孙泽兵
河北省清河县中心医院药剂科,河北 邢台 054800
动物骨中的蛋白主要为胶原蛋白,胶原蛋白经酶解、分离纯化等得到的胶原蛋白肽,具有保护骨健康、抗氧化和免疫调节等生理活性,对于改善人体健康具有重要意义[1]。本文就骨胶原蛋白肽防治骨质疏松的疗效进行研究,为后续开发提供参考。
1.1 样品 骨胶原蛋白肽粉(牛骨来源,肽含量96%)、碳酸钙(钙含量40%)。
1.2 仪器 原子吸收分光光度计,骨密度仪、电子天平。
1.3 方法及分组 60只雌性SD大鼠,按体重随机分为假手术组,溶剂对照组、碳酸钙组及高、中、低剂量组,每组10只。饲养一周后,所有大鼠腹腔注射10%水合氯醛麻醉,剂量3 ml/kg,仰卧位固定,于脐与耻骨前缘中点沿腹底壁正中线向上侧后方切开腹白线及腹膜,打开腹腔,找到子宫,沿子宫角向前导出卵巢,结扎卵巢系膜血管后摘除两侧卵巢。假手术组仅摘除少量筋膜,不摘除卵巢。将子宫还纳后分别缝合皮肤,并用碘酒消毒。术后肌内注射青霉素 45万U/只,连续3d。碳酸钙组灌胃给予碳酸钙(100mg/kg);高、中、低剂量组灌胃给予骨胶原蛋白肽粉(250mg/kg、175mg/kg、100mg/kg)。溶剂对照组灌胃给予1%羧甲基纤维素钠溶液。每日1次,连续90d。每周称重,并调整灌胃量。实验结束处死大鼠,取出大鼠两侧股骨,去除附着的结缔组织与肌肉,左侧股骨在烘箱中烘至恒重,称量骨重,测定骨钙含量。右侧股骨测定股骨中点与远心端的骨密度[2]。
1.4 统计学处理 采用 SPSS 17.0 软件对数据进行分析。所有数据以(Mean±SD)表示,P<0.05有统计学意义。
表1 对大鼠骨重、骨钙含量及骨密度的影响(Mean±SD)
2.1 对大鼠体重的影响 实验开始前,各组间大鼠体重无显著差异。实验结束后,溶剂对照组与假手术组大鼠体重有显著差异(P>0.05);碳酸钙组、低、中、高三个剂量组与溶剂对照组相比,大鼠体重无明显差异(P>0.05),说明造模成功,且受试样品对大鼠体重无影响。
2.2 对大鼠骨重、骨钙含量及骨密度的影响 与假手术组相比,溶剂对照组股骨的骨密度及骨重、骨钙含量均显著降低(P<0.05),提示造模成功。碳酸钙组、高、中剂量组的骨密度、骨钙含量均较溶剂对照组显著提高(P<0.05)。碳酸钙组、高剂量组的骨重均较溶剂对照组显著提高(P<0.05),见表1。
雌性大鼠切除卵巢模型是最常用的骨质疏松模型,它能正确的模拟绝经期妇女由于激素缺乏引起的骨质疏松特征。切除卵巢的大鼠,骨吸收增强,骨基质中的胶原分解加速,成骨细胞合成减少[3]。胶原蛋白肽够调节骨代谢平衡,通过增强骨合成,降低骨吸收,使身体骨量增加[1]。本研究显示,高、中剂量组的骨密度、骨钙含量和高剂量组的骨重均较溶剂对照组显著提高(P<0.05)。由此说明,骨胶原蛋白肽粉具有增加骨密度的功效。