血清β2-微球蛋白、尿微量白蛋白、尿N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶联合检测在高血压早期肾损伤诊断中的临床价值*

王海峰,东 淳 ,李春梦

1.武警陕西省总队医院(西安 710054)；2.陕西中医药大学(西安 712046)；3.陕西省中医医院(西安 710003)

高血压是一种常见的、严重危威胁人类健康的心血管疾病，根据国家心血管病中心发布的《全国高血压控制现状调查》显示：目前我国高血压患病率已达23.2%，但其知晓率不及50%，治疗率为40%，控制率仅15.3%，我国高血压患者达5.17亿，预计2025年全球将有10.5亿高血压患者。高血压病变可累及心、脑、肾等重要器官，引起严重并发症，其中高血压肾损伤是严重并发症之一，如不及时治疗，及时控制血压，错过早期治疗阶段，肾损伤发展到不可逆状态，最终发展为肾衰竭，其结局或依靠肾透析或肾移植，严重影响患者的生存质量，给患者带来巨大的经济压力。为了早期发现高血压引起的肾损伤，本研究旨在联合检测血β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)、尿微量白蛋白(Microalbuminiria,MAU)、尿N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(N-acetyl-β-glucosaminidase,NAG)，为早期诊断、治疗、预防、疗效判断提供科学依据。

资料与方法

1 一般资料 选取本院2018年3月至2019年5月心血管内科住院已确诊为原发性高血压患者90例，临床资料进行回顾性分析，此为试验组。男62例，年龄42～76岁，女28例，年龄46～78岁，高血压诊断标准按照WHO和《中国高血压防治指南2005年修订版》制定标准[1]，排除既往肾病史、糖尿病病史及1周内使用肾毒性药物等。试验组中单纯性高血压60例，为单纯组，男42例，年龄42～62岁，女18例，年龄46～58岁；高血压肾损伤30例，为肾损伤组，男20例，年龄46～76岁，女10例，年龄48～78岁，高血压肾损伤诊断标准依据《中国高血压防治指南》和《临床肾病学》诊断[2]。另选择50例健康体检人群为对照组，男30例，女20例，年龄26～38岁，收缩压及舒张压分别为(102.4±13.2)mmHg、(69.2±7.6)mmHg，除外肾病史、糖尿病史、高血压及近期服用肾毒性药物等。试验组与对照组、单纯组与肾损伤组的性别和年龄均无统计学差异(P>0.05),具有可比性。

2 实验方法

2.1 血清β2-MG标本：要求空腹8～12 h静脉采血3～4 ml于真空干燥试管中，3000 r/min离心10 min,取血清测定，血清标本淡黄色、澄清，满足了实验标本要求。

2.2 MAU与尿NAG标本处理：所有参与者留取晨尿8～10 ml于干燥试管中，离心机3000 r/min离心10 min,静置后取上层尿液测定。

2.3 实验要求的测定：项目均严格执行标准实验操作规程(SOP)操作，4 h内完成测定，并进行当日室内质控测定，室内和室间质评在控，确保实验结果准确可靠，重复性好。

2.4 血清β2-MG测定：采用免疫比浊法，试剂由山东淄博科技生物产品有限公司提供，仪器为日立7600全自动生化分析仪，以 血β2-MG≥2.9 mg/L为判断统计阈值。

2.5 MAU测定：实验仪器SLEMENS BN-Ⅱ全自动特蛋仪，所用试剂由德国西门子医学诊断产品有限公司提供，实验原理散射免疫比浊法，以 MAU≥31 mg/L为实验统计阈值。

2.6 尿NAG测定：采用速率法，试剂由宁波美康生物科技产品有限公司提供，仪器为日立7600全自动生化分析仪，以 尿NAG≥12.6 U/L为阳性阈值。

结 果

1 试验组与健康对照组血清β2-MG、MAU、尿NAG检测比较 见表1。试验组血β2-MG、MAU、尿NAG水平非常显著高于对照组，差异具有明显统计学意义(P<0.01)。

表1 试验组与对照组血β2-MG、MAU、尿NAG检测比较

2 肾损伤组与单纯组清β2-MG、MAU、尿NAG检测比较 见表2。肾损伤组血β2-MG、MAU、尿NAG水平显著高于单纯组，差异具有统计学意义(P<0.01)。

表2 肾损伤组与单纯组血清β2-MG、MAU、尿NAG检测比较

讨 论

高血压肾损伤是由于长期的高血压所致肾功能损伤。高血压使得血管内压力增高，导致蛋白、血细胞漏出，对肾脏滤网系统造成破坏，如不及时控制血压，造成滤网系统破坏难以逆转，是导致不可逆肾损伤甚至肾衰竭的原因[3]。长期高血压导致动脉硬化，肾小球的血管也随之动脉硬化，则会引起肾功能障碍，临床上高血压很多年不出现肾功能障碍是因为肾脏有代偿功能，失代偿之后，疾病晚期由于病变肾单位越来越多，肾血流量越来越少，肾小球的滤过率(Glomerular filtration rate,GFR)逐渐减少，患者就会出现高血压肾病。肾病是高血压最为常见的并发症[4]。高血压肾损伤最终导致尿毒症或肾衰竭，南京军区南京总医院肾病研究所对13519例肾活检病例分析发现：良性/恶性高血压肾硬化占0.46%，随着疾病谱的变化，高血压肾硬化发生率逐渐上升，其发生率为5%～10%，死于肾功能衰竭的发生率为1%～2.5%[5]。然而肾脏具备超强的代偿功能，在肾小球受损早期或轻度损伤时，肾功能70%失去功能，还有30%正常的时候，血中BUN、肌酐(Creatinine，CR)仍可维持在正常水平，只有在严重的肾小球损害，一般肾小球滤过率(GFR)降低50%以下时，血中BUN、CR水平才明显升高，从而在客观上易于掩盖早期肾损伤，而肾损伤早期发现对高血压肾损伤诊断、早期治疗及预后肾功能恢复又有十分重要意义。

β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)由99个氨基酸构成的多肽，分子量11.8 KD,PI 5.7。它存在于有核细胞的细胞膜上，尤其是富含于淋巴细胞和单核细胞。是细胞中完整组织相容性抗原(HLA)分子的一部分。正常条件下，血中含量极微，生成量较恒定，其主要生理作用为参与识别异己物质和提供杀伤细胞受体的作用。正常人每日产生100～200 mg，β2-MG在血中浓度相当稳定，约为2 mg/L,由于分子量小，且不与血浆蛋白结合，故可自由通过肾小球，但原尿中的β2-MG约99.9%在近端肾小管被重吸收并降解，仅有微量约0.1%随尿液排出体外。β2-MG不受年龄、性别、肌肉等因素影响，在正常人血液和尿液中是极微量的[6]。

沈茜等[7]研究发现：32例高血压患者中，血BUN、CR在生理参考区间时，血、尿β2-MG均高于正常对照组，说明已有了早期肾功能损伤，只不过损伤的部位不同而已，有的损伤肾小球，有的损伤肾小管，有的两者兼之，血、尿β2-MG与肾功能损伤程度相关，治疗血压可得到有效控制，血、尿β2-MG明显下降。Vibert的研究发现，血CR出现异常时，GFR已<50 ml/min，而GFR<80 ml/min时，血β2-MG开始出现异常，血β2-MG可作为肾小球早期损伤的指标。本研究结果显示：试验组90例标本中血β2-MG浓度(8.9±5.8)mg/L，对照组50例标本中血β2-MG浓度(1.6±0.9)mg/L，试验组显著高于对照组；肾损伤组30例血β2-MG水平(20.3±9.2)mg/L，单纯组60例血β2-MG水平(5.0±1.2)mg/L，试验组与对照组、肾损伤与单纯高血压组差异均具有统计学意义(P<0.01)。与以上文献报道结果基本一致。

正常人尿中约有200多种蛋白，主要有：①小分子相对分子质量蛋白：如相对分子质量26 KD α1-微球蛋白(α1-microglobulin,α1-MG)、11.8 KD β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)、14.5 KD溶菌酶(Lysozyme,LZM)、核糖核酸酶及免疫球蛋白(Ig)的Fc片段等；②中相对分子质量蛋白：包含相对分子质量为66 KD的白蛋白(Albumin,Alb)、76.5 KD尿转铁蛋白(Transferrinuria,TRU)；③大相对分子质量蛋白：包括相对分子质量为7000 KD的T-H糖蛋白(Tamm-Horsfall protein,THP)、400 KD的分泌型免疫球蛋白A(Secretory immunoglobulin A,SIgA)、190 KD的免疫球蛋白M(ImmunoglobulinM,IgM)、150 KD的免疫球蛋白G(ImmunoglobulinG,IgG)等。尿中蛋白分为选择性蛋白尿和非选择性蛋白尿，前者以4～9万性对分子质量的白蛋白为主，可伴随抗凝血酶、转铁蛋白和少量β2-MG、Fc片段等，后者以中相对分子质量蛋白和大相对分子质量蛋白为主，如分泌型IgA、IgM、IgG和T-H糖蛋白等。MAU是指尿中蛋白排出量在30～300 mg/24 h范围内，已超出正常上限(30 mg/24 h)但尚未达到临床蛋白尿水平的诊断灰区。郭学清等[8]研究发现：MAU的检测对预测高血压早期肾损伤有重要意义；周小红等[9]研究发现：109例原发性高血压患者MAU显著高于100例正常体检者(P<0.01)；马学侠[10]研究显示：39例高血压Ⅰ级、52例高血压Ⅱ级、29例高血压Ⅲ级与83例健康对照组相比较，尿β2-MG、MAU水平显著升高(P<0.01)；蒋小伟[11]研究显示：原发性高血压肾损伤组与对照组比较，尿微量白蛋白显著升高(P<0.01)。本研究结果显示：试验组90例尿液标本MAU水平(70.8±14.2)mg/L，对照组50例尿液标本MAU水平(15.1±10.2)mg/L；肾损伤组30例尿液标本MAU含量(192.9±86.7)mg/L，单纯组60例尿液标本MAU含量46.6±15.2mg/L，试验组与对照组、肾损伤与单纯组差异均具有统计学意义(P<0.01)。与以上研究结果基本相吻合。

尿NAG是溶酶体酶之一，分子量130～140 KD，人体内含量丰富，主要存在于肾脏，肾皮质含量最高，肾髓质次之，在肾单位近曲小管细胞内含量最丰富。NAG不通过肾小球滤过，尿中酶的含量不受血中同一种NAG酶来源的影响，正常人尿液含量很低[12]。高血压发生时，肾脏血流速度改变引起肾小球缺血、缺氧、溶酶体膜通透性增加，同时，肾小球率过的蛋白质被近曲小管重吸收时，促进了溶酶体的释放，引起尿液NAG含量进一步升高。多项研究表明，高血压早期肾损伤尿NAG显著高于对照组。本研究结果表明：试验组90例尿NAG浓度(30.6±12.3)U/L，对照组50例尿NAG浓度8.9±3.2；肾损伤组30例尿NAG水平(50.2±20.3)U/L，单纯组30例尿NAG水平(15.8±2.6)U/L，试验组与对照组、肾损伤与单纯高血压组差异均具有统计学意义(P<0.01)。

综上所述，高血压患者应定期联合检测血清β2-MG、MAU、尿NAG，以早期发现、诊断治疗高血压造成的肾损伤，提高治愈率，延缓或避免并发症的发生，提高患者生存质量。