mmLDL通过p38 MAPK通路上调小鼠肠系膜动脉ET受体*

谢 希， 陈 琛， 林 杰， 汤宏霞， 秦旭平， 李 洁△

（1南华大学附属郴州医院，郴州市第一人民医院，湖南郴州423000；2南华大学药物药理研究所，湖南衡阳421001）

弱氧化修饰低密度脂蛋白（minimally modified low-density lipoprotein，mmLDL）是指载脂蛋白B结构完整、氧化程度轻微的低密度脂蛋白（low-density lipoprotein，LDL），它可以促进单核细胞与内皮细胞黏附；促进血管平滑肌细胞迁移和增殖；促进氧化型低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein，oxLDL）形成，从而促进泡沫细胞的产生［1-3］；可以损伤内皮细胞导致免疫细胞浸润到血管壁，随后发生脂质沉积和炎症反应［4］，产生活性氧簇（reactive oxygen species，ROS）和炎性细胞因子。这一系列反应促进动脉粥样硬化的形成。

p38 MAPK是动脉粥样硬化过程中一种常见的炎症通路［5］，参与炎症信号传导，调控细胞黏附分子，调节白细胞介素1β（interleukin-1β，IL-1β）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、IL-6等炎症介质的产生［6］，增强血管对血管内皮生长因子和ROS的敏感性，激活NF-κB通路，NF-κB是MAPK通路下游一个核内转录因子，具有明显的增殖、抗凋亡和促炎作用，NF-κB途径的激活在炎症过程中起重要作用［7-8］。在IL-6家族中，IL-6是主要的促炎细胞因子，IL-6信号通路包括糖蛋白130/膜结合IL-6受体通路和糖蛋白130/可溶性IL-6受体通路，分别称为经典信号和反式信号［9］。有研究表明，细胞内MAPK信号通路在调节血管内皮素受体表达中起重要作用［10］。

内皮素（endothelin，ET）系统是由受体及其配体组成，是调节血管张力和血压的重要部分，在心血管发病机制中的发挥重要作用。受体调节是通过改变受体密度和（或）亲和力及靶细胞敏感性来维持组织内稳态的一个重要因素［11］。ET-1是体内最强的血管收缩剂之一，并且引起的收缩作用持久。内皮素受体分为A型（ETA受体）和B型（ETB受体）两种亚型。ETA受体在血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）上表达，主要调节血管收缩和细胞增殖［12］，并与MAPK通路的激活有关［10］。ETB受体分为ETB1和ETB2两类：ETB1受体位于内皮细胞，通过诱导前列环素I2（prostacyclin I2，PGI2）和一氧化氮（nitric oxide，NO）的释放起血管舒张作用；ETB2受体表达于VSMCs并介导血管收缩反应。在正常生理条件下，ETB2受体基本不表达，不引起收缩效应［13］，而在病理条件下，如缺血性心脏病［14］、肺动脉高压［15］和动脉粥样硬化患者［12，16-17］，血管平滑肌 ETB2受体表达明显增加，并且介导血管收缩作用明显增强。一般情况下我们说的ETB受体指的是ETB2受体。未见文献报道mmLDL对在体动物动脉ETA受体的作用，但我们已经发现小鼠尾静脉注射mmLDL可以上调肠系膜动脉 ETB受体［1，3］。本研究首次考察小鼠尾静脉注射mmLDL是否通过激活p38 MAPK通路上调肠系膜动脉VSMCs中的ETA受体和ETB受体，以及mmLDL对IL-6的影响。

材料与方法

1 mmLDL的制备

4℃条件下，将0.2 g/L的LDL置于加入了1 μmol/L FeSO4的PBS液体中氧化96 h，最后使用0.25 mmol/L EDTA终止该反应即可生成mmLDL［1，18］。将mmLDL产物使用硫代巴比妥酸反应物（thiobarbituric acid reactive substance，TBARS）法和琼脂糖凝胶电泳法进行鉴定。TBARS法检测结果显示，丙二醛样结构的浓度为（10.95±0.08）μmol/（g LDL）；0.8%的琼脂糖凝胶电泳结果显示，mmLDL的电泳迁移率是LDL的（1.67±0.01）倍。制备好的mmLDL于4℃冰箱避光保存，2周内用完。

2 主要试剂

LDL、ETB受体激动剂角蝰毒素6c（sarafotoxin 6c，S6c）、二甲亚砜（dimethyl sulfoxide，DMSO）和BQ-788购于Sigma；抗ETA受体抗体、抗ETB受体抗体、抗p38 MAPK抗体、抗NF-κB p65抗体、抗p-NF-κBp65抗体、辣根过氧化物酶标记的GAPDH单克隆抗体、抗IL-6抗体及辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔和山羊抗小鼠IgG购于Pierce Biotechnology；ET-1购于Enzo；抗p-p38 MAPK抗体购于Cell Signaling Technology；Tween 20和IL-6 ELISA试剂盒购于Proteintech Biotechnology；小鼠oxLDL ELISA试剂盒购于北京诚林生物科技有限公司；SB 203580购于Med-Chem Express，需用DMSO初溶。

3 主要仪器

DMT 620微血管张力测定仪（Danish Myo Technology A/S）；SZ51立体显微镜（OLYMPUS）；显微手术解剖工具（World Precision Instruments）；优普纯水机（成都优普纯水设备有限公司）；电泳/蛋白转印系统（大连竞迈生物科技有限公司）；SW-CJ-2FD型双人单面净化工作台（苏州净化设备有限公司）；WX3000P实时荧光定量PCR仪（Stratagene）；Image Gauge 4.0（Fuji Photo Film）。

4 实验动物及分组

8～12周龄的SPF级昆明小鼠共140只，体重25～30 g，雌雄均可，购买于湖南斯莱克景达实验动物有限公司，实验动物许可证号为SCXK（湘）2016-0002。适应性喂养7 d后用于实验研究。

动物随机分为正常对照（生理盐水，normal saline，NS）组（尾静脉注射NS）、mmLDL组（尾静脉注射 mmLDL）、mmLDL+SB 203580组（尾静脉注射mmLDL及腹腔注射p38 MAPK通路抑制剂SB 203580）、LDL组（尾静脉注射 LDL）和 mmLDL+DMSO组（尾静脉注射mmLDL及腹腔注射DMSO）。NS组、mmLDL组和mmLDL+SB 203580组每组各40只；LDL组和mmLDL+DMSO组每组各10只。mmLDL 按照 1 mg/kg［3，19］的剂量连续 4 d 进行尾静脉注射，共8次，每隔12 h一次，于96 h采用眼球取血法采血后将小鼠颈椎脱臼处死。以相同方式给小鼠尾静脉注射NS作为正常对照组。为考察p38 MAPK炎症通路是否参与mmLDL对小鼠肠系膜动脉ET受体表达的影响，在每日第一次小鼠尾静脉注射mmLDL的前2 h，腹腔注射p38 MAPK抑制剂SB 203580溶液，剂量为25 mg/kg［20-21］，每隔24 h一次；另设置溶剂对照组（mmLDL+DMSO组）。

5 主要方法

5.1 血管收缩功能检测 小鼠处死后，即刻取出其肠系膜动脉组织并浸入预冷至4℃的Na+-Krebs溶液（成分：无水CaCl21.5 mmol/L，NaCl 119 mmol/L，葡萄糖 5.5 mmol/L，KCl 4.6 mmol/L，NaH2PO41.2 mmol/L，NaHCO315 mmol/L，MgCl21.2 mmol/L）。在立体显微镜下将所需动脉周围组织快速剥离干净，为了去除血管内皮影响，使用0.1%的TritonX-100液灌注血管10 s，随后用Na+-Krebs溶液反复冲洗血管多次，再用20μmol/L 5-羟色胺刺激血管预收缩；最后加入10μmol/L乙酰胆碱进行检验，若所引起的舒张率＜10%，则表明血管内皮去除完全。用显微手术剪将去内皮的肠系膜动脉剪成1.5～2 mm的血管环，每个血管环中穿入两根半径为20μm金属丝，浸入37℃DMT恒温浴槽中，金属丝两端分别与张力微调装置和换能器相连接。张力换能器与电脑PowerLab系统相连，记录血管张力变化。通过微调装置将血管环静息张力调整在1.5 mN左右，每隔15 min更换一次Na+-Krebs溶液，如此平衡1.5 h后2次使用K+-Krebs液（成分：KCl 63.5 mmol/L，无水CaCl21.5 mmol/L，NaCl 60 mmol/L，葡 萄 糖 5.5 mmol/L，NaH2PO41.2 mmol/L，NaHCO315 mmol/L，MgCl21.2 mmol/L）检查血管环活性，当2次测得K+-Krebs溶液所引起的血管环收缩张力均大于1 mN，并且两次收缩幅度差＜10%即说明血管环合格，可继续后续实验。在浴槽中加入相应的试剂：S6c可以特异性激动ETB受体，引起ETB受体介导的血管收缩反应；现无ETA特异性激动剂，研究ETA受体介导的收缩时，先将1μmol/L的S6c诱导ETB受体产生最大收缩，保持S6c与浴槽内血管环接触1 h，收缩曲线逐渐下降，至基线水平，并保持稳定，即认为ETB受体完全脱敏［22-23］，此时加入ET-1，将只激动 ETA受体。为了检查ETB受体是否完全脱敏，在使用S6c后，加入选择性ETB受体拮抗剂BQ-788（0.1μmol/L），再加入ET-1介导血管收缩反应，结果显示加入或不加入BQ-788，ET-1介导的血管收缩量效曲线几乎重叠，说明ETB受体完全脱敏［22-23］。

5.2 ELISA检测小鼠血清中oxLDL和IL-6的表达小鼠眼球取血后，室温自然凝固25 min，3 000 r/min离心20 min，收集上清液，于-80℃保存，如保存过程中出现沉淀，应再次离心。oxLDL和IL-6血清浓度采用小鼠ELISA试剂盒测定。严格按厂家说明书进行操作，于酶标仪上读取吸光度，绘制标准曲线，根据相应标准曲线计算样品中oxLDL和IL-6含量。

5.3 RT-qPCR检测小鼠肠系膜动脉组织的mRNA含量 提取肠系膜动脉组织的总mRNA并检测其密度。两步法逆转录合成cDNA。cDNA第1条链的合成采用20μL反应体系，转录程序为：25℃10 min，42℃ 60 min，65℃ 15 min。50μL qPCR体系的反应程序为：95℃ 5 min变性；94℃ 20 s，55℃ 20 s，72℃30 s，40个循环。反应结束后采用分离曲线分析法以确定PCR产物的特异性。mRNA定量分析采用PCR循环阈值（CT）比较法，以GAPDH为内参照，计算ETA受体、ETB受体和IL-6的mRNA相对表达量。特异性引物序列见表1。

表1 引物序列Table 1.Sequences of the primers for RT-qPCR

5.4 Western bolt法检测小鼠肠系膜动脉组织中的目的蛋白含量 每个样本由3根肠系膜动脉组成，取研磨筛至冰上，将预处理好的血管环段加入组织裂解液和蛋白酶抑制剂，于研磨筛上充分研磨后12 000 r/min离心30 min，仔细收集上清液，使用BCA蛋白分析试剂盒进行蛋白定量。加入1/4蛋白液体积的buffer（5×），100℃水浴10 min使蛋白变性；提取的蛋白用SDS-PAGE进行分离并转移到PVDF膜上，5%脱脂牛奶封闭，分别将I抗（抗ETA受体、ETB受体、p38 MAPK、p-p38 MAPK、NF-κB p65、p-NF-κBp65、IL-6和GAPDH抗体）均按1∶1 000稀释，4℃过夜，II抗为辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔和山羊抗小鼠IgG（1∶5 000稀释）。图像经Image Gauge 4.0分析，并且均采用自身灰度值校正，以目的基因的条带灰度与管家基因的灰度比值表示蛋白的表达水平。

6 统计学处理

实验数据均以均数±标准误（mean±SEM）表示，血管环收缩曲线均通过累加激动剂获得，其收缩值以相对63.5 mmol/L K+预收缩的百分比表示。用Emax（最大收缩百分率）和pEC50（血管达最大收缩效应的50%时相应激动剂摩尔浓度的负对数）来描述血管收缩功能。采用Pearson线性相关分析评估IL-6血清水平与ETB受体和ETA受体介导的血管最大收缩功能之间的联系。Student'st检验用于两组数据之间的比较；单因素方差分析（one-way ANOVA）和Dunnett事后检验比较两组以上数据；双因素方差分析和Bonferroni事后检验用于比较2条曲线在相同浓度处产生的收缩值之间的差异。统计分析及作图使用Prism 5.0软件。以P＜0.05为差异有统计学意义。

结 果

1 动脉内皮去除的验证及血管环对K+的收缩反应

经Triton X-100处理过的血管环由乙酰胆碱引起的舒张率＜5%，表明实验血管内皮去除完全。mmLDL组、mmLDL+SB 203580组、mmLDL+DMSO组、NS组和LDL组实验血管环在K+-Krebs液刺激下均明显收缩，各组收缩张力分别为（4.33±0.38）mN、（4.00±0.28） mN、（4.01±0.27） mN、（4.41±0.34）mN和（4.14±0.31）mN（P＞0.05）。

2 小鼠血清oxLDL水平

ELISA结果显示，mmLDL组和NS组血清中oxLDL 的 浓 度 分 别 为（116.95±2.853）μg/L 和（117.52±3.788）μg/L（P＞0.05），排除oxLDL对实验结果的影响，见图1。

Figure 1.Serumlevels of oxLDL.Mean±SEM.n=8.图1 mmLDL组和NS组小鼠血清oxLDL浓度

3 SB 203580抑制mmLDL对小鼠肠系膜动脉ETB受体功能及表达的增强作用

DMT实验结果显示，mmLDL组S6c诱导ETB受体介导的收缩功能呈浓度依赖性增强，血管收缩量效曲线明显左移，Emax由NS组的（5.85±1.04）%升高为mmLDL组的（127.51±9.99）%（P＜0.01），而pEC50（8.11±0.24和8.00±0.04）无显著差异（P＞0.05）；腹腔注射SB 203580后，S6c诱导的收缩血管的量效曲线右移明显，Emax［（37.42±4.96）%］较mmLDL组明显降低（P＜0.01），pEC50（7.86±0.06）有所降低，但差异无统计学意义（P＞0.05），见图2A。

RT-qPCR实验结果显示，mmLDL组ETB受体的mRNA水平较NS组的1.01±0.05上升为2.19±0.10（P＜0.01）；使用SB 203580后，ETB受体的mRNA水平降为1.29±0.08（P＜0.01），见图 2B。Western bolt实验结果显示，mmLDL组ETB受体的蛋白水平从0.35±0.02 上升为 1.01±0.02（P＜0.01）；腹腔注射SB 203580后，ETB受体的蛋白水平降为0.55±0.01（P＜0.01），见图2C。

Figure 2.The p38 MAPK inhibitor SB 203580 inhibited mmLDL-induced increases in ETB receptor function and expression in mouse mesenteric artery.A：inhibitory effect of SB 203580 on mmLDL-induced blood vessel contraction mediated by ETB receptor（n=8）；B：inhibitory effect of SB 203580 on mmLDL-induced up-regulation of ETB receptor mRNA expression（n=6）；C：inhibitory effect of SB 203580 on mmLDL-induced up-regulation of ETB receptor protein expression（n=4）.Conc.：concentraion；M：mol/L.Mean±SEM.**P＜0.01 vs NSgroup；##P＜0.01 vs mmLDL group.图2 p38 MAPK抑制剂SB 203580拮抗mmLDL对小鼠肠系膜动脉ETB受体功能及表达的增强作用

4 SB 203580抑制mmLDL对小鼠肠系膜动脉ETA受体功能及表达的增强作用

DMT实验结果显示，mmLDL组ET-1诱导ETA受体介导的收缩功能呈浓度依赖性增强，血管收缩量效曲线明显左移，Emax由NS组的（145.12±9.55）%升高为mmLDL组的（232.31±22.79）%（P＜0.01），而pEC50（8.29±0.07 和 8.20±0.02）无 显 著差 异（P＞0.05）；腹 腔 注射 SB 203580后，Emax［（160.34±8.30）%］较 mmLDL组明显降低（P＜0.01），pEC50（8.20±0.06）无明显变化（P＞0.05），见图3A。

RT-qPCR实验结果显示，mmLDL组ETA受体的mRNA水平由NS组的1.01±0.07上升为2.91±0.16（P＜0.01）；使用SB 203580后，ETA受体的mRNA水平降为1.55±0.05（P＜0.01），见图3B。Western bolt实验结果显示，mmLDL组ETA受体的蛋白水平由NS组的0.24±0.04上升为0.94±0.03（P＜0.01）；腹腔注射SB 203580后，ETA受体的蛋白水平降为0.54±0.04（P＜0.01），见图3C。

5 SB 203580抑制mmLDL引起的小鼠血清及肠系膜动脉IL-6水平升高

ELISA实验结果显示，mmLDL组血清的IL-6浓度从 NS组的（238.9±12.44）ng/L上升至（433.6±10.96）ng/L（P＜0.01）；使用SB 203580后，IL-6的血清浓度降为（330.2±12.15）ng/L（P＜0.01），见图4A。

RT-PCR实验结果显示，mmLDL组IL-6的mRNA水平从 NS组的 1.02±0.08上升至 4.11±0.35（P＜0.01）；使用SB 203580后，IL-6的mRNA水平降为1.97±0.17（P＜0.01），见图4B。Western blot实验结果显示，尾静脉注射mmLDL后IL-6的蛋白水平从NS组的 0.29±0.04上升至 0.97±0.08（P＜0.01）；使用SB 203580后，IL-6蛋白水平降为 0.48±0.03（P＜0.01），见图4C。

Pearson相关分析结果显示，IL-6的血清浓度与ETB受体和ETA受体介导的血管收缩Emax值之间均存在正相关（r=0.87，P＜0.05；r=0.97，P＜0.01），见图4D、E。

Figure 3.The p38 MAPK inhibitor SB 203580 inhibited mmLDL-induced increases in ETA receptor function and expression in mouse mesenteric artery.A：inhibitory effect of SB 203580 on mmLDL-induced blood vessel contraction mediated by ETA receptor（n=8）；B：inhibitory effect of SB 203580 on mmLDL-induced up-regulation of ETA receptor mRNA expression（n=6）；C：inhibitory effect of SB 203580 on mmLDL-induced up-regulation of ETA receptor protein expression（n=4）.Conc.：concentraion；M：mol/L.Mean±SEM.**P＜0.01 vs NSgroup；##P＜0.01 vs mmLDL group.图3 p38 MAPK抑制剂SB 203580拮抗mmLDL引起的小鼠肠系膜动脉ETA受体功能及表达增强

6 SB 203580对mmLDL诱导的小鼠肠系膜动脉中p-p38 MAPK和p-NF-κB蛋白水平的影响

Western blot实验结果显示，mmLDL组p-p38 MAPK和p-NF-κB的蛋白水平分别由NS组的0.12±0.02和 0.16±0.03上升为 0.57±0.06和 1.02±0.03（P＜0.01）；使用SB 203580后，p-p38 MAPK和p-NF-κB 的蛋白水平分别降为 0.32±0.04和 0.50±0.05（P＜0.01），见图5。

讨 论

mmLDL作为重要的心血管疾病危险因子，在动脉粥样硬化初期起重要的作用，但其具体机制尚不明确。本课题组在体外研究中采用器官培养方法，发现mmLDL与大鼠冠状动脉共同培养，可以上调ETA受体和ETB受体［22，24］，mmLDL 与大鼠脑基底动脉共同培养，可以上调ETB受体［25］；小鼠在体实验发现mmLDL可以通过ERK1/2途径，增加TNF-α和IL-1β水平，增加小鼠肠系膜ETB受体和α1受体介导的血管收缩功能及表达［2-3］；小鼠在体实验发现mmLDL可以通过PI3K/Akt途径，增加小鼠肠系膜ETB受体介导的血管收缩功能及表达［1］。本研究通过小鼠在体实验研究发现p38 MAPK炎症通路参与mmLDL诱导上调小鼠肠系膜动脉ETA受体和ETB受体，增加炎症因子IL-6血清浓度及血管壁的表达。

VSMCs内ETA受体和ETB受体的表达异常与心血管疾病的发生发展密切相关。ETA受体和ETB受体的上调可致血管收缩增强并减少血液流动，促进VSMCs的增殖和迁移，参与动脉粥样硬化过程并导致心血管相关疾病［13，26-28］。有研究表明，大鼠暴露于二手烟环境中，可激活ERK1/2途径，诱导增加脑基底动脉和冠状动脉ETA受体和ETB受体介导的血管收缩功能及表达［17，29］，从而增加缺血性脑卒中、冠状动脉粥样硬化等疾病的风险。还有报道指出，通过体外器官培养，PM2.5可以增强大鼠支气管ET受体介导的收缩功能及表达，MEK1/2和p38通路参与ETB受体上调，JNK和p38通路参与ETA受体的上调，从而增加肺动脉高压等疾病风险［30］。本研究发现，通过小鼠尾静脉注射mmLDL，可以增强ETA受体和ETB受体介导的血管收缩功能，提高肠系膜动脉ETA受体和ETB受体的mRNA和蛋白表达。实验结果显示，mmLDL+DMSO组和mmLDL组血管收缩的量效曲线几乎重叠，排除了DMSO对本实验结果的影响；LDL组血管收缩的量效曲线虽略高于NS组，但两组间的差异无统计学显著性，排除了LDL对本实验结果的影响；使用K+-Krebs液考察血管的收缩功能，K+-Krebs液在mmLDL组、mmLDL+SB 203580组、mmLDL+DMSO组和NS组引起的血管收缩反应均大于1 mN，且各组间差异没有统计学显著性，排除了实验操作对血管收缩功能的影响。我们同时也检测血压，发现此时血压不受影响。

Figure 4.The p38 MAPK inhibitor SB 203580 inhibited mmLDL-induced increases in mouse serum and mesenteric artery IL-6 levels.A：inhibitory effect of SB 203580 on mmLDL-induced increase in serum IL-6 level（n=8）；B：inhibitory effect of SB 203580 on mmLDL-induced up-regulation of IL-6 mRNA expression（n=6）；C：inhibitory effect of SB 203580 on mmLDL-induced up-regulation of IL-6 protein expression（n=4）；D：the positive linear correlation between the serum IL-6 level and the maximum S6c-induced contraction responses（n=8）；E：the positive linear correlation between the serum IL-6 level and the maximum ET-1-induced contraction responses（n=8）.Mean±SEM.**P＜0.01 vs NS group；##P＜0.01 vs mmLDL group.图4 p38 MAPK抑制剂SB 203580拮抗mmLDL诱导的小鼠血清及肠系膜动脉IL-6水平升高

Figure 5.The p38 MAPK inhibitor SB 203580 inhibited mmLDL-induced increases in p-p38 MAPK（A）and p-NF-κB（B）protein levels in mouse mesenteric artery.Mean±SEM.n=4.**P＜0.01 vs NSgroup；##P＜0.01 vs mmLDL group.图5 p38 MAPK抑制剂SB 203580拮抗mmLDL上调的小鼠肠系膜动脉中p-p38 MAPK和p-NF-κB的蛋白水平

SB 203580是p38 MAPK选择性抑制剂［14］。有研究表明，SB 203580可以预防I型糖尿病动物模型中的糖尿病心肌病，通过抑制p38 MAPK途径降低TNF-α、IL-1β和IL-6水平，减轻心肌炎症反应，改善心脏功能［7］；SB 203580可以预防肺动脉高压的发展，通过抑制p38 MAPK途径降低关键炎症介质IL-6水平，逆转肺血管重构［5］。早期本课题组发现NF-κB信号转导途径参与了mmLDL诱导上调离体VSMCs ETB受体［24］。本研究通过给小鼠腹腔注射p38 MAPK通路选择性抑制剂SB 203580，抑制了mmLDL增加p-p38 MAPK和p-NF-κB蛋白水平，表现为p-p38 MAPK以及p-NF-κB蛋白条带灰度值较mmLDL组明显减弱；表明尾静脉注射mmLDL激活了p38 MAPK通路及下游NF-κB转录因子。

细胞炎症因子IL-6参与慢性炎症疾病病理生理过程，如肺动脉高压［5］、糖尿病［31］、动脉粥样硬化［32］。IL-6可分泌于白细胞、成纤维细胞、脂肪细胞、角质形成细胞和内皮细胞被感染的情况下，并可以被IL-1β或TNF-α等细胞因子诱导［9］。IL-6调节下丘脑-垂体-肾上腺轴，参与单核细胞趋化、血管生成和胶原积累，影响细胞增殖、分化、迁移和存活［33］，加速动脉粥样硬化进程。在本研究中，我们发现尾静脉注射mmLDL明显增加IL-6的mRNA水平、蛋白水平和血清浓度。Pearson相关分析结果显示，血清IL-6水平升高与ETA受体和ETB受体介导的最大收缩百分率呈正相关，表明尾静脉注射mmLDL可诱导炎症反应，炎症反应可能参与了mmLDL上调ETA受体和ETB受体的过程。而SB 203580显著抑制了此作用，表明p38 MAPK通路参与mmLDL上调ETA受体、ETB受体和IL-6表达的过程。

综上所述，mmLDL激活p38 MAPK信号通路及下游的NF-κB转录因子，可以增加肠系膜动脉ETA受体和ETB受体表达，增强ETA受体和ETB受体介导的血管收缩功能，增加IL-6血清浓度及血管壁表达，并且血清IL-6水平升高与ETA受体和ETB受体介导的最大收缩百分率呈正相关。了解这一点，可为心血管疾病诊断及治疗提供新的靶点。