一起哺乳仔猪肺部奇异变形杆菌的初步分离鉴定

柯海华，张 轶，高义平

（彭泽县畜牧兽医局，江西九江，332700）

变形杆菌是一种人和动物的寄生菌和病原菌。广泛分布在自然界中，如土壤、水、垃圾、腐败有机物及人或动物的肠道内。根据生化反应的不同，可分为普通、奇异、潘尼和产粘液变形杆菌四类。变形杆菌在食物中能产生肠毒素，并且可以使蛋白质中的组氨酸脱羧而形成组胺，从而引起胃肠炎或过敏性反应。大量变形杆菌在人体内生长繁殖也是构成食物中毒的主要因素。变形杆菌一般不致病。夏、秋季节温度高，变形杆菌在被污染的食物中大量繁殖。食用被污染的食物后2～30h出现上腹部刀绞样痛和急性腹泻，伴有恶心、呕吐、头痛、发热。病程较短，一般1～3d可恢复，很少有死亡。笔者从一例患病仔猪肺部分离到一株具有迁徙生长现象的菌株，经鉴定初步判断为奇异变形杆菌，现汇报如下。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 病料。彭泽县某猪场患病哺乳仔猪，剖检无菌采集肺脏。

1.1.2 常用设备。生化培养箱、无菌操作台、显微镜、酒精灯、接种（棒）环、培养皿、载玻片等。

1.1.3试剂。革兰氏染色液：草酸铵结晶紫溶液、碘液、95%酒精溶液、沙黄溶液。微量生化发酵管：硫化氢溶液、甘露糖、甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、阿拉伯糖、乳糖、枸橼酸钠、木糖、吲哚、鸟氨酸脱羧酶等。

1.2 实验方法

1.2.1 细菌的分离培养。用接种环从无菌采集的病料肺脏中钩菌，划线接种于血平板，置37℃培养24～48h，观察并记录结果。

1.2.2 细菌染色镜检。用接种环钩取可疑菌落，涂片，革兰氏染色，油镜镜检，观察并记录结果。

1.2.3 细菌的迁徙实验。取两套普通固体琼脂培养基，在其表面等距滴几滴无菌蒸馏水，再用无菌接种环将细菌接种到清水中，置37℃的恒温箱中培养18～24h，观察并记录菌落的形态。

1.2.4 细菌的生化鉴定。将分离纯化的可疑变异杆菌菌株，培养16～18h新鲜菌落，用接种环钩取单个菌株，分别接种到含有硫化氢溶液、甘露糖、甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、阿拉伯糖、乳糖、枸橼酸钠、木糖、吲哚、鸟氨酸脱羧酶的微量生化试验发酵管中，置37℃的恒温箱中培养18～24h，观察并记录结果。

2 试验结果

2.1 细菌分离结果

普通培养基中长出淡黄色的菌落，且菌落呈扩散状态生长。没有划线的地方也有菌苔形成，同时发生了溶血现象，打开平皿时有臭味。

2.2 可疑菌株镜检结果

可疑菌落经涂片染色镜检，均为两端钝圆的革兰氏阴性杆菌，多散在，无芽胞和荚膜（见图1）。

图1 可疑菌落革兰氏染色（10×100倍显微镜观察）

2.3 可疑菌株迁徙生长实验结果

在固体普通培养基上呈扩张性生长，布满整个平板表面，形成以菌种部位为中心的厚薄交替、同心圆形的灰白色波纹状菌苔，呈典型的迁徙生长现象（见图 2）。

图2 可疑菌株的迁徙生长现象

2.4 分离细菌的生长鉴定结果（见表1）

表1 生化反应管实验结果

3 小结与讨论

本菌从实验的结果推测是奇异变形杆菌，属于肠杆菌科的变形杆菌属，为革兰氏阴性、无芽胞、无荚膜、周身鞭毛、运动活泼、两端钝圆的小杆菌。兼性厌氧。在自然界中存在极广，水、泥土、阴沟及各种腐败的动、植物中最多，也存在于健康人和动物的肠道中。它们是条件致病菌，在特殊情况下对人致病。如食物中毒、尿路感染、夏季腹泻或其他混合感染。

由变形杆菌引起的食物中毒一般不必服抗生素，仅需补液、解症等对症处理，重症患者可用氯霉素、诺氟沙星等抗菌药物。预防的重点在于加强食品管理，注意饮食和环境的卫生。粪便培养可检得变形杆菌。血清凝集抗体有助于诊断。本病需与霍乱及副霍乱、急性细菌性痢疾、病毒性胃肠炎、非细菌性食物中毒等疾病相鉴别。