不同麻醉药品对珍珠龙胆石斑鱼的麻醉效应研究

吴勇 严伟益 潘传豪 莫洋 谢又兴 施钢

摘 要 为研究水产麻醉药品对珍珠龙胆石斑鱼的麻醉效应，以苯唑卡因、丁香酚、MS-222为主麻醉药品，以依托咪酯、2-苯氧乙醇为预麻醉药品，对珍珠龙胆石斑鱼在（20±0.5）℃、（25±0.5）℃水温下进行了麻醉实验，麻醉效果判定标准为同时满足进入深度麻醉（IS3）的引导时间300 s以内并且完成恢复时间300 s。结果表明：在实验浓度下，单种和混合麻醉实验中，各组实验的珍珠龙胆石斑鱼成活率均为100%;在单种麻醉实验中，推荐水温25 ℃，苯佐卡因、丁香酚、MS-222均可作为麻醉剂，其推荐浓度分别为40 mg·L-1、20 mL·L-1、80 mL·L-1;混合麻醉组合中，推荐水温25 ℃，依托咪酯、2-苯氧乙醇均可作为预麻醉剂，其推荐浓度为3 mg·L-1、0.4 mL·L-1，

主麻醉药为苯佐卡因或者MS-222，其推荐浓度为苯佐卡因40 mg·L-1或者60 mg·L-1，MS-222 80 mg·L-1。

关键词 珍珠龙胆石斑鱼;苯唑卡因;丁香酚;MS-222（间氨基苯甲酸乙酯甲磺酸盐）;依托咪酯;2-苯氧乙醇;麻醉

中图分类号：S965.334 文献标志码：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2020.20.072

龙虎斑为棕点石斑鱼（E. fuscoguttatus♀）和鞍带石斑鱼（E. lanceolatus♂）的杂交品种，俗称龙虎斑或珍珠斑，在台湾、新加坡和马来西亚被称为珍珠龙胆或珍珠斑[1-3]。目前，国内对珍珠龙胆石斑鱼的相关研究报道较多，如珍珠龙胆石斑鱼营养成分与品质的研究[4]、温度对于珍珠龙胆石斑鱼呼吸与排泄的影响[5]、温度和盐度对龙虎斑存活和摄食的影响[6]、盐度对龙虎斑的影响[7]等;Salim Farrakhan等[8]对珍珠龙胆的盐度耐受性和渗透压调节等进行了研究。但是，关于麻醉剂对珍珠龙胆石斑鱼的麻醉效应研究尚无报道。

在鱼类麻醉剂中，较为常用的为丁香酚（Eugenol，4-allyl-2-methyoxyphenol）、苯唑卡因（Benzocaine）、MS-222（Tricaine mesylate）、2-苯氧乙醇（2-phenoxyethanol）和依托咪酯（Etomidate）等。其中，丁香酚对鱼类的麻醉研究目前已有丁香酚对于斑马鱼[9]、大黄鱼[10]、鲻鱼[11]多种鱼类的麻醉作用研究。苯唑卡因与MS-222在挪威被批准应用于水产养殖业[12-13]。MS-222，又名间氨基苯甲酸乙酯甲磺酸盐，FDA批准将MS-222作为鱼用麻醉剂，用MS-222麻醉过的鱼须在清水中饲养21 d后才能出售[14]。目前关于MS-222的研究有：任洁等[14]研究了MS-222对于活鱼运输的效果，李伟业等[15]研究了MS-222对于东海带鱼幼鱼麻醉效果。2-苯氧乙醇，又名乙二醇苯醚，目前关于2-苯氧乙醇应用于鱼类麻醉的研究有其对于扁吻鱼幼鱼[16]、尼罗罗非鱼[17]、许氏平鲉幼鱼[18]的麻醉作用等。依托咪酯为咪唑类衍生物，系催眠性静脉麻醉药，其麻醉特点为短效而且速效，对呼吸、循环影响很小，诱导与苏醒均较快，相对安全[19]。目前，对于依托咪酯的相关报道较少，有胡红专等[20]报道依托咪酯的药理特点和临床应用，还有研究报道依托咪酯对斑马鱼的麻醉效果[21]。

为在捕捉等操作时降低鱼体的应激反应和鱼体的损伤，需对鱼类进行麻醉，此外，麻醉还可有效降低其呼吸频率与耗氧量，提高运输密度与成活率[22]。基于此，研究丁香酚、苯唑卡因、MS-222、2-苯氧乙醇和依托咪酯这5种麻醉药品对大规格珍珠龙胆石斑鱼的单独或组合麻醉效应，以期为珍珠龙胆石斑鱼捕捞作业、活鱼运输等提供麻醉理论参考依据。

1 材料与方法

1.1 材料

珍珠龙胆石斑鱼来自广东海洋大学东海岛海洋生物研究基地，实验选取了体长（22.68±1.24）cm，体重（355.03±44.32）g珍珠龙胆石斑鱼720尾来进行。实验前3 d停止投喂。

丁香酚、苯唑卡因、2-苯氧乙醇、MS-222和依托咪酯由上海麦克林生化科技有限公司生产。

1.2 方法

实验用海水盐度为30，pH为7.96～8.20，温度17～23 ℃，水温控制在20±0.5 ℃或25±0.5℃。

鱼体麻醉状态分析，参照Pawar的文献[23]修改后的麻醉状态判断标准。

实验浓度梯度设置如表1和表2所示，单种麻醉药物采用苯唑卡因、丁香酚和MS-222，混合麻醉药物采用2-苯氧乙醇和依托咪酯为预麻醉剂，苯唑卡因、丁香酚和MS-222为麻醉药品。除麻醉实验组外，另设对照组1组，加入等量水或无水乙醇，所有试验组和对照组合记录20尾鱼的IS3（深度麻醉）和RS3（恢复期）时间数据及存活率。

1.3 数据统计

实验数据用Microsoft Excel 2010和IBM SPSS 19.0 STATISTICS软件进行统计学分析，先做方差分析，再进行多重比较[24-25]。

2 结果与分析

2.1 单种麻醉实验结果

2.1.1 成活率

1～12组的实验组所有麻醉和恢复成活率均为100%。

2.1.2 鱼体进入深度麻醉时间

表3数据表明，第4组（170.05 s）最快由正常进入IS3，且与其他各组入麻时间差异显著（p<0.05）;第9组（746.25 s）最迟由正常状态进入IS3，且入麻时间与其他各组差異显著（p<0.05）。

2.1.3 鱼体由深度麻醉进入恢复期时长

由表4得出，第5组（140.25 s）的鱼最快由IS3进入RS3，第4组（425.80 s）最迟由IS3进入RS3，并且与其他各组差异显著（p<0.05）。

综合入麻时间和恢复时间，第2组、第8组、第12组比较适合用来麻醉此规格的珍珠龙胆石斑鱼。单种麻醉实验中，推荐水温25℃，苯佐卡因、丁香酚、MS-222均可作为麻醉剂，其推荐浓度分别为40 mg·L-1、

20 mL·L-1和80 mL·L-1。

2.2 混合麻醉实验结果

2.2.1 成活率

13～36组的实验组所有实验鱼麻醉和恢复成活率均为100%。

2.2.2 鱼体进入深度麻醉（IS3）时长

如表5所示，第36组的鱼最快由正常状态进入IS3（223.85 s），其入麻时间与其他所有组差异均显著

（p<0.05）;由正常状态进入IS3时间跨度最长的是第21组，其平均入麻时间长达581.20 s，其他所有各组之间差异均显著（p<0.05）。入麻时间合适的混合麻醉组合为第16组、第18组、第20组、第28组、第32组和第36组。

2.2.3 鱼体由深度麻醉状态（IS3）进入恢复期（RS3）时长

如表6所示，第22组（105.45 s）的鱼最快由IS3进入RS3，其恢复时间与第13组、21组、25组恢复时间无统计学差异（p>0.05），而与其他各组恢复时间差异极显著（p<0.05）;第28组由IS3进入RS3时间最长，其恢复时间与其他组间两两比较差异均极显著。单纯考虑恢复时间，除了第20组、第28组恢复时间超过300 s，其他各组的恢复时间均在300 s以内，均可以作为麻醉应用中的麻醉组合。

综合入麻时间和恢复时间，第16组、第18组、第32组和第36组比较适合用来麻醉此规格的珍珠龙胆石斑鱼。混合麻醉组合中，推荐水温25 ℃;依托咪酯、2-苯氧乙醇均可作为预麻醉剂，其预麻醉浓度分别为3.0 mg·L-1、0.4 mL·L-1;主麻醉药品为苯佐卡因或MS-222，其麻醉浓度为苯佐卡因40 mg·L-1或者60 mg·L-1，MS-222 80 mg·L-1。

3 讨论

3.1 麻醉药品浓度对麻醉效应的影响

麻醉剂作用机制为：先抑制了鱼类的脑皮质使其丧失触觉，再作用在鱼类的基底神经节和小脑，使其兴奋，最后作用在脊髓，过大剂量、过长时间接触可深及髓质，使呼吸和血管舒缩中枢呈麻痹状态，最终致死[19]。处于麻醉状态之中的鱼可通过自身的新陈代谢，解除麻醉状态，从而进入恢复期[26]。单种麻醉实验结果中，丁香酚、苯佐卡因、MS-222三者的入麻时间都随着麻醉浓度的升高而显著加快，这与李靖等[27]的丁香酚对大西洋鲑的麻醉效果的实验研究结果一致;苯佐卡因和丁香酚的恢复时间随着麻醉浓度的升高而显著变慢，但是MS-222的两种设计浓度下，恢复时间随着麻醉浓度的升高，变化无统计差异。这可能是药品的浓度不同或者MS-222浓度设计的梯度差异较小导致的，不同麻醉药物对珍珠龙胆石斑鱼产生麻醉作用的生理过程不一样，可能是受鱼体内部对药品的吸收和代谢的影响。

3.2 温度对单种麻醉实验麻醉效应的影响

在单种麻醉实验中，苯佐卡因和MS-222的入麻时间都随着温度的升高而加快，丁香酚入麻时间仅在

20 mg·L-1随着温度的升高而变长，且差异显著（p<0.05）。这一结果与张丽等[28]关于MS-222对大黄鱼的麻醉效果的研究结果部分相似：在16 ℃时，大黄鱼的入麻所需时间是最长且最穩定的，随着温度改变，入麻时间递减且趋于不稳定。这可能是水温不同，珍珠龙胆石斑鱼生理状态不一样而导致的。

4 结论

麻醉实验中，各组实验的珍珠龙胆石斑鱼成活率均为100%;无论是单种、混合麻醉实验，对于此规格珍珠龙胆石斑鱼更合适的麻醉水温均是25 ℃。单种麻醉实验中，苯佐卡因、丁香酚、MS-222均可作为麻醉剂;混合麻醉组合中，依托咪酯、2-苯氧乙醇均可作为预麻醉剂，主麻醉药品为苯佐卡因或者MS-222。

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（责任编辑：刘昀）