高效液相色谱法测定复方林可霉素滴耳液中盐酸林可霉素和地塞米松磷酸钠的含量

摘 要：本文基于高效液相色谱检测技术，建立了一种同时检测方林可霉素滴耳液中盐酸林克霉素和地塞米松磷酸钠含量的方法，并对方法的精密度、结果重现性、回收率等进行考察。

关键词：高效液相色谱;盐酸林可霉素;地塞米松磷酸钠;精密度

一、前言

复方林可霉素滴耳液是一种药品市场上常见的西药，在治疗由敏感型细菌所引起的外耳炎和急慢性中耳炎症状上有非常好的疗效，其所含有的有效成分主要为盐酸林可霉素和地塞米松磷酸钠。复方盐酸林可霉素治疗中耳炎疾病中主要起到疗效的化学物质为盐酸林可霉素和地塞米松磷酸钠。本文基于现有高效液相色谱仪器平台，建立一种能够同时检测复方林可霉素滴耳液中盐酸林克霉素和地塞米松磷酸钠含量的方法。

二、实验过程

（一）仪器与试剂

实验使用的盐酸林可霉素和地塞米松磷酸钠等标准物质均采购于中国食品药品检定研究院;实验使用的复方林可霉素滴耳液（规格25mL/支）采购于鲁银药业公司;实验室用的甲醇、乙腈、四硼酸钠等试剂均为色谱纯，采购于阿拉丁公司。

实验使用的高效液相色谱仪由安捷伦公司提供，型号为Agilent 1100，配套的脱气机型号为G1322A、流量泵为G1311A四元泵、自动进样仪为G1313A、柱温箱为G1316A、检测器为G1314A紫外检测器。实验使用的高精密电子天平采购于瑞士METTER TOLEDO 公司，型号为AE100;实验使用的超纯水仪采购于法国Millipore公司，型号为MER-300B。

（二）实验方法

（1）色谱仪器工作条件

色谱使用的色谱柱为Diamonsil C18色谱柱;流动相：甲醇-乙腈-0.06mol/L四硼酸钠溶液;检测器：紫外光检测器;检测方法：变换波长法，214nm波长下，保留时间在0-10min，241nm波长下，保留时间在10-16min;色谱柱温度：35℃;流动相流速：1.0mL/min;进样：每次自动进样10μL。

（2）溶液配置

使用天平准确称取100mg盐酸林可霉素标准样品，使用去离子水稀释，定容到100mL容量瓶中，此标准溶液记做A溶液;使用天平准确称取5mg地塞米松磷酸钠标准样品，使用去离子水稀释，定容到500mL容量瓶中，此标准溶液记做B溶液;使用移液枪移取10mL复方林可霉素滴耳液样品，定容到50mL容量瓶中，记做供试品溶液。

三、结果与讨论

（一）回归方程现行关系考察

使用移液枪分别移取不同体积的A、B溶液，并稀释定容，配置一系列浓度梯度的盐酸林可霉素和地塞米松磷酸钠标准溶液，对每个溶液按照2.2（1）所描述的仪器工作条件进行检测，以两种标准物质的特征峰峰面积为纵坐标，标准物质的浓度为横坐标，建立标准曲线，并使用软件计算线性回归方程和相关系数。计算的到的盐酸林可霉素标准曲线方程为：Y=2028X-24181（R=0.9998），地塞米松磷酸钠标准曲线方程为：Y=17234X-23999（R=0.9997）。根据配置的标准溶液浓度梯度参数，可以表明，盐酸林美素样品在1220-12200mg/L、地塞米松磷酸钠在9.90-99.00mg/L浓度范围内，表现出了良好的现行关系。

（二）精密度考察

按照2.2（1）所属的色谱工作条件，对固定浓度的盐酸林可霉素和地塞米松磷酸钠标准溶液进行平行检测7次，根据检测结果计算RSD，考察建立的方法的精密度。结果表明，盐酸林可霉素和地塞米松磷酸钠的色谱峰峰面积RSD分别为2.1%和1.5%，两种标准物质的检测RSD控制在1.0%以下，说明建立的检测方法精密度很好。

（三）样品稳定性考察

使用样品溶液为检测对象，以完成制备样品溶液制备开始计时，分别保存样品0、24、48、72h，按照2.2（1）所述的色谱工作条件，对不同保存时间的样品进行高效液相色谱检测，计算检测结果RSD，考察样品的化学性质稳定性。结果表明，盐酸林可霉素和地塞米松磷酸钠的色谱峰峰面积RSD分别为1.2%和1.8%，说明制备的样品在72h内都能保持良好的化学稳定性。

（四）样品检测结果重现性考察

按照2.2（2）所述的供试品溶液配制方法配制样品，準确移取10μL溶液样品按照2.2（1）所述的色谱工作条件，对样品进行5次平行检测。根据检测结果和回归方程计算样品中盐酸林可霉素和地塞米松磷酸钠平均含量和RSD。结果表明，样品中盐酸林可霉素平均含量为101242mg/L，地塞米松磷酸钠平均含量为652mg/L。盐酸林可霉素和地塞米松磷酸钠检测RSD分别为1.58%和1.27%，检测结果重现性好。

（五）样品回收率考察

按照2.2（2）所述的供试品溶液配制方法配制5份复方盐酸林可霉素滴耳液样品，根据样品中盐酸林可霉素和地塞米松磷酸钠的含量加入一定体积盐酸林可霉素和地塞米松磷酸钠标准溶液进行混合定容。按照2.2（1）所述的色谱工作条件，对混合样品进行检测，计算盐酸林可霉素和地塞米松磷酸钠物质的回收率。结果如表1所示。从表1可知，盐酸林可霉素的回收率在96.01%-101.61%之间，地塞米松磷酸钠的回收率在96.42%-99.70%之间，RSD分别为2.14%和1.26%。

四、结论

采用变换检测波长的仪器检测器，在高效液相色谱仪器上建立了建立了复方林可霉素滴耳液中盐酸林可霉素和地塞米松磷酸钠的含量测定方法，通过实验考察，建立的方法具有标准曲线现行关系好、方法精密度高、样品回收率好、样品检测结果重现性好的技术特点。

参考文献：

[1] 韩加怡， 李会林. RP-HPLC测定复方麻黄碱滴鼻液中盐酸麻黄碱、盐酸林可霉素和地塞米松磷酸钠含量的方法学研究[J]. 中国现代应用药学（2）：52-54.

[2] 林银凤. HPLC法测定皮炎水中甲硝唑、盐酸林可霉素、盐酸苯海拉明和地塞米松磷酸钠含量[J]. 海峡药学（10）：96-98.

作者简介：

刘翠（1984-）;性别：女，民族：汉 籍贯：辽宁省营口市，学历：硕士，毕业于新疆大学;现有职称：中级工程师;研究方向：分析化学。