两种方法提取罗汉果中脂肪酸的比较分析

侯冬岩，回瑞华，李铁纯，刁全平，漆玉琴

(鞍山师范学院 化学与生命科学学院,辽宁 鞍山 114007)

罗汉果系葫芦科多年生藤本植物的果实，是我国特有的一种药材.中国百分之九十罗汉果产于桂林永福县和龙胜县，是桂林名贵的土特产，也是国家首批批准的药食两用的食材[1,2].

罗汉果营养丰富，主要含有三萜类化合物、黄酮类化合物、糖类、氨基酸、脂肪酸、甘露醇等.现代科学研究表明，罗汉果可以预防呼吸道感染，对感冒引起的咽喉肿痛或咳嗽不止具有良好的治疗作用.此外，罗汉果还可以防治因雾天吸入污浊空气引起的咽部瘙痒，有润肺的良好功效.罗汉果甜度高、热量低，是糖尿病患者良好的天然功能性甜味剂.罗汉果具有提高免疫功能﹑保护肝脏﹑抑菌﹑抗氧化等作用，具有广泛的开发前景[3,4].国内外对罗汉果的研究多有报道，但主要集中在非糖类的甜味物质葫芦素烷三萜类化合物的研究上，对其他成分的研究少有报道[5].

本文采用回流提取法和索氏提取法提取罗汉果中脂肪酸并进行比较分析，为罗汉果的开发利用提供实验依据.

1 实验部分

1.1 实验材料

石油醚﹑乙醚﹑甲醇﹑氢氧化钾(所用试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水)；样品罗汉果：购于广西桂林，粉碎后过0.6 mm筛，备用.

1.2 实验仪器

HP 6890-5973型气相色谱-质谱联用仪(美国安捷伦公司)；KQ-250B超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；RE-52CS旋转蒸发器(上海亚荣盛华仪器厂)；索氏提取器(江苏高邮市教研仪器厂).

1.3 回流提取法提取罗汉果中脂肪酸成分

1.3.1 罗汉果中脂肪油的提取 称取10．00 g经粉碎、过筛的罗汉果样品，置于圆底烧瓶中，加入石油醚 150 mL，加热回流6 h，提取液经减压旋转蒸发回收溶剂，得油状物.

1.3.2 脂肪油中脂肪酸的甲酯化 移取 0.5 mL罗汉果脂肪油于圆底烧瓶中，加入8 mL正己烷、0.5 mol/L的氢氧化钾-甲醇溶液,经水浴回流 60 min，冷却至室温，将溶液移入离心试管内，加入10 mL水，超声振荡﹑离心，取上清液待做GC/MS分析.

1.4 索氏提取法提取罗汉果中脂肪酸成分

1.4.1 罗汉果中脂肪油的提取 称取10.00 g经过粉碎、过筛的罗汉果样品，置于索氏提取器中，加入石油醚150 mL，提取6 h，提取液减压旋转蒸发回收溶剂，得油状物.

1.4.2 脂肪油中脂肪酸的甲酯化 移取0.5 mL罗汉果脂肪油于圆底烧瓶中.加入8 mL正己烷、0.5 mol/L的氢氧化钾-甲醇溶液,经水浴回流 60 min，冷却至室温，将溶液移入离心试管内，加入10 mL水，超声振荡﹑离心，取上清液待做GC/MS分析.

1.5 气相色谱/质谱法测定

气相色谱条件:色谱柱HP-5,25 m×0.20 mm×0.20 μm弹性石英毛细管柱，进样口温度300 ℃，柱温：以10 ℃/ min从60 ℃升温到280 ℃，保持10 min；进样量0.4 μL，分流比为20∶1，溶剂延迟3 min，载气为He气，流速为1 mL/min.

质谱条件：离子源为电子轰击源，离子源温度230 ℃，电离电压70 eV，电子倍增器电压1 345 V，发射电流34.6 μA；接口温度230 ℃；质量范围：m/z 20～500.

1.6 测定方法

取经酯化处理后的样品0.4 μL进样，由GC/MS所得的质谱信息进行GC/MS分析.

以G1701BA化学工作站检索Nist98标准谱库，结合人工解析核对，对酯化后的脂肪酸的化学成分进行鉴定，得到各组分在总组分中的相对百分含量，两种方法提取罗汉果脂肪酸成分的总离子流图如图1和图2所示.

2 结果与讨论

2.1 实验结果

由回流提取法和索氏提取法提取罗汉果中脂肪酸成分，GC/MS总离子流图鉴定结果见表1.

由表1可知,经回流提取法提取罗汉果中的脂肪酸，共提取出12种脂肪酸，主要成分为：9，12-十八碳二烯酸(45.58%)，9，12，15-十八碳三烯酸 (亚麻酸)(9.25%)，14-甲基十五烷酸(8.94%)，十八烷酸为(6.52%).其中，饱和脂肪酸相对含量为16.26 %，不饱和脂肪酸相对含量为55.55%.

经索氏提取法提取罗汉果中的脂肪酸，共提取出7种脂肪酸，主要成分为：9，12-十八碳二烯酸(59.71%)，14-甲基十五烷酸(13.09%)，十八烷酸为(9.10%).其中，饱和脂肪酸相对含量为23.53 %，不饱和脂肪酸相对含量为60.31%.

2.2 结果讨论

由实验结果可知，通过回流提取法和索氏提取法提取罗汉果中脂肪酸成分，回流提取法鉴定出的成分为12种脂肪酸，索氏提取法鉴定出的成分为7种脂肪酸，回流提取法鉴定出的成分多于索氏提取法鉴定出的成分.回流提取法鉴定出的成分相对含量为71.81%，索氏提取法鉴定出的成分相对含量为83.84%，索氏提取法鉴定出的成分相对含量高于回流提取法鉴定出的成分相对含量值.

通过回流提取法鉴定出的9,12,15-十八碳三烯酸即亚麻酸占9.25%.亚麻酸是人体必须又不能自身合成的omega-3脂肪酸.人类身体几乎所有的病变都是由细胞发炎引起，而omega-3是细胞膜的组成成分，它能修复细胞的完整、改善细胞间的流动性和信息传递.omega-3主要存在深海鱼油中，加工提炼要求技术条件很高而且海洋资源远不能满足人类的需求.罗汉果是药食两用的食材，将罗汉果作为omega-3来源，可以大量种植开发，具有广阔的应用前景.

图1 回流提取法提取罗汉果中脂肪酸成分的总离子流图

图2 索氏提取法提取罗汉果中脂肪酸成分的总离子流图

表1 两种方法提取罗汉果中脂肪酸成分鉴定结果