同贮藏期间均有显著差异，常规密封和气调密封贮藏12个月显著高于6和18个月的水分，自然存放状态下党参的水分随时间的增加而升高，但均低于安全含水量13%，常规密封和气调密封贮藏更利于保持药材水分稳定。黄芪水分在自然存放与常规密封6和12个月时差异不显著，气调密封18个月显著高于12个月的水分。3种贮藏方式下，贮藏6个月的地黄水分显著高于12和18个月，地黄贮藏12个月时，自然存放、常规密封方式水分最低，贮藏18个月时的水分较贮藏前依次降低30.97%、32.64%、27.73%，气调密封降低最少。款冬花水分贮藏6和12个月时，3种贮藏方式差异均不显著，随着时间增加水分依次降低。

自然存放条件下，党参浸出物随着时间的增加呈持续下降趋势，但差异不显著；常规密闭条件下，党参浸出物表现出先增后降的趋势，但3个时间段浸出物差异不显著；气调贮藏下党参浸出物先增后降，贮藏12个月与6和18个月间差异显著。随着贮藏时间的增加，3种贮藏方式下的党参苍术内酯Ⅲ、浸出物含量均有所下降，但均达药典标准，所以贮藏时间不宜超过18个月。

在自然存放、常规密封状态下，贮藏12个月的黄芪毛蕊异黄酮葡萄显著高于贮藏18个月，与气调贮藏方式的毛蕊异黄酮葡萄差异不显著。自然存放状态下，黄芪毛蕊异黄酮葡萄较气调密封状态下降的更快，所以适宜采用气调密封贮藏，贮藏时间至少为18个月。

地黄梓醇不同贮藏时间和方式间差异均不显著。3种贮藏方式下，地黄贮藏6和12个月的毛蕊花糖苷差异不显著，贮藏18个月时，气调密封和常规密封的地黄毛蕊花糖苷显著高于自然存放。

款冬花贮藏6个月时，3种贮藏方式的款冬酮低于药典标准，可能与夏季高温天气有关，所以款冬花冬季采收后自然存放和气调贮藏均不宜超过6个月。贮藏期影响药材品质的外界因素除温度、湿度外，还有光照、空气、微生物、害虫等8]。款冬花药材品质受贮藏方式、水分和贮藏期等多种因素影响，在贮藏过程中，款冬酮含量不达药典标准还需进一步研究。