酸枣仁珍珠粉胶囊大鼠喂养试验

郭 婉 李 卓 杜显龙 孙雨薇

酸枣仁，味甘，性平，可助眠镇静，养肝敛汗，被医生和患者赞为东方睡果[1]。现代研究表明，酸枣仁具有镇静催眠、抗惊厥、抗焦虑、抗心律失常、降血脂、增强免疫等多种药理活性，并对心肌及脑缺氧、缺血有保护作用[2]。珍珠是一种名贵中药材，富含多种人体需要的氨基酸、钙质、B族维生素及微量元素，具有促进健康、润颜护肤、改善睡眠、延缓衰老的功效[3～5]。酸枣仁珍珠粉胶囊由中药提取物组成，具有改善睡眠的保健功能。为确保食用安全，依据《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)[6]对酸枣仁珍珠粉胶囊进行大鼠30天喂养试验。

1.材料与方法

1.1 材料 酸枣仁珍珠粉胶囊，300mg/粒，人体推荐服用量为4粒/日，内容物为棕褐色粉末。

1.2 试验动物 由长沙开福区东创实验动物科技服务部提供的健康SD大鼠。实验环境温度22～24℃，相对湿度 52%～56%。

1.3 30天喂养试验

1.3.1 剂量组选择与受试物给予方式：取SD大鼠80只，雌雄各占一半，将实验动物随机分四组，对照组及三个受试物组，每组20只，雌雄各半。样品低、中、高剂量分别设为0.50g/(kg·bw)、1.00g/(kg·bw)、2.00g/(kg·bw)(约相当于人体推荐量的25倍、50倍、100倍)。低、中、高剂量受试液配制时分别取样品10.00g、20.00g和40.00g，加蒸馏水定容至200ml，对照组给予等体积蒸馏水。每日灌胃1次，灌胃体积为1ml/(100g·bw)，连续灌胃30天。

1.3.2 实验方法：依照《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)[6]中30天喂养试验操作步骤进行实验。

1.4 统计学方法 用Excel2003版、SPSS 11.0软件进行统计分析。先对数据进行方差齐性检验。若方差齐，采用单因素方差分析进行总体比较，发现差异再进行多个剂量组与一个对照组均数间的两两比较。若方差不齐则对原始数据进行适当的变量转换，满足方差齐性检验后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到方差齐，改用秩和检验进行统计，发现总体比较有差异，采用不要求方差齐性的Tamhane’sT2检验进行两两比较。

2.结果

2.1 30天喂养试验 30天喂养期间，各组动物生长发育良好，未见异常行为和中毒症状，无死亡。

2.2 样品对大鼠体重及食物利用率的影响 喂养期间，各剂量组雌雄鼠各时点体重、末重和增重、评价进食量、每周及总食物利用率与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。

2.3 样品对大鼠血常规指标的影响 与对照组相比，各剂量组雌雄大鼠的血红蛋白、红细胞总数、血细胞比容、血小板数、白细胞总数及分类，差异无显著性(P>0.05)，见表1、表2。

表1 样品30天喂养试验血液学检查结果

表2 样品30天喂养试验大鼠白细胞及其分类检查结果

2．4 样品对大鼠生化指标的影响 各剂量组雌雄大鼠的总蛋白、白蛋白、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素氮、肌酐、血糖、胆固醇及甘油三酯与对照组相比均无显著性差异(P>0.05)，见表3。

表3 样品30天喂养试验生化检验结果

2.5 样品对大鼠脏器重量和脏器/体重比值的影响 由表4、表5可见，各剂量组大鼠的肝、肾、脾、睾丸重量和肝/体、肾/体、脾/体、雄鼠睾丸/体比值与对照组比较，差异均无显著性(P>0.05)。

表4 样品30天喂养试验实验末禁食后大鼠体重及脏器重量结果

表5 样品30天喂养试验大鼠脏体比值结果

2.6 大体解剖及组织学检查结果

2.6.1 大体解剖检查：本试验共检查对照组和各剂量组共80只大鼠，雌、雄各半。剖检后肉眼观察，心、肝、脾、肺、肾、胃、肠、睾丸(卵巢)等主要脏器的颜色、形态结构、大小等均未见明显异常。

2.6.2 镜下检查：本试验共检查高剂量组及对照组大鼠各20只，雌、雄各占一半。①肝脏：被膜完整，肝小叶结构清楚，其中高剂量组1只雄鼠可见肝细胞多发性点状坏死，肝间质有炎性细胞浸润；高剂量一只雌鼠肝间质有少量炎性细胞浸润。②肾脏：被膜完整，肾小球、肾小管结构正常，其中对照组1只雌鼠和高剂量组1只雌鼠肾间质有少量炎性细胞浸润。③胃肠：各层结构清楚，胃肠黏膜上层完整，黏膜下各层未见异常。④脾脏：被膜完整，脾小梁结构正常，红、白髓比例正常，无异常。⑤卵巢：上皮与白膜正常，各级卵泡发育良好，间质未见异常。⑥睾丸：曲精管内各级生精细胞发育良好，间质未见异常。

2.7 小结 以0.50g/(kg·bw)、1.00g/(kg·bw)、2.00g/(kg·bw)剂量的酸枣仁珍珠粉胶囊给SD大鼠灌胃30天，实验期间动物生长发育良好，各剂量组体重、增重、食物利用率、血常规指标、血生化指标、脏器重量及脏器/体重比值与对照组比较，无显著性差异(P>0.05)。大体解剖和组织病理检查未见与样品有关的异常改变。提示该样品30天喂养对大鼠未见明显毒副作用。高剂量组2.00g/(kg·bw)是人体推荐剂量的100倍，在本试验的剂量范围内，酸枣仁珍珠粉胶囊是安全的。

3.讨论

酸枣仁珍珠粉胶囊选用中药组方而成，安全性高。王丽娟等进行了酸枣仁提取物急性毒性实验研究，小鼠灌胃给药340g/kg，相当于成人一次用量的326倍，连续观察14天，小鼠全部存活，无明显毒性反应[7]。赵兴红[8]等人研究了酸枣仁降脂滴丸的毒理作用，小鼠按3ml/10g灌胃，小鼠进食正常，无死亡，连续给药3个月，各项指标均正常。袁根良[9]等人研究了天麻酸枣仁胶囊的毒理学安全性，急性毒性试验未见中毒症状，无动物死亡，三项遗传试验结果为阴性，30天喂养试验与对照组无显著差异。吴家瑜[10]进行了水溶性珍珠粉的毒理实验，包括急性毒性实验、三项遗传实验和大鼠30天喂养实验，证实水溶性珍珠粉属实际无毒级，未见遗传毒性，长期服用是安全的。沈链链[3]等人也进行了珍珠粉的毒理学评价，与吴家瑜[10]的研究结果一致。

本实验以酸枣仁珍珠粉胶囊为受试物进行毒理学研究，采用大鼠30天喂养试验，结果显示连续灌胃30天对大鼠无明显毒副作用。受试物组最高剂量为2.00g/(kg·bw)，相当于人体推荐量的100倍，在本试验的剂量范围内，酸枣仁珍珠粉胶囊是安全的。