NSE、VEGF、MMP-9在MPN患者血清中变化的临床意义

尹凤雷 尹 娟 赵 芳 张 睿 刘 静 张 薇 李淑晨 王 娟

骨髓增殖性肿瘤(myeloproliferative neoplasms，MPN)是克隆性造血干细胞疾病的一种，患者临床表现以多种血细胞质及量异常表达，出血倾向以及髓外造血等[1]。临床尚未明确MPN病理机制，但分析可能与基因突变、细胞因子以及炎症等有关[2]。血清神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase，NSE)是神经系统肿瘤的重要标志物；血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)则是血管新生的重要参与因子；基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9，MMP-9)则是细胞外基质降解与重塑平衡的调控因子，与多种肿瘤迁移、扩散能力有关[3]。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选取2015年1月至2019年2月在我院治疗的MPN患者40例(MPN组)，其中真性红细胞增多症(PV)患者14例、原发性血小板增多症(ET)患者15例、原发性骨髓纤维化(PMF)患者11例，男性25例、女性15例，年龄(54.51±8.03)岁。纳入标准：①诊断符合WHO2008版诊断标准；②均为初治患者；③患者及家属知情同意。排除标准：合并有其他恶性肿瘤、急慢性感染、糖尿病、结缔组织病、肝肾功能障碍等。同时选取健康体检者50例作为对照组，其中男性30例、女性20例，年龄(53.15±9.25)岁。2组性别、年龄等一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2 实验方法

抽取2组受检人员静脉血各5 ml，选用广州吉迪仪器有限公司生产的JIDI-6D低速大容量离心机进行3500 r/min，5 cm半径12 min离心，取上清选用电化学发光法检测2组人员NSE表达水平，试剂盒由瑞士罗氏公司生产；选用ELISA法检测2组人员VEGF、MMP-9表达水平，试剂盒由南京信帆生物技术有限公司提供，操作参照相应说明书。

1.3 治疗方法

MPN组患者给予300 WU IFN-α2b肌肉注射，每周进行3～6次，持续治疗6～8周。必要时可酌情给予患者口服20～50 mg/kg羟基脲，每周2次，持续治疗6～8周。

1.4 统计学处理

2 结果

2.1 MPN组和对照组血清NSE、VEGF、MMP-9水平比较

MPN组患者血清NSE、VEGF、MMP-9明显高于对照组，差异比较有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 MPN组和对照组血清NSE、VEGF、MMP-9水平比较

2.2 不同类型MPN患者治疗前血清NSE、VEGF、MMP-9水平比较

PV、ET和PMF患者治疗前血清VEGF比较差异无统计学意义；PV患者治疗前NSE和MMP-9明显高于ET和PMF患者(P<0.05)；ET患者治疗前MMP-9明显高于PMF患者(P<0.05)。见表2。

表2 不同类型MPN患者治疗前血清NSE、VEGF、MMP-9水平比较

注：a为与PV比较，P<0.05；b为与ET比较，P<0.05。

2.3 MPN患者治疗前后血清NSE、VEGF、MMP-9水平比较

MPN患者治疗后血清NSE、VEGF、MMP-9明显低于治疗前，差异比较有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 MPN组治疗前后血清NSE、VEGF、MMP-9水平比较

2.4 不同类型MPN患者治疗后血清NSE、VEGF、MMP-9水平比较

PV、ET和PMF患者治疗后血清NSE、VEGF和MMP-9比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表4。

表4 不同类型MPN患者治疗后血清NSE、VEGF、MMP-9水平比较

3 讨论

NSE是糖无氧酵解及有氧氧化通路的重要催化酶，主要存在于神经元及神经内分泌细胞内[4]。近些年的研究显示[5]，NSE异常表达是多种肿瘤疾病的危险因素，并且与患者疾病分期及预后密切相关。有研究发现[6]，非神经内分泌肿瘤，如非小细胞肺癌、淋巴瘤以及多发性骨髓瘤患者血清NSE表达水平显著高于健康人群。还有研究发现[7]，40%左右的T细胞白血病/淋巴瘤患者存在血清NSE高表达情况。本组研究中，MPN组患者血清NSE表达水平明显高于对照组，表明MPN患者存在明显NSE高表达情况，其糖酵解途径大量激活。本组研究还发现，PV患者治疗前NSE明显高于ET和PMF患者，提示NSE高表达还与MPN类型密切相关，或可成为MPN类型鉴别的参考指标。有研究发现[8]，PV患者NSE水平显著高于ET和PMF患者，并且与患者血红蛋白、血小板计数呈正相关，该学者分析认为NSE介导的糖酵解、氧化途径活化是MPN细胞代谢的重要影响因素，并因此影响MPN发生、发展及类型。

VEGF是人体内的一种强促血管新生因子，可促进血管内皮细胞增殖、迁移，是血管生成的重要介质[9]。本组研究中，MPN组患者血清VEGF水平明显高于对照组，表明VEGF与MPN密切相关。高表达的VEGF可与其受体相互作用，并诱导内皮细胞大量增殖、迁移，并借助自分泌或旁分泌促进血管新生，为肿瘤细胞增殖提供充分营养。有研究显示[10]，VEGF高表达可抑制免疫细胞活性，并损伤其功能，进而降低机体免疫功能对肿瘤细胞的监测及杀伤能力。本组研究还发现，PV、ET和PMF患者治疗前血清VEGF比较差异无统计学意义，表明不同类型的MPN患者血清VEGF表达水平相似，提示VEGF水平与MPN类型无相关。

MMP-9是MMPs家族的重要成员，对血管基膜具有较强降解能力，是血管新生、动脉粥样硬化斑块生成、破裂的重要参与因子[11]。本组研究中，MPN组患者血清MMP-9表达水平明显高于对照组，提示MMP-9是MPN发生、发展的参与因子之一。分析MMP-9作用MPN的机制可能与促使患者MMPs及其抑制剂平衡破坏，并参与血管新生，并影响肿瘤浸润、转移等有关。本组研究还发现，PV患者治疗前MMP-9明显高于ET和PMF患者，提示PV可能更具侵袭性。

IFN-α2b是T细胞合成的一种干扰素，可通阻止造血干细胞由G0期向G1、S期转化，并以此抑制造血干细胞增殖能力[12]。IFN-α2b还可抑制巨核细胞/血小板源性纤维生成因子表达，并阻滞骨髓纤维化进程[13]。羟基脲则是恶性黑色素瘤、慢性粒细胞白血病等肿瘤疾病的常用药物之一[14]。本品可有效选择性阻滞DNA合成，同时干扰嘌呤、嘧啶碱基合成。但羟基脲毒性较强，被世界卫生组织归属于3类致癌物清单中[15]，因此本研究仅对必要患者进行给药。本组研究中，治疗后MPN患者血清NSE、VEGF、MMP-9明显低于治疗前，但不同疾病分类患者治疗后血清NSE、VEGF和MMP-9比较差异无统计学意义，表明IFN-α2b可显著抑制NSE、VEGF、MMP-9表达，并改善患者症状。

本研究通过分组实验，发现NSE、VEGF、MMP-9高表达与MPN密切相关，临床或可通过检测这3个指标来诊断MPN。此外，不同MPN类型患者NSE水平也存在一定差异，提示NSE还可用于鉴别MPN的类型。由于本组研究取样数量较小，研究还存在一定不足。

综上所述，MPN患者血清NSE、VEGF、MMP-9水平明显升高，其中NSE和MMP-9水平与MPN类型有一定关系。