丙肝病毒核心抗原检测的临床价值及其与HCV-RNA、ALT、AST的关系研究

刘英超 张秋月 刘琳 任更朴

丙型肝炎病毒（hepatitis C virus, HCV）是单股正链RNA病毒，人体感染后可以引起丙型肝炎（hepatitis C, HC），我国人群感染率约为2.8%[1]，多数无明显临床表现，发病隐蔽，且易转为慢性。HCV-RNA检测阳性是HCV感染诊断的金标准[2]，经常作为临床选择抗病毒治疗和监测疗效的依据。而丙氨酸氨基转移酶 （ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）异常提示HCV感染发展到丙型肝炎，如不积极治疗，可能会进一步进展为肝硬化，甚至肝癌，一般预后较差[3]。由于HCV变异性较高，针对HCV的疫苗研发比较困难[4]，因此，早期诊断是防止HCV传播、延缓丙肝发展的重要手段。但由于临床基因扩增实验室建设要求较高，设备投入较大，实时定量PCR检测HCV-RNA不能得到更广泛的应用。临床上常见的HCV检测项目是丙肝核心抗体（HCV-Ab）和丙肝核心抗原（HCV-cAg）检测。本研究通过对HCV-cAg和HCV-Ab阳性标本进一步检测HCV-RNA、ALT、AST，观察两者检测结果之间的差异，并进一步探讨HCV-cAg检测的临床价值。

对象和方法

1 检测对象 选取2017年～2018年门诊及住院患者，留取经ELISA检测HCV-cAg阳性标本112例，男性60例，女性52例，平均年龄（49.86±15.81）岁；留取经化学发光法检测HCV-Ab阳性标本205例，男性110例，女性95例，平均年龄（47.35±17.46）岁。两组研究所选病例年龄、性别无显著差异，且均未进行抗病毒治疗，排除患有其它肝脏疾病可能。

2 方法

2.1 血清HCV-cAg检测：采用山东莱博生物科技有限公司提供的 HCV-cAg ELISA试剂盒，实验操作完全按照试剂说明书要求和实验室操作规程，应用TECNA酶标仪测定OD值，S/CO值＞1判定结果为阳性。

2.2 血清HCV-Ab检测：应用LIAISON索灵（意大利）全自动化学发光分析仪测定，原厂试剂，结果＞1.0判定为HCV-Ab阳性。

2.3 HCV-RNA 定量检测：采用深圳匹基生物工程有限公司提供的 HCV 核酸扩增（PCR）荧光定量检测试剂盒，利用美国 ABI 公司7500实时 PCR 分析系统进行定量分析，结果＞500 copies/mL，判定为HCVRNA阳性。

2.4 ALT、AST测定：应用罗氏C701生化分析仪检测，其正常参考值范围为0～40 IU/L。ALT、AST任一检测结果＞40 IU/L判定为肝功能结果异常。

3 统计学处理 应用 SPSS25.0软件，计数资料采用χ2检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

结 果

1 HCV-cAg、HCV-Ab与HCV-RNA检测结果的关系112例HCV-cAg阳性标本中，HCV-RNA检测阳性例数为95，阳性率为84.8%；205例HCV-Ab阳性标本中， HCV-RNA阳性例数为142，阳性率为69.3%。HCV-cAg阳性标本中的HCV-RNA阳性率显著高于HCV-Ab阳性标本（P＜0.05），见表1。

表1 HCV-cAg、HCV-Ab与HCV-RNA检测结果的关系

2 HCV-cAg和HCV-Ab与肝功能的关系 112例HCV-cAg阳性病例中肝功能（ALT、AST）异常70例，异常率为62.5%；205例HCV-Ab阳性病例，肝功能异常例数为95，异常率为46.3%，HCV-cAg阳性病例中肝功能损伤者显著高于HCV-Ab阳性病例（P＜0.05），见表2。以上提示HCV-cAg阳性能更好的反应肝功能的状态，对临床诊疗效果评价有更重要的意义。

表2 HCV-cAg、HCV-Ab与肝功能的关系

3 HCV-cAg 结果S/CO值与HCV-RNA、肝功能的关系 HCV-cAg检测结果S/CO值在1.01～5.00，5.01～10.00，10.01～15.00和＞15.00四个区间，HCV-RNA阳性例数和阳性率分别为17（68.0%），33（86.8%），32（91.4%），13（92.9%），肝功能异常例数和异常率分别为8（32.0%），23（60.5%），27（77.1%），12（85.7%），见表3。HCV-cAg阳性结果S/CO值越高，HCV-RNA 阳性率和肝功能异常比例越高，呈正相关。S/CO值＞5组的HCV-RNA阳性率可达89.7%，显著高于S/CO＜5组（P＜0.05）； S/CO值＞5组的肝功能异常率为71.3%，显著高于S/CO＜5组的32.0%（P＜0.05）。

表3 HCV-cAg 结果S/CO值与HCV-RNA、肝功能的关系

讨 论

丙型肝炎是造成慢性肝病的主要原因之一，也是全世界重要的公共卫生问题。据统计，全球大约有1.85亿人感染HCV[5]。由于病毒感染隐匿，早期无明显症状，感染者约有80%可能发展为慢性肝炎，20%进展成肝硬化甚至肝癌，预后较差[6]。迄今为止，HCV感染的发病机制尚不完全清楚[7]，且由于丙肝病毒变异性较高，因此针对HCV的特异性预防疫苗尚未投入临床应用。因此对丙肝患者的早期诊断、早期治疗对控制疾病的进展有重要的临床意义。

目前，实验室常用的HCV检测方法主要是HCVAb和HCV-RNA检测，但两者均存在一定的局限性。由于抗-HCV抗体出现较晚，一般是在感染后70 d甚至时间更长，无法早期诊断HCV感染[8]；其次，HCV-Ab在体内存在时间较长，检测结果阳性也不能判定患者是现症感染还是既往感染；第三，本研究中采用化学方法检测HCV-Ab，灵敏度高，但假阳性率也高[9]，是HCV-Ab阳性与HCV-RNA符合率较低的原因之一。HCV-RNA是病毒复制的重要标志，临床上常把HCV-RNA检测结果阳性判断HCV感染的“金标准”。HCV-RNA出现较早，可用于病毒感染的早期诊断，但对标本保存以及实验技术要求较高，实验条件也较严格，检测设备昂贵，因此一般实验室或基层医院开展有一定困难[10]。

近年来，越来越多的学者开始关注丙肝核心抗体抗原（HCV-cAg）检测，认为是丙型肝炎检测的重要方法[11]，其与HCV-RNA检测结果高度相关[12]，是用于评估活动性HCV感染的HCV-RNA的替代标志物[13]。HCV-cAg与HCV-RNA几乎同时出现，可作为HCV感染的早期检测指标[14]。目前，HCV-cAg检测的ELISA方法简单快捷，对实验条件要求不高，有利于基层推广应用。HCV-cAg与HCV-RNA检测结果存在不符的情况可能与试剂盒不完善，检测结果存在假阳性有关，也可能与标本保存不当，RNA降解有关。本研究中，112例HCV-cAg阳性标本经HCV-RNA检测与HCV-RNA符合率为84.8%，显著高于HCV-Ab的69.3%，但低于文献报道的93.4%[15]。此外，我们发现HCV-cAg阳性结果S/CO值与HCV-RNA 阳性率之间呈正相关，提示HCV-cAg具有预测患者肝功能的临床价值。Lamoury等[16]认为，HCV-cAg检测是简化的丙型肝炎治疗监测方法，对丙型肝炎治疗及预后有重要的指导意义。

综上所述，HCV-cAg检测方法简单快捷，对实验室及仪器设备要求不高，且与HCV-RNA检测结果符合率高，能反映肝功能状态，有利于丙型肝炎的早期筛查、辅助诊断以及疗效评估，具有重要的临床应用价值。

利益冲突 所有作者均声明不存在利益冲突