献血者血液筛查中ALT与HBV、HCV的相关性分析

（曲靖市中心血站，云南 曲靖 655000）

丙氨酸氨基转移酶（ALT）主要存在于人体的肝细胞内，是肝脏损伤的重要指标之一，也是我国采供血机构对献血者血液筛查的一项指标。ALT是我站乃至全国采供血机构血液报废的主要原因[1]，所以我们对2015年～2017年献血者血液中ALT、HBsAg、HBV-DNA、HCVAb、HCV-RNA检测结果进行回顾性分析，探讨献血者血液筛查中ALT与HBV、HCV的相关性及ALT筛查在血液安全中存在的意义。

1 对象与方法

1.1 对象：来源于本站2015年1月至2017年12月无偿献血者的116414份血液样本，献血者体检均符合《献血者健康体检要求》。留取的检验血样均符合《血站技术操作规程》。

1.2 仪器和设备：日立7020全自动生化分析仪，FAME24/20（瑞士HAM-ILTON公司），TECAN EVO CLINCIAL 150-8（长沙泰肯生物科技有限公司），Chitas BSS1200全自动核酸纯化仪（上海浩源生物科技有限公司），ABI7500实时荧光定量PCR系统（美国ABI公司）。

1.3 试剂：ALT试剂（日本和光，四川迈克），HBsAg试剂（北京万泰，珠海丽珠），HBV-DNA（上海浩源），HCV-Ab（北京万泰，珠海丽珠），HCV-RNA（上海浩源）。

1.4 方法：ALT采用日本和光和四川迈克两个厂家的试剂用全自动生化仪进行检测，结果判定以＞50 U/L为阳性结果（即ALT异常），≤50 U/L为阴性结果（即ALT正常）。HBsAg采用北京万泰和珠海丽珠两个厂家的试剂用全自动酶免分析仪进行检测，结果判定样本OD值S/CO≥1为HBsAg阳性，样本OD值S/CO＜1为HBsAg阴性。HCVAb采用北京万泰和珠海丽珠两个厂家的试剂用全自动酶免分析仪进行检测，结果判定样本A值＜临界值（CUTOFF）者为HCV-Ab阴性，结果判定样本A值≥临界值（CUTOFF）者为HCV-Ab阳性，样本A值在0.5×（CUTOFF）-1.0×（CUTOFF）者为可疑，进行复查。HBVDNA、HCV-RNA是酶免检测阴性、待查、ALT和TP阳性的样本采用上海浩源的试剂用全自动核酸纯化仪提取核酸，用ABI7500进行扩增，Ct值≤45为反应性，Ct值＞45为非反应性。

1.5 统计学处理：采用SPSS22.0统计学软件对实验数据进行统计分析。组间比较用卡方检验，以P＜0.05为差别有统计学意义，以P＞0.05为差别无统计学意义。

2 结果

2.1 2015年～2017年共检测116414份献血者样本，ALT、HBsAg、HCV、HBV-DNA、HCV-Ab、HCV-RNA检测阳性情况见表1。

2.2 116414份异常无偿献血者中ALT阳性者3660人份，ALT合并HBsAg阳性的有11份，占全部ALT异常者0.30%；ALT合并HCV-Ab阳性的有18人份，占全部ALT异常者0.49%；ALT合并HBV-DNA阳性的有2人份，占全部ALT异常者0.05%；HBsAg合并HCV-Ab阳性的有5份，占全部ALT异常者0.14%。ALT异常合并HBsAg/HCV-Ab/HBVDNA阳性者31人份，占全部ALT异常者的0.85%，单ALT异常者3629人份，占全部ALT异常者的99.15%。HBsAg、HBV-DNA、HCV-Ab、HCV-RNA阳性引起ALT异常升高的结果和ALT异常升高的相关性分析见表2～表4。

表1 116414名献血者ALT、HBsAg、HBV-DNA、HCV-Ab、HCV-RNA检测结果

表2 HBsAg阳性者与HBsAg阴性者的ALT结果异常的比较

表3 HCV-Ab阳性者与HCV-Ab阴性者的ALT结果异常的比较

表4 HBV-DNA阳性者与HBV-DNA阴性者的ALT结果异常的比较

3 讨论

ALT广泛存在于多种器官中，按含量多少顺序为肝脏、肾脏、心脏、骨骼肌等，机体的器官有实质性损害时，ALT均可增高。虽然ALT可以比较敏感的检测到肝脏的早期损害，但ALT值的升高并不完全说明肝脏受到了损害，也有可能是其他器官受到损伤。ALT值的升高除了病理因素的影响；还有一些其他因素的影响比如有文献指出：男性、年龄、体质量、睡眠、饮酒情况、近期有服药史、激烈运动和重体力劳动，这7种非病理因素是导致献血者ALT值升高的危险因素[2]，同时还和标本的采集、保存、标本内干扰物、检测过程的操作、质量控制、试剂、设备等都可能影响ALT的检测值[3]，因此有的人认为ALT不宜作为血液筛查强制性指标。

我们对2015年1月至2017年12月在本站共116414人份无偿献血者的标本进行检测，ALT异常者3660人份，不合格率为3.14%；HBsAg阳性452份，不合格率为0.39%；HCV-Ab阳性279份，不合格率为0.24%；HBV-DNA阳性94份，不合格率为0.081%。未检出HCV-RNA阳性标本可能原因有：①一些感染者体内的HCV-RNA呈现间段性存在；②感染者为回复期时，病毒的核酸复制停止或者复制减弱，导致血液中的病毒核酸没有或者含量很低；③可能因为我们用的试剂灵敏度不高，以至于检测不到；④病毒变异；⑤可能和我们操作人员操作有关等。根据表2～4所示：HBsAg与ALT比较：卡方值=0.752，P=0.386；HBV-DNA与ALT比较：卡方值=0.072，P=0.788。HBsAg和HBV-DNA阳性者中ALT的异常率和HBsAg和HBV-DNA阴性者中ALT的异常率无统计学差异（P＞0.05），即单项ALT的升高和乙型肝炎病毒的感染没有相关性，与程玉根[4]、任本春[5]报道的结果一致。根据表3所示HCV-Ab与ALT比较：卡方值=10.048，P=0.002，HCV-Ab阳性者中ALT的异常率与HCV-Ab阴性者中ALT的异常率有统计学差异（P＜0.01），即单项ALT的升高和丙型肝炎病毒的感染有相关性，和申俊锋[6]、李明霞[7]、朱邵汶[8]等报道的结果一致；和梁浩坚[9]、周艳[10]报道的不一致，原因可能和各地区的流行病学，及献血前的初筛项目和试剂的不同以及工作人员的操作有关系。以上结论只能代表本地区的无偿献血者的HBsAg、HBV-DNA、HCV-Ab、HCV-RNA阳性和ALT异常的关系，不能代表其他地区。

虽然本文的结果单项ALT的升高和丙型肝炎病毒的感染有相关性，但是占ALT阳性的比率为0.49%（18/3660），占ALT阳性的比率很小，大部分的献血者ALT异常都为非病理因素引起的，并非为HBV、HCV感染所致，同时现在ELISA技术的不断完善，以及核酸检测在献血者标本筛查的应用，已经在很大程度上缩短了HBV、HCV感染的窗口期。现在本站以及全国由于ALT异常报废的血液占主要原因，造成了很大的浪费，在目前临床用血比较紧张的情况下，是否取消献血前ALT的筛查还是更改ALT的阈值这还有待于相关专家和业内人士做更多的研究。我们现在能做的就有以下几点：①加强技术人员的培训；②做好献血者的询问工作；③加强献血前的宣传工作；④使用符合要求的厂家的试剂；⑤做好室内质控和室间质评；⑥发展更多的固定重复献血者。总之我们应加强做好以上几点，尽可能的降低ALT的不合格率以及提高HBV、HCV检出率，不仅降低了因ALT异常导致的血液报废率，保护血液资源，同时也降低了因输血而传播疾病的风险。