采血管敞口时间对血清二氧化碳浓度的影响

沈建江，朱小飞，王 瑶，赵 春

江苏省南京中医药大学附属医院/江苏省中医院检验科，江苏 南京 210029

血清二氧化碳(CO2)检测是临床实验室开展的常规项目，也是临床评估酸碱平衡的重要指标[1],体内存在形式主要是碳酸氢根(HCO3-),以及其他形式的CO2，碳酸(H2CO3),游离的CO2等。在人体中，酸碱平衡对体内细胞平衡至关重要。在许多炎症过程中观察到酸中毒，主要是急性病症如败血症，外伤或急性呼吸窘迫[2]；在一些慢性肾脏疾病也可发现血清碳酸氢盐水平降低[3]；还有文献报道，在急性心力衰竭患者中，酸碱平衡的变化与预后密切相关[4]。因此，检测血清CO2水平对临床意义重大。临床医生经常反映血清CO2与实际情况不符，与预期相比偏低，近来也有文献报道，其主要是通过实验原理进行分析[5]，本研究发现，分析前的血清处理方式也有可能对检测结果产生影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 收集江苏省中医院门诊患者2018年6-12月无黄疸、溶血、脂血的血清标本180例。本实验室CO2参考范围22～29 mmol/L，故按照低浓度水平<22 mmol/L，中浓度水平22～29 mmol/L，高浓度水平>29 mmol/L分为低、中、高浓度3组，每组60例。平均浓度依次为(16.19±2.64) mmol/L、(25.38±2.18) mmol/L、(34.59±4.88) mmol/L。

1.2方法 收集CO2低、中、高浓度血清各60例，每例5 mL，分为敞口、闭盖2管。在室温条件下，测定0 h闭盖血清CO2浓度，同时将血清保存于仪器样本待检区，避开风口，随后1、1.5、2 h分别测定敞口、闭盖血清的CO2浓度，每例血清均检测3次，求其平均浓度，避免随机误差。

1.3仪器与试剂 采用Beckman Coulter公司AU5800型全自动生化分析仪进行标本检测，低、高浓度水平质控品为美国伯乐公司产品(批号26420)，CO2测定试剂盒(酶法，批号1216071)、校准品(批号0417021)均由四川迈克生物科技股份有限公司提供。

1.4CO2精密度验证 根据美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP15-A2文件的要求[6]，每天一个批次，每批次对两个浓度水平质控品重复测量3次，连续进行5 d，计算重复性标准差(Sr)、批间方差(Sb2)和实验室内标准差(SL)，验证能否达到厂家的给定标准，以确保检测质量。

1.4.1精密度验证公式

1.4.2结果判读 重复性标准差(Sr)和实验室室内标准差(SL)均小于厂家提供的指标，则验证通过。

2 结 果

2.1精密度试验验证结果表明，CO2精密度达到厂家给定标准，数据见表1。

表1 低、高水平的CO2标本精密度验证结果

2.2低、中、高水平血清CO2浓度随时间变化情况 低、中、高血清CO2浓度随时间延长，水平略有下降，但相差不大。敞口情况下，低、中、高血清CO2浓度随时间的延长，1 h以内浓度下降相对较少，1.5、2 h浓度下降明显增大，见图1～3。

图1 敞口、闭盖情况下高水平血清CO2均值变化趋势

2.3敞口、闭盖情况下低、中、高浓度血清CO2均值比较 CO2浓度检测显示，闭盖情况下，低、中、高血清CO2浓度1、1.5、2 h与0 h比较，差异无统计学意义(P>0.05)。敞口情况下，低、中、高血清CO2浓度1 h与0 h比较，差异无统计学意义(P>0.05)。敞口情况下，低、中、高血清CO2浓度1.5、2 h与0 h比较，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

图2 敞口、闭盖情况下中水平血清CO2均值变化趋势

图3 敞口、闭盖情况下低水平血清CO2均值变化趋势

表2 低、中、高浓度敞口、闭盖血清均值

注：与敞口0 h检测结果比较，*P<0.05；与敞口0 h检测结果比较，#P<0.01。

2.4低、中、高敞口血清CO21.5、2 h浓度变化率比较 计算低、中、高敞口血清CO21.5、2 h的浓度变化率，组间比较显示差异无统计学意义(P>0.05)，见表3。

表3 敞口1.5 h、2 h血清CO2浓度变化率

3 讨 论

在临床工作中，经常有医生反馈CO2浓度与临床不符合，结果相对偏低，检验人员通过实验室室内质控和实验室间比对，结果显示均满足要求，这时候考虑可能为血清前处理过程的问题。由于血清CO2浓度检测是常规项目，大多数患者都会检查，本院检验科能够保证血清的及时离心，但是由于标本量太大，血清大部分时间处于仪器的待检区，CO2浓度随时间的延长而降低。实验结果表明，血清闭盖保存能较好防止CO2挥发，至少2 h内结果不会有太大偏差[7-8]。敞口血清在1 h内的浓度差异无统计学意义，但随着时间的延长，CO2浓度逐渐降低，表2数据表明其降低的速率与浓度无关，只与血清敞口的时间相关，敞口时间越长，浓度偏低越严重，从而容易给临床造成误判[9-10]。所有临床血清在1 h内检测完毕很难实现，因此根据上述实验结果，笔者建议：(1)血清及时离心，不开试管盖子，放于室温保存，且尽量避免阳光直射。(2)AU5821检测速度为4 900次/小时，根据测试速度，合理安排上机样本，尽量在开盖后1 h内检测完毕。(3)血清检测完毕后及时盖上盖子，避免血清与空气的直接接触，导致CO2的挥发。