脂必泰联合低剂量他汀对冠心病病人HDL功能的影响

王旭兰 ，刘齐元，王群让，王 毅

冠心病(coronary heart disease，CHD)的发病率逐年增加，发病机制十分复杂，其中脂代谢紊乱、脂肪沉积是冠心病发生、发展的重要原因之一[1]。目前降胆固醇脂在冠心病的治疗中有着不可或缺的地位。他汀类药物通过抑制肝脏羟甲基戊二酰辅酶A(3-hydroxy-3-methyl glutaryl coenzyme A，HMG-CoA)还原酶，进而阻碍甲羟戊酸中间体的合成而发挥降胆固醇作用。越来越多的临床试验发现，强化降低低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol，LDL-C)、强化降脂(即将LDL-C降至<1.8 mmol/L或在原有基线水平降低50%以上)能有效减少冠心病病人心血管事件的发生率和死亡率[2]。然而大剂量他汀的“6%效应”和随之而来的不良反应(转氨酶升高、肌溶解等)又限制了他汀的应用[3]。脂必泰是由红曲、泽泻、白术、山楂4味中药提取物配伍组成的纯中成药制剂，因其可降低总胆固醇(total cholesterol，TC)、低密度脂蛋白(LDL)，且副作用较少，还能升高高密度脂蛋白(high density lipoprotein，HDL)和抗动脉粥样硬化作用而逐渐被临床医师接受[4]。有研究提示HDL在冠心病、瓣膜病等疾病和手术状态下失去原有的抗炎、抗凝、抑制动脉粥样硬化、保护内皮功能、促进血管新生等心血管保护作用而变为趋炎HDL，而他汀可以部分改善趋炎HDL的功能[5-6]。本研究探讨脂必泰联合小剂量他汀治疗对冠心病病人血脂及HDL功能的影响及其可能的机制。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2018年1月—2018年7月就诊于陕西中医药大学附属医院心内科的冠心病病人60例作为试验组，年龄42～65(48.75±11.82)岁，同时排除患有未控制的高血压、严重感染性疾病等病人。将病人随机分为他汀组(阿托伐他汀20 mg，治疗8周)和脂必泰组[脂必泰(1粒，2次/日)联合阿托伐他汀(10 mg)，治疗8周]，每组30例。另选取同期于陕西中医药大学附属医院体检的志愿者30名作为对照组，年龄45～60(49.72±12.31)岁。所有参与者签署知情同意书，本研究通过陕西中医药大学附属医院伦理委员会审核批准。

1.2 方法

1.2.1 HDL提取 采集60例冠心病病人用药前、对照组人群体检时及各组试验终点时的空腹静脉血，依据文献[7]采用超高速离心提取HDL。BCA蛋白浓度测定试剂盒(美国，Thermo Scientific公司)测定HDL浓度后放4 ℃冰箱(中国，海尔公司)保存备用，提取的HDL可存放3周。

1.2.2 抗氧化力检测 依据文献[6]通过血浆游离(cell-free)法检测各组HDL抗氧化力：各组取等量(100 μg/mL)的HDL，分别加入10 μL CuCl2(21.7 μmol/L)避光孵育1 h，在孵育30 min时再加入10 μL 2.0 mg/mL 二氯荧光素二乙酸酯(Dichlorofluorescein-diacetate，DCFH-DA)孵育30 min。孵育结束后用酶标仪(美国，Thermo Scientific 公司)连续12 h读取HDL的相对荧光强度值(relative fluorescence units，RFU)，RFU越高提示抗氧化能力越弱。

1.2.3 血管新生功能检测 采用转基因斑马鱼细胞株TG ，由The Zebrafish Information Network (ZFIN，美国)提供，这一基因型细胞株的内皮细胞表达增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein，EGFP)。待斑马鱼长至3～12个月时，让其自然交配产卵(胚胎)，收集和挑选处于1～4细胞期的健康胚胎进行实验。将挑选好的斑马鱼胚胎接种于24孔板内，分别用各组HDL孵育96 h，96 h后用0.05%的苯氧乙酸将胚胎麻醉，然后将每3个胚胎移入一个96孔板的微孔内置荧光显微镜下拍照，通过检查每个胚胎在肠下静脉血管(subintestinal vein，SIV)异位血管生长的多少对血管新生能力进行评价。

1.3 统计学处理 采用SPSS 13.0统计软件进行数据分析。多组间比较采用方差分析，两组间比较采用t检验。以P<0.05为差异有统计学意义。采用Graph pad prism 5 作图。

2 结 果

2.1 3组临床资料比较 3组年龄和性别比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。3组血脂指标比较，差异有统计学意义(P<0.05)。详见表1。

表1 3组临床资料比较

注：TG为三酰甘油；与对照组比较，①P<0.05。

2.2 各组HDL抗氧化能力比较 与对照组(374.23±57.35)比较，试验组治疗前HDL抗氧化能力(999.30±79.62)明显减弱；治疗后他汀组(742.73±87.75)和脂必泰组(687.20±98.64)HDL抗氧化能力较治疗前均改善。详见图1。

与对照组比较，＊ P<0.05；与试验组(治疗前)比较， # P<0.05。

2.3 HDL对斑马鱼胚胎SIV异位血管新生的影响 与对照组比较，试验组(治疗前)HDL抑制斑马鱼胚胎SIV异位血管的血管新生，他汀组和脂必泰组HDL促进斑马鱼胚胎SIV异位血管新生。详见图2。

图2 HDL对斑马鱼胚胎SIV异位血管新生的影响

3 讨 论

本研究显示，冠心病病人的HDL抗氧化能力较正常HDL减弱，其促进斑马鱼胚胎SIV异位血管新生的能力也较正常HDL减弱，常规剂量他汀治疗及低剂量

他汀联合脂必泰治疗均可一定程度改善冠心病病人HDL抗氧化能力及促进斑马鱼胚胎SIV异位血管新生能力，且常规剂量他汀治疗与低剂量他汀联合脂必泰治疗比较差异无统计学意义(P>0.05)。提示就分子生物学层面，脂必泰联合低剂量他汀与常规剂量他汀在冠心病病人的应用中疗效接近。

多项关于他汀的大规模临床试验均证实，胆固醇水平的降低程度与冠心病病死率及总死亡率呈负相关[8]。他汀类通过降低LDL-C水平，降低脂核巨噬细胞数和斑块脂质含量，进而减小斑块体积、降低斑块硬度和增大血管腔。此外，有研究显示他汀还具有促进内皮细胞生成一氧化氮(NO)和改善内皮功能；抑制血管平滑肌细胞和巨噬细胞增殖；抗炎、抗氧化、抗凝和促进血管新生等作用[9-11]。随着研究的深入，他汀类药物广泛应用于临床，但是与中、低剂量他汀治疗比较，大剂量他汀并没有显著降低胆固醇(他汀类药物的“6 规则”， 即他汀类剂量加倍，LDL-C只降低 6%)，但其肝损伤、肌痛等副作用发生率增加[12]。

脂必泰是由红曲、山楂、泽泻、白术4味中药提取物配伍组成的纯中成药制剂，因其副作用较少，且具有降低TC、TG、LDL-C、载脂蛋白B100，升高高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白A1等调脂和抗动脉粥样硬化作用，脂必泰联合低剂量他汀治疗逐渐被临床医生接受[13]。本研究结果显示，脂必泰联合低剂量他汀可以部分改善冠心病病人HDL抗氧化能力和促进斑马鱼胚胎SIV异位血管新生的能力，而且脂必泰联合低剂量他汀与常规剂量他汀治疗效果比较差异无统计学意义(P>0.05)。

综上所述，在分子生物学机制上，脂必泰联合低剂量他汀在冠心病病人中的应用是有效的，但尚待大型的临床研究进一步验证脂必泰联合他汀治疗的有效性和安全性。