核桃仁乙醇提取物对AD大鼠的改善作用及机制研究

潘建萍，何春明，龚小娇，吴琪珍

赣南卫生健康职业学院，江西 赣州 341000

目前AD发病机制尚未明确，临床尚未形成统一的治疗标准。采用安全性高、临床效果良好的传统中药治疗的案例越来越多，已成为治疗AD的有效方法之一。在《本草纲目》中记载核桃可令人肥健、添脑髓。本研究从分子生物学方面观察核桃仁对AD模型大鼠学习记忆的改善作用及机制。

1 资料和方法

1.1 比色法测定海马组织活性物质 大鼠Morris水迷宫检测完成后，腹腔麻醉并分离海马组织，严格按照试剂盒（南京建成生物研究所）说明书操作步骤测定。

1.2 Western Blot法检测 将取出海马称重，组织匀浆后蛋白提取、定量，并依次进行凝胶电泳、半干膜转移，加入特异性一抗和荧光标记的二抗，用化学发光法检测。

2 结果

2.1 各组大鼠海马组织中p-tauSer404蛋白含量比较Western blot实验结果：空白组、AD模型组和A、B、C各组大鼠脑内p-tauSer404表达水平标准化后，数值依次为1.06±0.09，3.83±6.49，2.68±0.35，2.36±0.32，1.78±0.25。与模型组相比，A、B、C各组p-tauSer404表达水平降低(P＜0.05)。

2.2 各组大鼠海马组织中Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白表达水平比较 见表1。

表1 核桃仁对AD大鼠海马组织中Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的影响（Mean±SD）

2.3 各组大鼠海马组织中Ach、ChAT和AchE含量比较 见表2。

表2 核桃仁对 AD 大鼠海马组织中AchE、ChAT 和Ach影响（Mean±SD）

3 讨论

中药多靶点治疗对多病因疾病AD具有广阔应用前景。核桃是一种益智类的传统中药，素有健脑养脑的功效[1]。经研究发现，AD大鼠经核桃仁干预后脑内tau蛋白磷酸化水平降低。AD脑内有神经细胞凋亡发生，Caspase-3在各种因素启动的凋亡程序中起最后枢纽作用。研究发现，核桃仁通过下调Bax、Caspase-3表达，上调Bcl-2表达抑制神经细胞凋亡。胆碱系统的损伤是与AD最为密切的中枢神经递质系统改变，本研究发现核桃仁具有双向正性调节AD大鼠脑内胆碱能系统的作用，这可能是核桃仁改善AD的神经递质基础。

综上所述，核桃仁可改善AD大鼠脑内tau蛋白磷酸化，平衡胆碱系统和抗凋亡作用。