益生菌对非酒精性脂肪性肝病患者细胞因子表达及肠道菌群的影响

马幸， 王万里

（郑州市第七人民医院， 河南 郑州450006）

非酒精性脂肪性肝病 （NAFLD） 是指除酒精及其他明确因素之外导致的肝细胞内脂肪含量过剩的慢性肝病， 近年来， 该病患者数量不断增加， 已成为全世界范围内的主要慢性肝病之一， 严重威胁人类健康［1］。 NAFLD 不仅会导致肝病进一步恶化甚至癌变， 还会引发心血管疾病及其他代谢疾病， 甚至会加剧疾病的进程； 反之心血管疾病及其他代谢性疾病也是促使NAFLD 发生的关键因素。 相关研究［2］显示， 益生菌能够直接补充机体肠道益生菌， 以确保肠道菌群平衡。 本研究在复方甘

草酸苷胶囊治疗的基础上采用双歧杆菌乳杆菌三联活菌片治疗NAFLD， 取得了较好的临床效果， 现报道如下。

1 资料和方法

1.1 一般资料选取2017 年1 月至2018 年1 月我院收治的80例NAFLD 患者作为研究对象， 随机分为对照组和研究组各40例。 对照组 中男22 例， 女18 例； 年龄44 ～73 岁， 平均（62.78 ± 6.73） 岁； 病程2 ～7 年， 平均 （4.72 ± 2.14） 年。 研究组中男23 例， 女17 例； 年龄45 ～74 岁， 平 均（62.93 ±6.58） 岁； 病程2 ～7 年， 平均 （4.65 ± 2.27） 年。 另随机选取同期入院健康体检者40 例作为空白组， 其中男21 例， 女19例； 年龄43 ～73 岁， 平均年龄 （61.99 ± 6.67） 岁。 三组在性别、 年龄方面比较无统计学差异 （P＞0.05）， 对照组和研究组在病程方面比较无统计学差异 （P＞0.05）， 具有可比性。

1.2 治疗方法对照组采用复方甘草酸苷胶囊 （北京凯因科技股份有限公司， 国药准字H20080006） 治疗， 餐后口服， 2 粒／次， 3 次／日。 研究组在对照组基础上口服双歧杆菌乳杆菌三联活菌片 （内蒙古双奇药业股份有限公司， 国药准字S19980004）治疗， 口服， 4 片／次， 3 次／日。 两组患者均连续治疗1 个月。

1.3 观察指标分别取三组研究对象晨起空腹状态静脉血5 mL， 分离血清后通过ELISA 法检测IL-10、 IFN-γ 及IL-18；通过荧光定量PCR 检测肠道双歧杆菌 （B） 和大肠杆菌 （E）定量， 并计算B／E 比值， B／E≥1 代表肠道正常菌群的定植抗力处于正常状态， 而B／E＜1 则代表不正常。 对三组研究对象的上述指标进行比较。

1.4 统计学分析采用SPSS 22.0 统计学软件处理数据。 计量资料以±s 表示， 采用t 检验； 计数资料以率表示， 采用χ2检验。 P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组的细胞因子水平比较治疗前， 对照组、 研究组的IL-10 水平显著低于空白组， IFN-γ、 IL-18 水平均显著高于空白组 （P＜0.05）； 治疗后， 对照组、 研究组的IL-10 显著高于治疗前， 而IFN-γ、 IL-18 水平均显著低于治疗前 （P＜0.05）， 且研究组的IL-10、 IFN-γ、 IL-18 水平均显著优于对照组 （P＜0.05）。 见表1。

表1 三组血清细胞因子水平比较 （±s）

表1 三组血清细胞因子水平比较 （±s）

注： 与空白组相比， aP <0.05； 与本组治疗前相比， bP <0.05； 与对照组治疗后相比， cP <0.05。

组别 时间 IL-10 （ng／L） IFN-γ （ng／L） IL-18 （ng／L）研究组 治疗前 17.48±4.01a 60.47±3.12a 59.91±12.38a治疗后 22.81±4.23bc 51.28±2.17bc 20.22±11.33bc对照组 治疗前 17.36±3.86a 60.41±2.95a 59.82±12.21a治疗后 21.04±4.17b 54.92±2.63b 56.42±12.43b空白组 ／ 24.39±4.45 46.24±3.15 47.10±8.59

2.2 三组的肠道菌群水平比较治疗前， 对照组、 研究组的B、E 及B／E 均显著低于空白组 （P＜0.05）； 治疗后， 对照组、 研究组的B、 E 及B／E 均显著高于治疗前， 且研究组的B、 E 均显著高于对照组 （P＜0.05）。 见表2。

表2 三组的肠道菌群水平比较 （±s）

表2 三组的肠道菌群水平比较 （±s）

注： 与空白组相比， aP ＜0.05； 与本组治疗前相比， bP ＜0.05； 与对照组治疗后相比， cP ＜0.05。

组别 时间 B （logcopies／g） E （logcopies／g）B／E研究组 治疗前 8.17±0.23a 8.41±0.16a 0.99±0.06a治疗后 10.42±0.31bc 9.22±0.30bc 1.14±0.46b对照组 治疗前 8.14±0.26a 8.42±0.18a 0.98±0.07a治疗后 9.13±0.32b 8.71±0.19b 1.11±0.44b空白组 ／ 11.31±0.44 9.54±0.37 1.20±0.68

3 讨论

NAFLD 患者多存在因肠道黏膜渗透压升高导致的肠道菌群失衡， 可引发内毒素血症、 细菌过度繁殖等， 进而引发肠道的免疫应答反应， 促使炎性细胞因子的分泌大幅增加， 对肝损伤具有负面影响［3］。 辅助性T 细胞 （Th） 包含Th1、 Th2 等亚群， 对应不同的功能： Th1 可以分泌IL-2、 IFN-γ、 IL-18、 肿瘤坏死因子 （TNF） -α 等细胞因子， 介导细胞免疫过程； Th2可分泌IL-4、 IL-10、 IL-13 等细胞因子， 介导体液免疫过程。有研究［4］表明， NAFLD 可以促进IL-1、 IL-6 和TNF-α 等的表达， 使炎性因子分泌异常， 导致肝脏炎症、 肝脏纤维化。

本研究中， 对照组采取复方甘草酸苷胶囊治疗， 研究组在对照组基础上口服益生菌 （双歧杆菌乳杆菌三联活菌片） 治疗， 结果显示， 治疗后对照组、 研究组的B、 E 及B／E 均显著高于治疗前， 且研究组的B、 E 均显著高于对照组 （P＜0.05），表明益生菌可有效促进NAFLD 患者肠道菌群的恢复。 同时，本研究结果也显示， 治疗后， 对照组、 研究组的IL-10 显著高于治疗前， IFN-γ、 IL-18 水平均显著低于治疗前 （P＜0.05），且研究组的IL-10、 IFN-γ、 IL-18 水平均显著优于对照组 （P＜0.05）， 表明益生菌能够有效促使NAFLD 患者的细胞因子水平恢复正常。 分析原因如下： 因IL-10 抗炎作用最强， 能对很多细胞因子产生反馈抑制， 利于免疫反应处于平稳状态， 降低肝内中性粒细胞浸润及肝内水肿， 因此IL-10 表达增加利于改善肝脏炎性反应； 联合使用双歧杆菌乳杆菌三联活菌片及复方甘草酸苷能够更好地抑制肝内炎症， 减轻肝内水肿程度， IL-10水平也因此提高更明显。 IFN-γ 具有多种活性， 主要作用是诱导炎性反应和激活巨噬细胞［4］； 联合使用双歧杆菌乳杆菌三联活菌片及复方甘草酸苷可有效拮抗NAFLD 所致的IFN-γ 表达上调。 IL-18 是一种炎症趋化因子， 肝脏中由枯否氏细胞诱导产生， 中性粒细胞的功能受到趋化、 激活， 以促使炎性反应发生， 其水平越高， 表明肝病病情越严重［5］。 本研究中， 患者治疗后IL-18 水平呈下降趋势， 提示患者的病情获得明显改善，这也意味着联合使用双歧杆菌乳杆菌三联活菌片及复方甘草酸苷对NAFLD 患者病情的控制效果优于单用复方甘草酸苷。

综上所述， 益生菌能够有效促进NAFLD 患者的细胞因子表达恢复正常， 平衡肠道菌群， 值得临床推广。