血清LDH和α-HBDH在B-ALL患者中的水平及临床意义

许德英，王小利，孙真真，吴玉丹，常永超

(河南科技大学第一附属医院 检验科，河南科技大学临床医学院，河南 洛阳471003)

急性B淋巴母细胞白血病(B- ALL)是一种起源于B祖细胞的恶性克隆性造血干细胞肿瘤，主要发生于儿童和青少年，被认为是该人群中与恶性肿瘤相关的主要死亡原因之一。自20世纪80年代以来，B-ALL患者的临床疗效已逐步改善，儿童和成人的总体完全缓解率(CR)分别为大于95%和60%-85%，总生存率(OS)分别大于80%和小于50%[1,2]。参考1995年欧洲白血病免疫学分型协作组(EGIL)标准[3]，采用多参数流式细胞术，B-ALL的免疫分型又可分为Pro-B(CD19+/CD10-)、Common-B(CD19+/CD10+/CD20±)和pre-B(胞浆cIgM IgM+)3类。乳酸脱氢酶(LDH)是多种生化指标中最有价值的酶类指标之一，且已证实在多种实体肿瘤及血液肿瘤中其含量升高[4]并可影响患者的预后水平[5-7]，由于α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)主要反应的是LDH1和LDH2的活性，所以分析患者肿瘤细胞内LDH及α-HBDH活性，不仅有助于了解肿瘤生物化学的复杂性，而且对于早期临床诊治也有重要评估意义。但是目前血清中LDH和α-HBDH水平在B-ALL中的报道较为少见，故本研究对我院236例初诊B-ALL患者进行回顾性分析揭示其对该疾病的辅助诊断意义，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2018年1月-2019年5月我院初诊未治且未合并其他种类疾病的236例B-ALL患者，均是经过骨髓细胞形态学及流式细胞免疫学分型后的[8]确诊患者，其中男142例，女94例，年龄1-65岁，中位年龄(15.38±1.04)岁，Pro-B 15例，Common-B 177例，Pre-B 44例 。选择同时期正常人群112例作为对照组，其中男67例，女45例，年龄1-57岁，中位年龄(19.24±2.11)岁。通过校正两组研究对象在性别及年龄因素方面的差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

采集初诊B-ALL患者及同时期正常人群3-5 ml空腹静脉血(无抗凝剂)，采用罗氏Cobas8000 c701全自动生化分析仪及其配套LDH、α-HBDH试剂盒(比色法)检测血清中二者含量，所有操作均严格按照试剂说明书进行。本科室LDH、α-HBDH生化指标的正常值范围设定分别为(90-245)U/L、(23-182)U/L。抽取初诊B-ALL患者骨髓标本涂片行瑞氏染色镜检并留取2-4 ml行流式细胞学检测，采用BD FACS Calibur流式细胞仪Cell Quest软件进行分析，B-ALL免疫分型关键抗体CD10、CD19、CD20及胞浆cIgM IgM均购自美国BD公司。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 B-ALL一般病理资料分析

结果显示Pro-B、Common-B和Pre-B分别占B-ALL的6.36%(15/236)、75.00%(177/236)和18.64%(445/236)；其中性别、年龄及α-HBDH水平与B-ALL发育分期间差异存在统计学意义(P<0.05)，而LDH检测水平与其则无统计学意义(P>0.05)；其中Pro-B患者以成年女性为主占66.67%(10/15)，而Common-B和Pre-B患者则以男性儿童为主；LDH检测水平在Pro-B、Common-B和Pre-B分型中75%以上的患者皆超过正常范围，而α-HBDH水平在Common-B和Pre-B则分别有84.18%和76%的患者超过正常范围，见表1。

2.2 B-ALL患者中血清LDH和α-HBDH水平及年龄与性别因素对其影响

112例对照组(正常人群)中血清LDH和α-HBDH平均水平分别为(200.00±4.32)U/L、(155.00±3.40)U/L；236例B-ALL患者的LDH及α-HBDH平均含量分别为(713.10±52.44)U/L、(485.80±35.74)U/L；与正常对照组相比，LDH和α-HBDH血清水平在B-ALL患者中均增高且具有统计学意义，见表2。

LDH血清含量在≤15岁患者中的平均水平为(709.70±63.64)U/L，而在>15岁患者中则为(790.90±144.30)U/L，随着年龄增加LDH含量增加但是二者之间无统计学差异；LDH在男性患者中的平均水平为(818.00±121.50)U/L，女性则为(695.10±75.19)U/L，两者之中男性患者血清LDH含量稍高但无统计学意义。α-HBDH的血清平均水平在≤15岁和>15岁患者中分别为(475.60±41.31)U/L和(579.00±135.80)U/L，在男性和女性患者中分别为(551.50±78.66)U/L和479.30±54.95)U/L；年龄和性别因素对B-ALL患者中α-HBDH水平变化亦无明显的统计学意义，见表2。

表1 B-ALL患者一般病理资料分析(n=236例)

表2 B-ALL患者中血清LDH和α-HBDH水平及年龄与性别因素对其影响

3 讨论

ALL患者一般病理资料分析得出Common-B期最为常见，Pre-B期次之，Pro-B期最少，该现象符合B-ALL疾病的命名原则及发病特征。其中儿童的发病率为70.34%远高于成人，这与同样为亚洲国家的印度基德瓦伊国家癌症研究所报道的69.76%的发病率高度一致[9]，患儿发病高峰年龄在2-5岁之间，且男孩多于女孩，该情况通常被认为是多因素的，包括外源性(如感染)和内源性(如炎症、氧化应激)暴露、遗传易感性、干细胞或祖细胞中相关癌基因的激活以及受孕时亲代基因改组和重组事件等。然而在Pro-B患者中该现象却恰恰相反，但是对该方面的研究甚少，可能受本研究样本量少或所查文献数量有限影响；但大部分临床研究报道显示成人B-ALL的CR及OS均明显低于儿童患者，也可能是由于成人B-ALL患者高发于B淋巴细胞发育的更早期恶性程度较高的缘故。

LDH广泛存在于人体心脏、肝脏及骨骼肌等组织中，可逆地催化丙酮酸与乳酸间转化，由LDH-A和LDH-B两个主要亚基组成，其中LDH-A对丙酮酸具有较高的亲和力，是糖酵解途径中的关键酶。而α-HBDH则是LDH的同工酶，并不是一个独立的酶，已有文献报道[10]在急性白血病患者体内，α-HBDH水平随LDH的水平升高而升高，两者呈正相关性，而且在ALL患者中两者水平明显高于AML患者。

本研究ALL患者血清LDH和α-HBDH水平远高于正常对照组，据估计，与正常细胞相比机体肿瘤细胞异常增殖时，糖利用量多达30倍，产生乳酸量多达40倍且在未考虑氧含量的情况下[11]，而乳酸可促进细胞内信号传导、微环境血管生成及肿瘤优势生长[12]，即LDH-A通过增加乳酸的产生改变肿瘤微环境，这可导致增强免疫抑制细胞，如骨髓源性抑制细胞(MDSCs)、肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)和树突状细胞(DC)；抑制调控细胞凋亡的细胞，如自然杀伤细胞(NK)和细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)，通过促进免疫抑制肿瘤微环境，LDH-A能够促进对化疗/放疗/靶向治疗的耐药性[4]。分子生物学新技术研究表明[13]，由于肿瘤细胞内线粒体机制改变和凋亡能力减弱，促使肿瘤细胞破坏细胞膜释放细胞内酶，故LDH的胞内特性成为反映细胞代谢状态、糖酵解的好氧或厌氧方向、激活状态及恶性转化的非常敏感指标。有研究发现[14]在儿童急淋患者低危组初诊乳酸脱氢酶(S-LDH)明显低于高危组，可客观反映其临床危险度分层。LDH升高已被公认为许多癌症预后不良的生物标志物，与肿瘤生长和增殖现象直接相关，包括肿瘤细胞的维持、转移及存活，因为其可允许肿瘤细胞通过改变肿瘤微环境来抑制和逃避免疫系统。

本研究发现年龄及性别因素对B-ALL患者血清LDH和α-HBDH水平没有直接影响，说明两者在初诊患者中LDH和α-HBDH水平变化的影响微乎其微可以忽略不计，也可能受限于本次研究的样本量。而新英格兰杂志文献报道[15]B-ALL的预后不良因素包括年龄偏大、骨髓受累(特别是原始细胞出现于外周血)或中枢神经(CNS)受累、疾病晚期(Ⅲ期以上)、机体状况差、S-LDH增高等，其中亦并未涉及性别因素。

综上所述，B-ALL初诊患者血清LDH和α-HBDH水平明显偏高，所以及时检测二者含量可及早给临床诊断治疗提供依据，密切监测二者水平变化还可有助于观察病情和疗效，对判断预后也具有重要临床意义。