HPV DNA分型检测及HPV E6/E7 mRNA定量检测在宫颈癌筛查中应用的研究

王钧

北京市丰台中西医结合医院，北京 100074

尽早筛查、诊断是降低宫颈癌发病率和死亡率的重要方式，本文探讨了宫颈癌筛查的新方法，现将结果做出如下报告。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2018年2月至2019年3月妇科门诊进行宫颈病变筛查的患者203例进行研究。年龄20-65岁，均值(35.46±6.79)岁。其中145例患者有白带异常、阴道分泌物增多、接触性出血的临床症状。其中165例患者有不同程度的宫颈糜烂。本次入选研究的患者均排除合并其他系统肿瘤、宫颈上皮内病变病史、子宫切除术、宫颈手术、阴道用药或者冲洗、妊娠患者，对本次研究知情且签署同意书。

1.2 研究方法 (1)样本收集：收集203例受检者的样本，置入宫颈刷至宫颈内鳞状皮交界的位置，沿顺时针旋转5圈，将宫颈刷取出后放置在专用细胞保存液中的容器内，反复洗脱细胞后进行封管，放置在-20℃的冰箱中保存。(2)TCT检测：使用膜式液基超薄细胞学离心沉淀检测，脱落的细胞进行固定和染色后再使用Bethesda系统进行判断。将所有受检者分成：水平值中正常值范围内、高度鳞状上皮内病变、低度鳞状上皮内病变以及意义不明确的不典型鳞状上皮细胞。(3)HPV DNA分型检测：使用点杂交采样工具收集宫颈组织的样本，检测21种HPV亚型，包括HPV DNA16、18、31、33、35、51、52、56、58、59、68、6、11、41、42、44、53、66、CP8304。(4)HPV E6/E7 mRNA定量检测：收取样本与TCT检测相同，使用新乡试剂盒将信号放大并加入荧光底物，使用冷光荧光度检测。将检测的结果使用计算机自动判别结果。(5)组织病理学检查结果：对于意义不明的不典型腺体上皮细胞及更高级的异常结果，需要在阴道镜下获取受检者的宫颈活体组织，根据病理诊断结果判断。

1.3 统计学方法 使用软件SPSS23.0对数据进行分析，计量资料用（Mean±SD）表示；计数资料用(n，%)表示；当P＜0.05时，提示比较存在意义。

2 结果

见表1、2。

表1 HPV DNA分型检测与组织病理学对照[n(%)]

表2 HPV E6/E7 mRNA定量检测[n(%)]

3 讨论

根据过往临床研究报道[1]，HR-HPV不间断感染是造成宫颈及癌前病变的基础，所以检测HR-HPV对于宫颈癌和癌前病变的筛选有重要意义。但是大部分HPV患者的感染呈一过性，而发生HPV持续感染至恶化需要经历5-10年的时间，所以检测价值不明确。HPV DNA整合在宿主染色体的脆弱区，可以通过抑制癌细胞基因功能造成细胞周期失控。HPV E6/E7 mRNA表达的癌基因活性，提示细胞恶化风险高。

综上所述，HPV DNA及HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈癌和癌前病变的筛查中有重要应用价值。