刘丹妮
(四川省简阳市人民医院输血科,四川 简阳 641400)
输血是将血液或血液的某种成分输给患者的一种补充治疗,可治疗许多疾病,是抢救危重患者的一种重要手段。远在1667年人类就开始尝试输血治疗,但直到1900年Landsteiner发现ABO血型系统,才为常规血型鉴定方法的建立奠定了基础[1]。在输血前做供血者与受血者的血型鉴定、不规则抗体筛查、直(间)接抗人球蛋白实验和交叉配血实验,目的在于能有效降低临床输血的高风险型性和增高其有效性。微柱凝胶法属于免疫学检验法范畴。近些年国内已运用起来,我院也在使用当中。由于影响实验结果的因素繁多,加低离子强度盐溶液或者加生理盐水也是影响因素之一。我科就此问题展开探讨。
1.1 一般资料 将我院2019年8月1日-9月9日收集的血型鉴定、不规则抗体筛查、间接抗人球蛋白试验、交叉配血等3012例标本作为讨论对象,受血者标本为输血前3天内收集。
1.2 方法 输血相容性检测仪由美国强生公司提供;微柱凝胶卡由美国强生公司提供,包括血型鉴定卡和IgG检验卡;低离子强度盐溶液由英国奥森多临床诊断有限责任公司提供;A1BO试剂红细胞悬液和不规则抗体筛查细胞由上海血液生物有限责任公司提供;生理盐水由四川科伦药业股份有限公司提供。将2-3 mL EDTA-K2抗凝血置于中佳低速离心机3000 r/5 min分离血浆;将收集的标本用NS配制成3%-5%的红细胞悬液。血型鉴定时,将3%-5%红细胞悬液10 μL加入血型正定型试剂卡1-4孔,将3%-5%的试剂细胞10 μL和病人血浆40 μL加入血型反定型试剂卡5-6孔;其他实验时,将40 μL血浆和3-5%的各试剂细胞加入IgG检验卡中;以上两种检测再分别不加和加低离子强度盐溶液50 μL,记录两种方法的结果统计记录。
1.3 统计学方法 两种实验中产生的数据,通过SPSS 16.0统计学软件进行比较,计数资料采用发生率进行比较,以%表示,检验方式为χ2,当结果显示P<0.05时,证明组间差距显著,具有统计学意义。
在所有血液样本中,血型鉴定时,加NS的实验中有3例表现出正反定型不一致,阳性率为0.10%,加入低离子强度盐溶液的实验中,有33例表现正反定型不一致,阳性率为1.10%。做不规则抗体筛查试验时,加NS的实验中有4例表现为阳性反应,阳性率为0.13%,加入低离子强度盐溶液的实验中,有42例表现为阳性反应,阳性率为1.39%。在直(间)接抗人球蛋白实验中,加入NS的实验中有5例表现为阳性反应,阳性率为1.00%,加入低离子强度盐溶液的实验中有17例表现为阳性反应,阳性率有3.40%。在交叉配血实验中,加入NS实验中主次侧阳性反应的分别有2、47例,主次侧阴性反应的有367例;加入低离子强度盐溶液实验中主次侧分别阳性的有6、68例,主次侧阴性反应的有342例。组间差异显著,具有统计学意义(P<0.05)。
低离子强度盐溶液的成分由葡萄糖、氯化钠、抗凝剂、抗菌药和防腐剂等组成,因低离子强度盐溶液的离子强度可有效降低介子的离子强度,减少红细胞附近的电子云,为实验寻找有效的离子强度,提高抗原抗体与抗体之间存在的引力,使抗原抗体之间的反应更加强烈,从而产生凝集作用。相比NS法,提高了检测结果的准确性,降低了病人的输血风险。之所以低离子强度盐溶液阳性率更高,和病人的红细胞被自身抗体致敏,导致直接抗人球蛋白试验阳性有关;或者存在不规则抗体[3]或者一些常见疾病也有可能导致,如:多发性骨髓瘤、PNH、MDS、自身免疫性溶血性疾病等等。
综上可见,低离子强度盐溶液在输血相容性检测的应用之广,影响之大,远远优于NS试验。纠其优势如下:(1)使用低离子强度盐溶液,能增强抗原抗体的结合,缩短孵育时间,提升试验效率。(2)提高不规则抗体的检出率,尤其是弱抗体或者低浓度抗体的检出率,提升患者输血安全性。(3)提升交叉配血试验[3]的敏感性和准确性,结果可靠稳定。(4)在新生儿血型鉴定、新生儿溶血病实验等方面也有很好效果。在实际的临床输血过程中,影响因素繁多且无法规避。我们应该严格按照SOP和试剂说明书操作、判定结果、保存试剂,保证实验结果的准确性和可靠性,同时运用多种方法复核试验结果,尽量将风险降至最低。